购买回来的血清都是冰冻状态,使用时需要融化,融化过程在温度较低的状态下慢慢进行,待溶解完成,我们观察到的胎牛血清会表现出黄色或红色。并不是越红越好,也不是越黄越好,淡黄色到淡红色才是比较正常的颜色范围。很多培养细胞的宝宝会发现进口血清有沉淀,从而怀疑血清的质量问题。那么,血清中可能出现的沉淀物是什么?纤维蛋白,它是经常出现的较大的沉淀物,可以达到1-2mm,可以用肉眼观察到。磷酸钙,它也是常见的一种沉淀物,通常会使血清出现浑浊,并且在37℃培养的时候会增加。这种沉淀物在倒置显微镜下观察像小黑点,这些小黑点由于布朗运动看上去可以活动,因此经常被误认为是微生物污染。胆固醇、脂肪酸酯以及一些蛋白质,它们也是血清中出现沉淀物的常见原因。关于细胞生长,其实很多试验以及经验表明沉淀物不会影响细胞培养,当然血清生产商也是这样说的。胎牛血清的无菌检验:阴性;支原体检验: 阴性;细菌内有毒的 ≤5(EU/ml)。南京特级胎牛血清哪里有
很好的胎牛血清:免疫球蛋白,国产血清的只是定性检测,结果也很不准确,进口胎牛血清大多定量检测。免疫球蛋白的数值能完全体现出的时的牛龄情况,国产血清,基本都是新生牛的,血清中容易产生IgM,IgG的含量也偏高,进口胎牛血清,不含IgM,IgG的含量也较低。含量,此外,的使用也是要考虑在内的。国内外的血清,都不对进行测试(无四环素胎牛血消除外)。其中,由于国外使用较为严格,用量有限,同时每头奶牛的产品包括血清都可以追溯源头,所以国外胎牛血清不含或者含量极低。但是国内由于使用普遍,血清中残留量很高,导致国产血清质量很差,不利于细胞培养。扬州不含外泌体血清厂家小牛血清取自出生10-30天的小牛。
血液凝固析出的淡黄色透明液体。如将血液自血管内抽出,放入试管中,不加抗凝剂,则凝血反应被,血液迅速凝固,形成胶冻。凝血块收缩,其周围所析出之淡黄色透明液体即为血清,也可于凝血后经离心取得。在凝血过程中,纤维蛋白原转变成纤维蛋白块,所以血清中无纤维蛋白原,这一点是与血浆较为大的区别。而在凝血反应中,血小板释放出许多物质,各凝血因子也都发生了变化。这些成分都留在血清中并继续发生变化,如凝血酶原变成凝血酶,并随血清存放时间逐渐减少以至消失。这些也都是与血浆区别之处。但大量未参加凝血反应的物质则与血浆基本相同。为避免抗凝剂的干扰,血液中许多化学成分的分析,都以血清为样品。
细胞培养是很多下游实验的基础,细胞培养的好坏会直接影响后续实验的成功和稳定,而胎牛血清作为细胞培养的主要试剂对实验的重要性不言而喻!胎牛血清是细胞培养中常用的天然培养基,因为胎牛未进食过母乳,所以IgG含量低,且含有丰富的细胞生长必须的营养成份,故目前多数实验人员选择的都是胎牛血清进行动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能。提供对维持细胞指数生长的,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他等,能结合或调变它们所结合的物质活力。有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到医治作用。是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。起酸碱度缓冲液作用。提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。血清在溶解过程中必须规则地摇晃均匀。
血清为何要热灭活,有必要对所有血清都灭活吗?如何正确的进行灭活?加热可以灭活补体系统。启动的补体系统参与溶解细胞事件,刺激平滑肌收缩,细胞和血小板释放组胺,启动淋巴细胞和巨噬细胞活化。在免疫学研究中,培养ES细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞时,推荐使用热灭清。实验显示,热灭清对大多数的细胞而言是不需要的,对于非必须的细胞来说血清灭活对于细胞生长只有微小甚至无任何作用,还可能造成生长速率降低,沉淀物还会明显增多,不利于细胞观察。因此,若非必须,不需要对血清进行灭活处理。将需要进行处理的血清置于56℃水浴30min,建议加放空白对照(同体积水)使用温度计测温,以测得温度为56℃时为计时起始点,加热中可不时轻度旋转混匀血清。牛血清是细胞培养中用量较为大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份。厦门优等血清厂家
血清的保存应该注意:热灭活是指56℃,30分钟加热已完全解冻的血清。南京特级胎牛血清哪里有
为何血清会存在批间差?如何避免此影响?因为血清来源于动物,其组成成分有1000种左右,每个批号的组分和组分含量都是不固定的,因此批间差异是可能存在的。为了避免批间差异对细胞的影响,XP建议先进行批号测试,筛选合适的批号,备好库存(血清未开封时,在-20℃下可保存5年)。如需更换血清批次或产地,建议先试用后再大量订购。血清中沉淀是什么成分?造成原因有哪些?如何预防和处理沉淀?血清中沉淀主要有:纤维蛋白(絮状沉淀),甲胎蛋白,脂蛋白,冷凝集素,玻粘连蛋白,磷酸钙[1](显微镜下小黑点沉淀),胆固醇等。原因:造成沉淀的主要原因是温度的改变。热灭活,反复冻融,长期储存于2-8℃或者室温。预防措施与建议:因此不立即使用的血清应保存在-20℃或以下。南京特级胎牛血清哪里有
胎牛血清存在一些问题,如批次间的变异性、潜在的病原体污染和免疫原性等。批次间的变异性是指不同批次的胎牛血清在成分和质量上存在差异。这可能会对实验结果的可重复性和可比性造成影响。为了解决这个问题,一些研究人员提出了对胎牛血清进行特殊处理的建议。例如,可以通过超速离心、过滤、冻干等方法来去除一些不需要的成分,以提高胎牛血清的一致性和稳定性。另一个问题是潜在的病原体污染。胎牛血清是从动物体内提取的,因此存在一定的病原体污染风险。这些病原体可能包括病毒、细菌、菌等。虽然现代的血清处理方法可以有效地去除或灭活大部分病原体,但仍然存在一定的风险。为了降低这个风险,一些研究人员建议使用经过特殊处理的胎牛血清...