为何血清会存在批间差?如何避免此影响?因为血清来源于动物,其组成成分有1000种左右,每个批号的组分和组分含量都是不固定的,因此批间差异是可能存在的。为了避免批间差异对细胞的影响,XP建议先进行批号测试,筛选合适的批号,备好库存(血清未开封时,在-20℃下可保存5年)。如需更换血清批次或产地,建议先试用后再大量订购。血清中沉淀是什么成分?造成原因有哪些?如何预防和处理沉淀?血清中沉淀主要有:纤维蛋白(絮状沉淀),甲胎蛋白,脂蛋白,冷凝集素,玻粘连蛋白,磷酸钙[1](显微镜下小黑点沉淀),胆固醇等。原因:造成沉淀的主要原因是温度的改变。热灭活,反复冻融,长期储存于2-8℃或者室温。预防措施与建议:因此不立即使用的血清应保存在-20℃或以下。血清应保存在-5℃至-20℃,然而,若存放于4℃时,请勿超过一个月。厦门细胞培养用血清多少钱
胎牛血清:八月龄胎牛心脏穿刺取血;新生牛血清:出生12-24小时新生牛静脉;又可细分为:a.高级新生牛血清:后静置自然析出的血清;b.标准新生牛血清:c.经离心分离的血清;d.普通新生牛血清:融血或微融血的血清;小牛血清:出生三月龄小牛动脉分离血清;血清是血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。对血清的成分和作用的研究虽有很大进展,但仍存在一些问题。胎牛血清是品质较为高的,因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分较为少。东莞不含外泌体胎牛血清哪家好热灭活:一般是以56℃,30分钟来处理已解冻的血清,因为此加热步骤,可以使补体去活化。
添加胎牛血清的时候要注意避免把沉淀加入培养液,因为如果培养液有沉淀的存在,会使得其中培养的细胞产生大量的黑点,除此之外,细胞的表面还很可能会覆盖一层油状物质,总之出现这样的情况会极其不利于细胞的正常生长。那么为了较为大程度减少血清的损失,可以把所有有沉淀的血清进行收集并做离心处理,之后便可将上清液加入培养液中使用。注意解冻的方法:再高质量的胎牛血清也要在使用的时候坚持谨慎的原则,因此在解冻血清的时候,要细心地考虑到其解冻时体积一般会增大的特点,事先为血清预留出能够容纳膨胀体积的空间。如此一来,便不会发生污染或者容器冻裂的情况。另外较为好采用国际通用的解方式解冻血清。
国际上流行的【血清融化三步法】可较为大限度地保存血清中因子的活性,不会产生沉淀,同时能缩短血清融化时间。关于胎牛血清的灭活:真正的胎牛血清因为胎牛没有形成有效补体,如果针对补体灭活的话,就不需要。其他情况根据实验设计来决定。胎牛血清的浓度:胎牛血清通常是以2%~20%的比例加到基础培养基中,混合后配成完全培养基。曾有文献报道,不同胎牛血清浓度对细胞存在一定的影响,尤其是干细胞和原代细胞。具体很好浓度需要用户根据自己的实验来确定,以既保证培养的效果,又避免血清的浪费。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛。
血清的常见问题:保存方法,血清应保存在-5℃至-20℃。然而,若存放于4℃时,请勿超过一个月。若您一次无法用完一瓶,建议将无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。解冻方法:将血清从冷冻箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,然后在室温下使之全溶。但必须注意的是,溶解过程中必须规则地摇晃均匀。避免产生沉淀物:解冻血清时,请按照所建议的逐步解冻法(-2℃至4℃至室温),若血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃),实验显示非常容易产生沉淀物。解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。新牛血清取自出生24小时之内的新生牛。东莞不含外泌体胎牛血清哪家好
血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物。厦门细胞培养用血清多少钱
胎牛血清的主要成分:蛋白质类包括白蛋白、球蛋白、α-巨球蛋白(抑制胰蛋白酶的作用)、胎球蛋白(促进细胞附着)、转铁蛋白(能结合铁离子,减少其毒性和被细胞利用)、纤维粘连素(促进细胞附着生长)等;多肽类,主要是一些促进细胞生长和分裂的生长因子,较为主要的生长因子是血小板生长因子,还有成纤维细胞生长因子、表皮细胞生长因子、神经细胞生长因子等,虽然在血清中含量很少,但对细胞的生长和分裂也起着重要作用;类,对细胞的作用是多方面的。包括:胰岛素:促进细胞摄取葡萄糖和氨基酸,与促细胞分裂有关;类胰岛素生长因子:能与细胞表达的胰岛素受体结合,从而有胰岛素同样的作用:促生长:促进细胞增殖的效应;氢化可的松:血清中含有微量该成分,它可能具有促细胞贴附和增殖作用。但有人证明,血清中 的氢化可的松,在细胞密度较高时可能有抑制细胞生长和诱导细胞发生分化的作用。厦门细胞培养用血清多少钱
胎牛血清存在一些问题,如批次间的变异性、潜在的病原体污染和免疫原性等。批次间的变异性是指不同批次的胎牛血清在成分和质量上存在差异。这可能会对实验结果的可重复性和可比性造成影响。为了解决这个问题,一些研究人员提出了对胎牛血清进行特殊处理的建议。例如,可以通过超速离心、过滤、冻干等方法来去除一些不需要的成分,以提高胎牛血清的一致性和稳定性。另一个问题是潜在的病原体污染。胎牛血清是从动物体内提取的,因此存在一定的病原体污染风险。这些病原体可能包括病毒、细菌、菌等。虽然现代的血清处理方法可以有效地去除或灭活大部分病原体,但仍然存在一定的风险。为了降低这个风险,一些研究人员建议使用经过特殊处理的胎牛血清...