血清的保存应该注意:热灭活是指56℃,30分钟加热已完全解冻的血清。加热过程中须规则摇晃均匀,此热处理的目的是使血清中的补体成分(complement)灭活,除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成血清沉淀物明显增多,而且还会影响血清的质量,补体参与反应有:细胞毒作用,平滑肌细胞收缩,肥大细胞和血小板释放组胺,增强吞噬作用,促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化。一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤除菌,如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清。血清中的沉淀物、絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成。绍兴细胞培养用血清厂家
胎牛血清的合规血源产地对于细微差异即可决定成败的细胞培养技术来说,选择来源安全、品质优良的胎牛血清至关重要。作为牛肉制品的副产品,胎牛血清的传统产地包括澳大利亚,新西兰, 美国, 南美(乌拉圭&巴西)以及欧洲等畜牧业发达的区域。业内通常会根据不同产地的牛情况,将胎牛血清分为特级胎牛血清以及很好胎牛血清。例如新西兰全境、澳大利亚及北美的部分区域从未爆发过疯牛病(BSE)和口蹄疫(FMD),因此这些产地的胎牛血清被定义为特级胎牛血清;而南美的胎牛血清则被定义为很好胎牛血清。另外,中国国产的胎牛血清在市场上并不多见,这一方面是由于是养殖模式的差异导致的,另一方面也受到过度使用的影响。金华去外泌体胎牛血清供应商切勿将血清在37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中的有效成分会破坏而影响血清质量。
血清的安全风险因素主要有以下方面:地理因素,地理因素包括血清产地的流行病学趋势、基础设施情况以及血源供应量。措施得当可以预防能避免的动物疾病,同时产地国稳定可靠的基础设施,对保证供应链的安全也十分必要。血源是否充足则决定了血清是否可源源不断地持续供应。生产,生产遵循cGMP指南,则可保证血清质量,降低有关无菌过滤、掺加和标签错误的风险。cGMP为现场审核的开展提供了框架。生产过程中对血清进行有效的无菌过滤也是十分重要的。产品质控,有效的无菌过滤使得细菌污染的风险很低。对于支原体和病毒筛查,一些相关规范内部存在一定的方法灵活性,这使得采取不同方法进行支原体和病毒筛查成为可能,并且有时使得要筛查的病毒种类无需太多。有效辐照,要进一步降低外源因子风险,可对血清进行辐照(25–40 kGy)。但辐照并不能保证病毒污染的完全去除。辐照过量会导致FBS效能下降。
血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。胎牛血清的细菌内有毒的 ≤5(EU/ml);牛腹泻病毒:阴性;大肠杆菌噬菌体:阴性;支持细胞增殖(Sp2/0-Ag14) 生长曲线(接种浓度)较为大增殖浓度≥2.5×106 个/ml;细胞倍增时间 ≤15h;克隆率 ≥85%。请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清会变得混浊。
合格的胎牛血清都需要经过严格的多重质检和验证,这里需要特别关注胎牛血清的相关质量合格证明,不但不能含有有害微生物,如细菌、菌类、支原体、病毒等,同时也必须通过了各种性能测试实验。通过验证细胞的形态、增殖速度、克隆形成率等多项测试,性能表现优异的胎牛血清对细胞培养更友好,效果更明显。胎牛血清作为畜牧业的副产品,产量十分有限,且受到天然环境、食物卫生、经济条件及等各种因素的影响,很好的胎牛血清就更加稀有。因此,找到稳定提供同批次胎牛血清的供应商,对于确保自己细胞实验结果的真实性和可重复性具有重要意义,还能大量节省试错(经济)成本。血清的成份可能有几百种之多,对其准确的成份、含量及其作用机制仍不清楚。金华去外泌体胎牛血清供应商
血清的保存应该注意:需要长期保存的血清必须储存于-20℃-70℃低温冰箱中。绍兴细胞培养用血清厂家
牛血清是细胞培养中用量较为大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份,常用于动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能。提供对维持细胞指数生长的,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他等,能结合或调变它们所结合的物质活力。有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到医治作用。是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。起酸碱度缓冲液作用。提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。绍兴细胞培养用血清厂家
胎牛血清存在一些问题,如批次间的变异性、潜在的病原体污染和免疫原性等。批次间的变异性是指不同批次的胎牛血清在成分和质量上存在差异。这可能会对实验结果的可重复性和可比性造成影响。为了解决这个问题,一些研究人员提出了对胎牛血清进行特殊处理的建议。例如,可以通过超速离心、过滤、冻干等方法来去除一些不需要的成分,以提高胎牛血清的一致性和稳定性。另一个问题是潜在的病原体污染。胎牛血清是从动物体内提取的,因此存在一定的病原体污染风险。这些病原体可能包括病毒、细菌、菌等。虽然现代的血清处理方法可以有效地去除或灭活大部分病原体,但仍然存在一定的风险。为了降低这个风险,一些研究人员建议使用经过特殊处理的胎牛血清...