创新性的解决方案:芯弃疾JX-8B数字ELISA应用范围:各种高灵敏多重免疫检测,可替代各种ELISA试剂盒,及其他免疫检测产品。蛋白质生物标志物在区分健康和疾病状态方面的临床应用,而监测疾病进展则需要测量复杂样品中的低浓度蛋白质。目前的免疫测定方法测量的是蛋白质的浓度高于10−12M,6而大多数在病症7、神经疾病8,9和接触早期阶段10中重要的蛋白质的浓度被认为在10−16到10−12M之间。需要提高灵敏度的例子包括:一个由一百万个细胞组成的1毫米³疾病,每个细胞分泌5000种蛋白质到5升液体中。Simoa®由现任于哈佛大学医学院的DavidWalt教授作为科学创始人于2007年创立。DavidWalt是美国的工程院,艺术院和医学院三院院士。2010年,DavidWalt将Simoa®技术以封面文章的形式发表在《NatureBiotechnology》上,此技术开始为大众所知并引起业界轰动。Simoa技术(Single-moleculeArray,Quanterix公司)特点是通用阵列化检测,实现超高的灵敏度,较传统ELISA方法能够高出3个数量级,达到飞克级别(fg/ml)甚至更低。已拿阿兹海默症的两个FDAbreakthroughdevice;通常用于各种科研方向:神经因子、蛋白组学、细胞因子等。 芯弃疾JX-8B数字ELISA,每个生物实验室都能用的单分子检测;单分子阵列数字ELISA优势
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由于活性珠子的百分比接近50%(酶与微球的比例大于~1:1.5),然而,使用图像分析软件区分“开启”和“关闭”孔变得具有挑战性,我们达到了数字动态范围的实际上限。例如,图2中7fM(~45%活性)的信号偏离了线性。因此,这里使用50,000个孔展示的数字线性动态范围是从3.5fM到350zM,即大约四个对数单位。前提是蛋白质使用适当的酶浓度进行标记,这种动态范围对于许多临床应用来说是足够的 芯弃疾免疫检测数字ELISA配置灵活芯弃疾JX-8B数字ELISA,每个医学实验室都能用的单分子检测;
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是目前新型型的单分子检测方法的低成本版、普及版!每个生物/医学实验室都用得起的单分子免疫检测!!使用现有平台就能做的单分子免疫检测!!具有以下特点:多重、超敏、微量、极速、灵活、开放
芯弃疾JX-8B数字ELISA产品每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测SiMoA通过将单个酶产生的荧光团限制在极小范围内,从而能够检测到非常低浓度的酶标记物体积(~50fL),导致荧光产物分子的局部高浓度。为了在免疫测定中实现这种定位,在第二步中,将珠子加载到一个阵列为离散的微升大小的孔(图1C)。本研究中使用的2毫米宽阵列有~50,000个孔,孔径为μm,孔深为μm。加载后的阵列在含有荧光酶底物液滴的情况下,用橡胶密封圈密封。Rissin等人,第3页将每个微球隔离在飞升反应室中。具有单一酶的微球标记的免疫复合物在50飞升的反应室中产生局部高浓度的荧光产物(图1D)。通过使用标准显微镜光学系统获取阵列的时间变化荧光图像,可以区分与单一酶分子相关的微球(“开启”孔)和不与酶相关的微球(“关闭”孔);补充图1显示了“开启”和“关闭”孔的荧光直方图。成像阵列可以成千上万的单个免疫复合物同时检测。通过测定供试品中的蛋白质浓度来确定计算含有珠子和荧光产物的孔数相对于含有珠子的孔数(图1D)。使用SiMoA,浓度是因此,我们称SiMoA应用于检测单个免疫复合物为数字ELISA。 7)数字化高敏ELISA芯片,低成本、便捷、快速进行微量样本的检测;
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珠子以两种不同的方式读出。首先,在与100μMresorufin-阝-D孵育1小时后,用荧光板读出器以100μL方式读出珠子结合-半乳糖苷(RGP),一种荧光底物for阝-半乳糖苷酶。在平板阅读器上,检测限为15fMofS阝G(图2)。其次,将珠子加载然后将RGP溶液密封到阵列的孔中,单个酶的信号被允许在反应室中积累,并每30秒获取一次荧光图像。实验结束时获取阵列的白光图像以识别含有珠子的孔(含有珠子的孔散射光与空井不同)。荧光图像用于确定哪些微球具有相关的结合酶(从时间变化的荧光图像中强度增加)。图2显示了微球中含酶的比例与总体S阝G浓度的关系的对数-对数图。检测到的比较低酶偶联物浓度为350飞摩尔(zM),并通过外推信号等于的酶浓度计算得出的检测限(LOD)。 芯弃疾JX-8B单分子小型化ELISA检测产品,每个医学实验室都能用的单分子检测;IVD数字ELISA购买灵活
芯弃疾JX-8B单分子普惠化ELISA检测产品,超敏检测,低至可测试到亚皮克级;单分子阵列数字ELISA优势
创新性的解决方案:芯弃疾JX-8B数字ELISA应用范围:各种高灵敏多重免疫检测,可替代各种ELISA试剂盒,及其他免疫检测产品。循环血液转化为~2×10−15M(或2飞摩尔,fM);早期HIV传染血清中每mL含有10-3000个病毒颗粒,相当于p24抗原浓度范围为从50×10−18M(50attomolar,aM)到15×10−15M(15fM)10.尝试开发能够测量这些蛋白质浓度的方法集中在蛋白质上的核酸标记复制,11,12或测量整体、结合标记蛋白分子的性质13-16。Mirkin等人12,17及其他研究者18使用基于金纳米颗粒和DNA生物条形码的标记物,已将蛋白质的检测范围扩展至低飞摩尔水平;更近使用该技术的一篇报道展示了检测到10飞摩尔PSA插入物17。这些方法所达到的灵敏度然而,检测蛋白质仍然落后于核酸,如聚合酶链反应(PCR),从而限制了蛋白质组中具有已在血液中检测到6,19。单个蛋白质分子的分离和检测为测量极低浓度的蛋白质s1,2提供了一种有希望的方法。 单分子阵列数字ELISA优势