另一种以核酸提取裂解液为基础配制的保存液,主要成分为平衡盐类、EDTA螯合剂、胍盐(如异硫氰酸胍、盐酸胍等)、阴离子表面活性剂(如十二烷基硫酸钠)、阳离子表面活性剂(如十四烷基三甲基草酸铵)、苯酚、8-羟基喹啉、二硫苏糖醇(DTT)、蛋白酶K等几种或多种组分,这种保存液是直接裂解病毒释放核酸,消除核酸分解酶(RNase),如果用于RT-PCR较为合适,但裂解液可以灭活病毒,这种样本不能用于病毒的培养分离。
病毒保存液使用的金属离子螯合剂推荐使用EDTA盐类(如乙二胺四乙酸二钾、乙二胺四乙酸二钠等),不推荐使用肝素类(如肝素钠、肝素锂),以免影响PCR检测。 还添加了牛血清白蛋白(BSA)作为蛋白质稳定剂,可保护病毒的蛋白质外壳,使其不易分解。广州非灭活型病毒保存液直销价格
制造保存管的材质应注意选择,有资料提示聚丙烯(Polypropylene)与核酸的吸附有关,特别是在高张力离子浓度时,聚乙烯塑料(Polyethylene)比聚丙烯(Polypropylene)更容易抓住DNA/RNA。聚乙烯-丙烯聚合物(Polyallomer)塑胶与某些特殊处理的聚丙烯(Polypropylene)塑胶容器更适合做DNA/RNA的储存使用。另外,在使用可折断拭子时,保存管应尽量选择高度大于8厘米的容器,以防止在折断拭子时内容物外溅污染。
生产保存液的水:生产保存液使用的超纯水应经过分子量为13,000的超滤膜过滤,以保证去除生物来源的聚合物杂质,例如RNase、DNase和内,不推荐使用普通纯化水或蒸馏水。 天津核酸检测病毒保存液****病毒保存液包括Hank's液基础、庆大霉素、、BSA (V)、冷冻保护剂、生物缓冲剂和氨基酸。
对于不同的检测目的,需要选择不同的病毒采样管,目前使用的这两种病毒采样管各有特点。为了满足不同的检测要求,以及不同的病毒检测实验室条件,采样不同的病毒采样管是非常有必要的。但是需要注意的是:不管是灭活型还是非灭活型,在采样之前的病毒采样管都必须严格灭活杀菌,保证管内没有其他微生物,致使采样后病毒分解或其它影响造成错误检测。拭子取样后,如果使用质量欠缺的采集工具或保存液,会影响后续的检测结果甚至造成误诊的假阳性,因此一定要选择具有专业资质厂家生产的病毒采样管。
灭活型病毒保存液可以对新鲜的临床病毒标本进行蛋白变性而起到病毒灭活作用,杜绝二次传播,保障运输及检测人员的安全。已灭活的样本可以搭配搭配多种病毒提取试剂盒进行使用,核酸提取仪快速提取核酸,同时配合呼吸道病原体PCR检测试剂盒实现快速检测,特异性灵敏度均不受影响。
病毒保存液具有很多功能:
①、操作简单,液体内含有能让蛋白变性的成分,从而起到病毒灭活的作用;
②、内含抑制剂,更大程度地保护病毒核酸稳定不被降解,大幅度提高核酸提取率;
③、产品采样前可常温保存12个月,采样后样本可常温保存一周,密闭性好,方便保存运输,节省运输成本。
针对这种情况,抗疫非常需要能直接灭活病毒的样本保存液,这样可以较大提高样本采集、运输过程中的安全性。
保存液存放一段时间后,容易坏掉。清亮的保存液变浑、长霉、长菌,晚节不保,令人唏嘘。长出菌的还算好,知道不能用。那些已经污染却还将长未长的,躲在哪个盒子里边,用在哪个患者身上,对结果产生*影响,就天知地知了。防止污染,无疑是生产、品控过程的不小挑战。当然,也并不难处理,洁净车间、添加等举措,都能够从容应对。
因为病毒保存液是液态的,在运输过程中有些保存液遇到野蛮装卸或者受航空运输的负压影响,就容易发生渗漏,这样整盒整箱都得报废。如果包装不到位发生渗漏,这样就会很麻烦,所以在包装材质的遴选、结构的设计、制造工艺等这些方面一定要把好关。 通常在数分钟内,病毒的衣壳蛋白就会发生变性,使病毒失去能力。天津非灭活病毒保存液价格便宜
其实也就是非灭活型的病毒保存液,导致采样、运输和检测中的医护人员均面临较高的风险。广州非灭活型病毒保存液直销价格
市场上使用的病毒保存液主要有两种,一种是以运送培养基为基础改良的病毒维持液,另一种则为核酸提取裂解液改良的保存液。
前者的主要成分是Eagle's基础培养液(MEM)或Hank's平衡盐,添加了病毒生存所需的盐类、氨基酸、维生素、葡萄糖以及蛋白质,这种保存液使用酚红钠盐做为指示剂,溶液pH值在6.6-8.0时溶液呈粉红色。保存液中添加了必须的葡萄糖、L-谷氨酰胺和蛋白质,蛋白质的提供形式有胎牛血清或牛血清白蛋白,可以稳定病毒的蛋白质外壳。由于保存液营养成分丰富,有利于病毒的成活但是也有利于细菌的生长,如果保存液中污染了细菌,则会大量繁殖,其代谢产物中的二氧化碳会使保存液pH值下降,从粉红色变为黄色。因而大多数厂家都在配方中添加了抑菌剂成分,推荐使用的抑菌剂为青霉素、链霉素、庆大霉素及多粘菌素B等,不推荐使用叠氮钠、2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮(MCI)和
5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮(CMCI)等抑制剂,因为这些组分对PCR反应有影响。由于这种保存液提供的样本基本是活病毒,可以很大程度保持样本的原始性,后续不仅可以用于病毒的核酸提取检测,还能用于病毒的培养和分离。但是用于检测时应该注意的是必须灭活以后再进行核酸提取纯化。
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