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发光酶免疫分析法从标记免疫分析角度, 化学发光酶免疫分析( chem ilum inescen t enzym e imm unoassay,CL E IA ) , 应属酶免疫分析, 只是酶反应的底物是发光剂,操作步骤与酶免分析完全相同[ 5 ]: 以酶标记生物活性物质(如酶标记的抗原或抗体) 进行免疫反应, 免疫反应复合物上的酶再作用于发光底物,在信号试剂作用下发光, 用发光信号测定仪进行发光测定。目前常用的标记酶为辣根过氧化物酶(HRP) 和碱性磷酸酶(AL P) ,它们有各自的发光底物。RP 标记的CLEIA常用的底物为鲁米诺(32氨基邻苯二甲酰肼,lum ino l) ,或其衍生物如异鲁米诺(42氨基邻苯二甲酰肼) , 是一类重要的发光试剂。其结构如图4 所示。免疫功能的异常可能导致免疫缺陷或自身免疫疾病（如红斑狼疮、类风湿关节炎等）。杨浦区名优免疫分析仪调试

鲁米诺的氧化反应在碱性缓冲液中进行,在过氧化物酶及活性氧[ 过氧化阴离子(O 2- ) , 单线态氧(1O 2 ) , 羟自由基(OH·) , 过氧化氢(H2O 2)]存在下,生成激发态中间体, 当其回到基态时发光, 其波长为425nm。早期用鲁米诺直接标记抗原(或抗体) ,但标记后发光强度降低而使灵敏度受到影响。近来用过氧化物酶标记抗体, 进行免疫反应后利用鲁米诺作为发光底物, 在过氧化物酶和起动发光试剂(NaOH2H2O 2) 作用下, 鲁米诺发光, 发光强度依赖于酶免疫反应物中酶的浓度。Kodak Am erliteTM半自动分析系统就是利用这一体系专门设计的。浦东新区质量免疫分析仪图片监测抗癫痫药物、免疫抑制剂等需严格控制浓度的药物，确保疗效并避免中毒。

定量分析：仪器测量信号强度，结合标准曲线或参考范围，计算目标分子浓度。技术类型：酶联免疫吸附试验（ELISA）：通过酶标记抗体与底物反应产生颜色变化，适用于常规检测。化学发光免疫分析（CLIA）：利用化学发光反应，灵敏度高，动态范围宽。荧光免疫分析（FIA）：通过荧光标记抗体检测信号，适用于极低浓度物质检测。放射免疫分析（RIA）：使用放射性同位素标记，灵敏度极高，但需特殊防护。二、主要应用场景临床诊断：传染病检测：如HIV、乙肝病毒（HBV）、丙肝病毒（HCV）抗体检测。

1.全自动化学发光免疫分析仪采用化学发光技术和磁性微粒子分离技术相结合，是一个全自动、随机存取、软件控制的智能分析系统。在反应体系中，固相载体用磁性颗粒。其直径*1.0um，**增加了包被表面积，使抗原或抗体的吸附量增加，反应速度加快，清洗和分离也更加简单。具有操作灵活，结果准确可靠，试剂贮存时间长，自动化程度高等优点。2.全自动微粒子化学发光免疫分析仪采用微粒子化学发光技术对人体内的微量成分以及药物浓度进行定量测定，具有高度的特异性、敏感性和稳定性等特点。定期清洗仪器，更换消耗品（如滤网、泵管），校准光学系统与液路系统。

夹心法：多用于测定大分子的抗原物质。标记抗体与被测抗原同时与包被抗体结合，生成包被抗体-测定抗原发光抗体的复合物。仪器利用某些化学基团标记在抗原或抗体上，该化学基团被氧化后形成激发态，在返回基态的过程中释放出一定波长的光子，光电倍增管将接受到的光能转变为电能，以数字形式反映光量度，再计算测定物的浓度。2. 全自动微粒子化学发光免疫分析仪应用经典的免疫学原理，采用单克隆抗体试剂，以磁性微粒作为固相载体，碱性磷酸酶为标物，发光剂采用3-(2'-螺旋金刚烷)-4-甲氧基-4-(3"-磷酰氧基)苯-1,2-二氧杂环丁烷（AMPPD) ,小分子物质采用竞争法或抗体捕获法进行测定，而大分子物质采用夹心法行测定。结合反应通过酶催化、化学发光或荧光标记产生可测信号（如颜色变化、荧光强度）。青浦区名优免疫分析仪维保

它广泛应用于医学诊断、药物研发、食品安全检测等领域。杨浦区名优免疫分析仪调试

化学发光免疫分析（CLIA）采用吖啶酯、鲁米诺等发光物质标记抗原/抗体，通过酶促反应或电化学发光产生光信号。例如，安图生物AutoLumoA6000单模块检测速度达600测试/小时，联机后比较高可达2400测试/小时，其管式磁微粒酶促化学发光技术可实现**标志物（如CEA、AFP）的pg级检测，灵敏度较传统方法提升10倍以上。酶联免疫吸附试验（ELISA）通过酶标记抗体与底物反应产生颜色变化，以吸光度值定量分析。全自动酶联免疫分析仪采用8通道光纤快速检测系统，分辨率达0.0001OD（内部计算），可同时处理96孔酶标板，适用于大规模传染病筛查（如HIV、HBV）。杨浦区名优免疫分析仪调试

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