如何解冻血清?血清解冻需采用逐步解冻法:将血清从-20℃冰箱放入4℃冰箱中溶解,然后移入室温,待全部溶解后再分装。在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),减少沉淀生成。切勿直接将血清从-20℃转入37℃解冻,这样因温差较大易造成蛋白质凝结并出现沉淀。需要对新买的血清进行过滤吗?血清在ISO13485认证的厂房中生产,经过3次0.1μm过滤,出厂经过检测并且会使用三种以上的细胞株进行培养测试及无菌检测,污染几率非常低。通常细胞污染有非常多的可能性,根据协助使用者进行分析检测,结果表明绝大部分都是因人为操作失误导致污染。因此买来的血清不需要再次进行过滤。血清的成份可能有几百种之多,对其准确的成份、含量及其作用机制仍不清楚。常州优等胎牛血清哪里有卖
非正规胎牛血清的产品会存在很多的问题:疫区来源,无合格质检使胎牛血清存在生物学污染:支原体、噬菌体、病毒、原虫等,会直接影响实验的结果和稳定。工艺不规范,导致采集的原血放置时间过长或操作不当导致溶血,血液中血细胞裂解,血清颜色呈红色或暗红色,这样的血清含有许多胞内产物,里面很多物质都会对细胞有刺激作用,影响实验的稳定性和数据的真实性。血清批次不稳定,添加来补?很多不法商贩拿到低廉的疫区原料血清进行加工生产,为了保障血清的培养效果会对血清进行处理,较为常见的是添加、转铁蛋白、BSA、生长因子等,还有的会和新生牛血清、培养基等勾兑,更有甚者用的根本就不是牛血清,此类操作对所有生物学实验都有巨大的影响。常州优等胎牛血清哪里有卖血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、无机物等。
多数细胞培养中血清的热灭活并不是必要的。很多场合下,热灭活并不会改善细胞的生长,却降低了支持细胞生长的能力。即使在少数有促进的情况下,其促进的比率也是微不足道的。另外,血清的热灭活导致的沉淀常常被认为是微生物的污染,从而给用户和供应商都带来不必要的麻烦。所以胎牛血清不推荐热灭活。热灭活一般是指在做免疫相关的试验中,通过加热灭活掉血清中的补体,以避免对免疫试验的影响。在胎牛血清中,由于胎龄原因,尚未形成完整的补体系统,因此,胎牛血清不会真正干预免疫试验。故不需灭活。并且,热灭活反而可能导致胎牛血清中部分重要的生长因子的活性衰减,进而影响细胞培养效果。
胎牛血清的合规血源产地对于细微差异即可决定成败的细胞培养技术来说,选择来源安全、品质优良的胎牛血清至关重要。作为牛肉制品的副产品,胎牛血清的传统产地包括澳大利亚,新西兰, 美国, 南美(乌拉圭&巴西)以及欧洲等畜牧业发达的区域。业内通常会根据不同产地的牛情况,将胎牛血清分为特级胎牛血清以及很好胎牛血清。例如新西兰全境、澳大利亚及北美的部分区域从未爆发过疯牛病(BSE)和口蹄疫(FMD),因此这些产地的胎牛血清被定义为特级胎牛血清;而南美的胎牛血清则被定义为很好胎牛血清。另外,中国国产的胎牛血清在市场上并不多见,这一方面是由于是养殖模式的差异导致的,另一方面也受到过度使用的影响。血清都是批量生产,各批量之间差异很大,而且血清保存期至多一年。
购买回来的血清都是冰冻状态,使用时需要融化,融化过程在温度较低的状态下慢慢进行,待溶解完成,我们观察到的胎牛血清会表现出黄色或红色。并不是越红越好,也不是越黄越好,淡黄色到淡红色才是比较正常的颜色范围。很多培养细胞的宝宝会发现进口血清有沉淀,从而怀疑血清的质量问题。那么,血清中可能出现的沉淀物是什么?纤维蛋白,它是经常出现的较大的沉淀物,可以达到1-2mm,可以用肉眼观察到。磷酸钙,它也是常见的一种沉淀物,通常会使血清出现浑浊,并且在37℃培养的时候会增加。这种沉淀物在倒置显微镜下观察像小黑点,这些小黑点由于布朗运动看上去可以活动,因此经常被误认为是微生物污染。胆固醇、脂肪酸酯以及一些蛋白质,它们也是血清中出现沉淀物的常见原因。关于细胞生长,其实很多试验以及经验表明沉淀物不会影响细胞培养,当然血清生产商也是这样说的。胎牛血清的无菌检验:阴性;支原体检验: 阴性;细菌内有毒的 ≤5(EU/ml)。合肥不含外泌体血清品牌
血清提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤。常州优等胎牛血清哪里有卖
如何储存和解冻血清才不会使产品质量受损?将血清从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融。但必须注意的是,融解过程中必须规则地摇晃均匀。长时间储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。因此,推荐在-20℃以下储存血清,并避免反复冻融。我们建议血清应保存在-2O℃。若存放于4℃时,请勿超过一个月。若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。血清中包含絮状沉淀,它们是什么,怎么处理?沉淀包含纤维蛋白和脂蛋白。这是正常特性,不会影响产品性质。要除去沉淀,离心血清(400g,1-2分钟)或者简单的让其沉淀在瓶子底部,将血清小心的转移到另一个无菌瓶里(一般不建议采用过滤的方法除去沉淀,因为沉淀会堵塞滤膜而无法过滤)。大多情况轻轻摇动沉淀并加热至37℃就会再溶解。所以,使用产品时要摇动并加热血清至37℃,沉淀会自然消失。常州优等胎牛血清哪里有卖
胎牛血清存在一些问题,如批次间的变异性、潜在的病原体污染和免疫原性等。批次间的变异性是指不同批次的胎牛血清在成分和质量上存在差异。这可能会对实验结果的可重复性和可比性造成影响。为了解决这个问题,一些研究人员提出了对胎牛血清进行特殊处理的建议。例如,可以通过超速离心、过滤、冻干等方法来去除一些不需要的成分,以提高胎牛血清的一致性和稳定性。另一个问题是潜在的病原体污染。胎牛血清是从动物体内提取的,因此存在一定的病原体污染风险。这些病原体可能包括病毒、细菌、菌等。虽然现代的血清处理方法可以有效地去除或灭活大部分病原体,但仍然存在一定的风险。为了降低这个风险,一些研究人员建议使用经过特殊处理的胎牛血清...