前面已经说灭活病毒保存液可以使病毒失去活性,失去活性后是怎么来进行检测的呢?我们使用灭活型保存液的目的是裂解核酸,释放核酸然后通过后续的实时荧光RT-PCR进行核酸检测,通过这种方法来判断样本是否含有病毒特征核酸,即是否了病毒。而病毒结构单一,就只含有一种核酸和蛋白质,因此检测出特征核酸就检测出了病毒。通常我们在病毒采样后,样本并不是都能在样本采集处进行运输和保存的,因此我们就需要对采集到的病毒拭子进行运输和保留,不然病毒核酸会很快降解就无法检测到核酸了,所以就需要往采样管里加保存液来让病毒的核酸不要那么快被降解。作为核酸检测的第一步样本采集与保存的重要性毋庸置疑很长一段时间市场上的病毒保存液都是直接保存活病毒。广东病毒保存液价格便宜
病毒是一种非常微小的生物,是由核酸和蛋白外壳构成的,没有自己的代谢机构,没有蛋白酶系统。因此病毒离开宿主细胞的话,就没法继续生存了。这么微小的生物却能给我们带来很多疾病,如常见的流行传染病通常是RNA病毒、流感病毒、毒和甲流病毒等。由于它自己本身没有细胞结构,病毒本身不能复制,而是将基因侵入宿主细胞内,借助后者的复制系统复制新的病毒。病毒样本采集后,为了维持病毒样本的活性、延长样本中病毒存活时间,会将采样拭子放入保存液中保存和运输。国内病毒保存液价格便宜在Hank's基础之上,添加4-羟乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)、BSA(牛血清白蛋白第五组分)等病毒稳定成分。
灭活型病毒保存液主要是核酸提取裂解液改良的病毒裂解型保存液,液体含有高浓度的裂解盐,能够迅速高效地使待测样本里的病毒蛋白裂解失活,可以有效防止,同时又含有Rnase酶抑制剂,能保护病毒核酸不被降解,后续的NT-PCR实验只要能检测出病毒的核酸既可以做出诊断。而且能够在常温下保存相对较长的时间。
病毒的检测不同于常规的生化检测,病毒本身是一种结构简单的微生物,必须 寄生在活细胞内。采样后,病毒离开寄主细胞,在采样管内其蛋白质外壳和核酸都会很快降解,这样核酸检测时就无法判断初始采集的样本是否含有病毒,容易造成假阴性。
灭活型病毒保存液里含有裂解盐等成分,主要目的是裂解核酸并释放出核酸,从而通过后续的实时荧光RT-PCR进行核酸检测,以判断样本是否含有病毒特征核酸,即是否病毒。
核酸是由许多核苷酸聚合成的生物大分子化合物,包括脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)两类,是生命的基本物质之一。病毒结构单一,就只含有一种核酸和蛋白质,因此检测出特征核酸就检测出病毒。病毒属于寄生生物,采样后体外无法存活,如果不能及时检测,就需要放入病毒保存液中。为了保护病毒检测环境的安全性,就需要加入裂解盐来灭活病毒,释放出可以被检测的核酸即可。 从采集完样品到开始检测,中间可能遇到各种问题,比如异地运输或邮寄标本。
采样前,在标签上注明样品信息;
根据不同的实验目的,用采样拭子在相应的部位采样;
采样后迅速将拭子放入含病毒运送培养基采样管中,在折断点处将其折断,旋紧管盖;
使用灭活款采样管新鲜采集的标本,可在常温(5-25°C)条件下,7天内运送至实验室,运输时有冰袋的效果会更好。用于核酸检测的标本,24小时内检测效果更好。
具体采样方法如下:
(1)鼻拭子:将拭子头轻轻插入鼻道内鼻腭处,停留片刻后缓慢转动退出。以另一拭子拭另侧鼻孔,将拭子头浸入采样液中,在折断点处将其折断,弃之。(适合用本产品采样)
(2)咽拭子:用拭子擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁,同样将拭子头浸入采样液中,弃之。(适合用本产品采样)。 能保护病毒核酸不被降解,从而使后续能通过NT-PCR进行检测。上海病毒保存管病毒保存液供应商
可以用来采集咽拭子鼻拭子或者特定部位的组织样本储存的样本可以用于后续的核酸检测或者病毒培养临床实验。广东病毒保存液价格便宜
对于不同的检测目的,需要选择不同的病毒采样管,目前使用的这两种病毒采样管各有特点。为了满足不同的检测要求,以及不同的病毒检测实验室条件,采样不同的病毒采样管是非常有必要的。但是需要注意的是:不管是灭活型还是非灭活型,在采样之前的病毒采样管都必须严格灭活杀菌,保证管内没有其他微生物,致使采样后病毒分解或其它影响造成错误检测。拭子取样后,如果使用质量欠缺的采集工具或保存液,会影响后续的检测结果甚至造成误诊的假阳性,因此一定要选择具有专业资质厂家生产的病毒采样管。 广东病毒保存液价格便宜
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