宁夏**组胚病理切片

病理切片的制作需要取一定大小的病变组织，用病理组织学方法制成病理切片〔通常将病变组织包埋在石蜡块里，用切片机切成薄片，再用苏木精-伊红(H-E)染色〕,用显微镜进一步检查病变。 病变的发 展过程，***作出病理诊断。 病理切片的制作 1.制作病理切片取材 (1)材料新鲜:取材组织愈新鲜愈好，人体组织一般在离体后，动物组织在处死后迅速固定，以保证原有的形态学结构。 (2)组织块的大小:所取组织块较理想的体积为2.0cm×2.0cm×0.3cm，以使固定液能迅速而均匀地渗入组织内部，但根据制片材料和目的不同，组织块的较理想体积也不同，如制作病理外检、科研切片，其组织块可以薄取0.1~0.2cm即可，这样可以缩短固定脱水透明的时间，若制作教学切片厚取0.3 ~0.5cm，这样可以同一蜡块制作出较多的教学切片。 (3)勿挤压组织块: 切取组织块用的刀剪要锋利，切割时不可来回锉动。夹取组织时切勿过紧，以免因挤压而使组织、细胞变形。 (4)规范取材部位: 要准确地按解剖部位取材，病理标本取材按照各病变部位、性质的不同，根据要求规范化取材。宁夏**组胚病理切片

病理切片制作时将部分有病变的组织或脏器经过各种化学品和埋藏法的处理，使之固定硬化，在切片机上切成薄片，粘附在玻片上，染以各种颜色，供在显微镜下检查，以观察病理变化，作出病理诊断。 病理切片操作规范： 一、巨检结束后点清块数，记录签收。 二、组织包埋完成后进行清点蜡块数量。 三、大标本固定时间不得少于6小时；小标本不得少于3小时。 四、固定液必须及时更换，固定后必须流水冲洗。 五、固定、脱水温度不得高于37℃。 六、包埋用石蜡必须过滤。 七、试剂必须及时更换。 八、切片刀必须锋利，用力均匀，切片厚度3—5微米。切片完整无污染，无皱褶。 九、胃镜、穿刺等小活检组织切片必须作连续性切片，数量不得少于8张。 十、组织片贴附，应在除去标签位置后玻片的中间。 十一、封固前必须经酒精充分脱水，二甲苯透明，湿封。 十二、封片时不得有气泡，不得有树胶外溢。 十三、标签必须贴于玻片左侧，编号字迹必须清楚。 十四、取材后的制片工作一般应在2个工作日内完成。 十五、切片完成后交付医师时必须按照记录当面清点质量组胚病理切片厂家报价

染色和封片常用的染色方法是苏木素-伊红（Hematoxylin-Eosin）染色法，简称H.E染色法。这种方法对任何固定液固定的组织和应用各种包埋法的切片均可使用。苏木素是一种碱性染料,可使组织中的嗜碱性物质染成蓝色，如细胞核中的染色质等；伊红是一种酸性染料，可使组织中的嗜酸性物质染成红色，如多数细胞的胞质、核仁等在H.E染色的切片中均呈红色。H.E染色程序如下:脱蜡、脱苯、复水、染色、脱水、透明、封固常规苏木素染色中的对比染色是用伊红,近年来在英、美的一些实验室则采用焰红（phloxine）,此外也有用桔黄G（OrangeG）、比布里希猩红(Biebrich scarlet)、波尔多红(Bordeaux red)等作为对比染色。伊红为染胞质、胶原纤维、肌纤维、嗜酸性颗粒等常用的染料。

组织透明后，在熔化的石蜡内浸渍的过程称为浸蜡。用其他浸透剂（如火棉胶、明胶等）渗入组织内部的过程可称为浸透或透入。浸蜡温度过高（超过60℃），在蜡内加入二 甲苯蜡或由于透明时带进的二甲苯过多浸蜡温度过高（超过60℃），在蜡内加入二 甲苯蜡或由于透明时带进的二甲苯过多都会导致组织发硬，还会使组织内的抗原受到破坏；所以主张浸蜡用的石蜡熔点在56℃左右（三道）***道：尽可能的短；第二三道时间可以适当延长。浸蜡温度控制在56～58℃左右。 修块、切片、贴片、捞片、烤片(1)修整蜡块:可视其组织的大小，在组织边缘约0. 1~0.2cm处，切去余蜡部分，否则易造成组织皱缩不平2)准备好切片用具:切片机、切片刀、毛笔、眼科镊子(弯)、漂烘温控仪等。(3)切片的厚度:切片机的厚度调节器上刻有0~50um， 可任意选择其厚度，石蜡切片的厚度一般在4~6μ m。(4)切片(5)展片:用眼科镊子镊起蜡带轻轻平铺在40~45C的水面上，借水的张力和水的温度，使蜡带自然展平。6)贴片、烘片:待切片在恒温水面上充分展平后，将蜡片捞到载玻片的中段处倾去载玻片上的余水，置入60~65C恒温箱内或切片漂烘温控仪的烘箱内烤片15~30分钟，使组织粘附于载玻片上。

制作组胚病理切片保持材料的清洁:组织块上如有血液、污物、粘液、食物、粪便等，可用水冲洗干净后再放入固定液中。 保持组织的原有形态:新鲜组织固定后，或多或少会产生收缩现象，有时甚至完全变形。为此可将组织展平，以尽可能维持原形。 制作病理切片固定 (1)小块组织固定法:这是相当常用的方法，从人体或动物体取下的小块组织，须立即置入液态固定剂中进行固定，通常，标本与固定液的比例为1:4~20，但组织块不宜过大过厚，否则固定液不能迅速渗透。故取组织块的大小一般为2.0cm×2.0cm×0.3cm。 (2)注射、灌注固定法:某些组织块由于体积过大或固定液极难渗入内部，或需要对整个脏器或整个动物体进行固定。这时宜采用注射固定或灌注固定法。将固定液注入血管，经血管分支到达整个组织和全身，从而得到充分的固定。 (3)蒸汽固定法:比较小而厚的标本，可采用锇酸或甲醛蒸汽固定法。如血液涂片，则应在血片未干燥前采用锇酸或甲醛蒸汽接触固定。 相当常用的固定液有10%甲醛固定液和95%乙醇固定液。直销组胚病理切片推荐

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