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染色和封片常用的染色方法是苏木素-伊红（Hematoxylin-Eosin）染色法，简称H.E染色法。这种方法对任何固定液固定的组织和应用各种包埋法的切片均可使用。苏木素是一种碱性染料,可使组织中的嗜碱性物质染成蓝色，如细胞核中的染色质等；伊红是一种酸性染料，可使组织中的嗜酸性物质染成红色，如多数细胞的胞质、核仁等在H.E染色的切片中均呈红色。H.E染色程序如下:脱蜡、脱苯、复水、染色、脱水、透明、封固常规苏木素染色中的对比染色是用伊红,近年来在英、美的一些实验室则采用焰红（phloxine）,此外也有用桔黄G（OrangeG）、比布里希猩红(Biebrich scarlet)、波尔多红(Bordeaux red)等作为对比染色。伊红为染胞质、胶原纤维、肌纤维、嗜酸性颗粒等常用的染料。原装组胚病理切片性价比出众

制作病理切片脱水透明 标本经过固定和冲洗后，组织中含有较多的水分，必须将组织块内的水分置换出来，这一过程叫做脱水。无论是用石蜡切片，还是用火棉胶切片，都必须除去组织中所含水分，因含水组织与石蜡、火棉胶等包埋材料不相容，常用的脱水剂为一系列不同浓度的乙醇。 脱水的步骤是:80%、90%、95%各种浓度乙醇2小时，此过程可用脱水机自控完成。 **也是一种脱水能力很强的脱水剂，但因其脱水能力很强，对组织有剧烈收缩作用，在制作科研、教学切片时一般不用该试剂。因乙醇、**等不溶于石蜡，还要经过一个能溶于石蜡的溶剂替代过程称为透明。常用的透明剂有二甲苯、三氯甲烷、水杨酸甲酯等。湖北直销组胚病理切片

切片出现空洞 此种情况 ,不仅影响切片的 美观 ,更主要的是易给病理医生的诊断造成遗漏。如果随着蜡带连续深切 ,空洞越变越小 ,说明切片中的空洞是没有切全而造成的人为改变。当切蜡块用的力太大太猛时 ,组织中的小斑点、小斑块会从蜡块中脱落 ,在切片上留下一个个的小空洞。这种情况在脱水、透明或浸蜡处理过度的组织中极易发生 ,如肝、脾、肾、脑、淋巴结以及子宫等组织标本 ,若取 材太薄 ,易造成处理过度 ,蜡块在粗修和切片时经常会出现空洞。所以 ,取材时标本的厚度要适中 ,不能太薄。切片时如果遇到此类蜡块 ,可将蜡块在冰盘冷却片刻或用湿的棉花沾一下 ,蜡块接触刀刃用力不能太猛太重 ,以减少这一人为现象的出现。如果发现蜡带上的组织切片出现空洞 ,只要蜡块中的组织充足 ,应尽量再缓慢切片 ,直到空洞消失。另外 , 空洞也可能是因为组织在浸蜡时 ,蜡液中有残留的空气存在 所致。这种情况在肺组织标本中尤为多见 ,即使连续切片空 洞也不容易消失。如果并非急诊病理诊断需要 ,可以放在空气中受热过夜 ,这对有照相需要的切片尤为有利。

制作病理切片浸蜡、包埋 (1)使石蜡浸入组织中，取代组织中含有的透明剂。 (2)包埋:将浸蜡后的组织置于融化的固体石蜡中，石蜡凝固后，组织即被包在其中，称蜡块，此过程称为包埋。 5.制作病理切片切片和贴片 (1)修整蜡块:可视其组织的大小，在组织边缘约0.1~0.2cm处，切去余蜡部分，否则易造成组织皱缩不平。 (2)准备好切片用具:切片刀、毛笔、眼科镊子(弯)、漂烘温控仪 (3)安装蜡块:将修好的蜡块安装在金属或木制持蜡器上。 (4)安装切片刀:将切片刀安装在切片机的刀台上，把刀台上的紧固螺丝旋紧，使切片时不产生振动，能保持一定的切片厚度。 (5)切片的厚度:切片机的厚度调节器上刻有0~50μm或0~25μm，可任意选择其厚度，石蜡切片的厚度一般在4~6μm。 (6)切片 (7)铺片:用眼科镊子镊起蜡带轻轻平铺在40~45℃的水面上，借水的张力和水的温度，将略皱的蜡带自然展平。 (8)贴片、烘片:待切片在恒温水面上充分展平后，将蜡片捞到载玻片的中段处倾去载玻片上的余水，置入60~65℃恒温箱内或切片漂烘温控仪的烘箱内烤片15~30分钟，脱去溶化组织间隙的石蜡。

病理切片制作时将部分有病变的组织或脏器经过各种化学品和埋藏法的处理，使之固定硬化，在切片机上切成薄片，粘附在玻片上，染以各种颜色，供在显微镜下检查，以观察病理变化，作出病理诊断。 病理切片操作规范： 一、巨检结束后点清块数，记录签收。 二、组织包埋完成后进行清点蜡块数量。 三、大标本固定时间不得少于6小时；小标本不得少于3小时。 四、固定液必须及时更换，固定后必须流水冲洗。 五、固定、脱水温度不得高于37℃。 六、包埋用石蜡必须过滤。 七、试剂必须及时更换。 八、切片刀必须锋利，用力均匀，切片厚度3—5微米。切片完整无污染，无皱褶。 九、胃镜、穿刺等小活检组织切片必须作连续性切片，数量不得少于8张。 十、组织片贴附，应在除去标签位置后玻片的中间。 十一、封固前必须经酒精充分脱水，二甲苯透明，湿封。 十二、封片时不得有气泡，不得有树胶外溢。 十三、标签必须贴于玻片左侧，编号字迹必须清楚。 十四、取材后的制片工作一般应在2个工作日内完成。 十五、切片完成后交付医师时必须按照记录当面清点原装组胚病理切片性价比出众

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