新一代AD(阿尔兹海默症)实验动物模型。尽管APP-Tg小鼠在过去十几年中范围广的被用于开发新的AD医疗策略,但这种小鼠的基因表型和AD患者的还是不同。而且上述的转基因动物模型在Aβ的生成、tau蛋白的过度磷酸化、神经纤维缠结等病理特征上和AD患者的差异也很大,无法理想地模拟AD患者。为了克服这些不希望出现的问题,研究人员构建了带有Swedish(KM670/671NL)、Beyreuther/Iberian(I716F)和Arctic突变等APP基因敲入(APP-KI)小鼠。APP-KI小鼠在没有过度表达APP的情况下生成Aβ42。随着年龄的增长,APP-KI小鼠大脑皮层和海马区出现过多的Aβ沉积。另一方面,与其他AD模型一样,该模型没有tau病理、NFTs、神经退行性变或大量神经元丢失可用于研究临床前AD。由于基因组编辑的新的进展,尤其是CRISPR/Cas技术,未来对转基因动物模型进行改良也值得期待。英瀚斯生物,实验动物模型多年经验积累!新疆实验动物模型制作方法
5胃炎实验动物模型
5.1萎缩性胃炎动物模型【操作步骤】SD或Wistar大鼠均可,收集同种同系大鼠的胃黏膜,去除食物残渣,用生理盐水洗净,快速混合均匀,置4℃冰箱放置1h后,3000转/分,离心15min,取上清液,测定蛋白浓度,调整浓度为200mg/ml作为抗原,与等量的弗氏完全佐剂乳化,注入大鼠大腿皮下,2次/周,隔周注射,剂量为10mg蛋白/次,观察萎缩性胃炎的发生。【结果分析】该方法造成大鼠胃黏膜的免疫损伤导致胃黏膜萎缩,制模成功率高、重复性好、病理结果可靠。
5.2化学物质诱发的急性胃炎大鼠模型【操作步骤】成年Wistar或SD大鼠,术前禁食24h。以20mmol/L的阿司匹林或水杨酸溶液按100mg/kg体重灌胃。或以10mmol/L的醋酸、不同浓度的盐酸(1、10、100mmol/L)、2mmol/L的牛磺胆酸、l5%的乙醇等单独或几种合用灌胃。在4h后取材见胃内发生急性弥漫性炎症变化。5.3幽门螺杆菌***的动物模型1.幽门螺杆菌***的悉生乳猪动物模型
【操作步骤】将从胃溃疡病人中分离到的幽门螺杆菌(Hp)1000000个经口接种于剖腹产净化的乳猪,3d后再接种1000000个细菌。
【结果分析】所有实验乳猪上消化道中都可分离出Hp,而回肠末端、结肠和粪便中均为阴性。 黑龙江专业实验动物模型哪家好常规实验动物模型制作。
阿尔茨海默病的实验动物模型之化学损伤动物模型。主要是以向模型鼠脑部、皮下或腹腔注射特定物质来建立模型,如通过立体定位仪、微透析等方法向实验动物脑内海马、基底核、侧脑室等不同部位注入Aβ 片段,鹅蒿蕈氨酸(IBO)、STZ 等物质。或通过皮下或腹腔注射 D-半乳糖、三氯化铝、冈田酸(OKA)和东莨菪碱(SCOP)等致损物质。
Aβ 诱导模型,Aβ诱导模型是通过在海马CA1区或者侧脑室多次注射Aβ片段诱发Aβ沉积、形成SP为主要病理特点的AD动物模型。Aβ诱导的AD动物模型脑内Aβ沉积明显、Aβ斑块周围星形胶质细胞增生,行为呆滞,易卧,学习记忆能力衰退,出现认知功能障碍、体能衰减明显等AD病理表现。Aβ诱导动物模型,影响因素单一,模型形成时间长,造模过程中,有对脑组织造成穿透性损伤的不确定性,另外,由于注射部位过于集中,使Aβ沉积部位与AD患者Aβ在脑内多区域分布有所不同。
研究衰老的物理损伤实验动物模型。动物脑血流量老年期较成年期减少20%以上,脑部慢性缺血、缺氧使脑的正常功能受损,出现认知功能障碍等AD病理性改变。由此理论在实验研究中通过长久结扎双侧颈总动脉血管(2VO)建立的缺血性痴呆动物模型,表现出认知功能障碍明显,淀粉样蛋白前体升高、神经元和脑细胞死亡、tau蛋白过度磷酸化、氧化应激反应和产生慢性炎症等AD病理特征。该动物模型病程较长,在行为学表现上如认知功能障碍与AD比较一致,病理上也高度相似,但引起AD的外因在该动物模型中不能体现出来,另外,2VO动物模型手术操作具有一定难度,模型复制后动物存活率低且时间短,不适合给药周期长的实验研究。另外,还有长久性结扎单侧颈总动脉、去胸腺衰老模型和γ射线致衰老模型、控制性皮质撞击模型、液压脑损伤模型等,由于这些模型在造模方法上复杂、难度高、造模后动物容易死亡、且结果不理想,只在个别特殊目的实验中有所应用。实验动物模型基因敲除、表性分析。
裸鼠瘤模型是比较常见和常用的一种瘤动物模型,它在皮下移植瘤瘤模型的建立中起到重要作用。裸鼠瘤模型的接种一般有细胞接种和瘤块接种两种方式。裸鼠移植瘤模型的建立具有建立周期短、成瘤率高、易于操作、成本低的优点。
造模方法:
1、细胞是贴壁细胞,细胞培养在RPMI-1640培养基中细胞传代培养:当细胞长至80-90%时,去除培养基,加入PBS洗1-2次,去除PBS后,加入1ml胰酶消化1-3min后,加入3ml完全培养基中和胰酶终止消化,将消化的细胞转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min。倒掉上清后,加入3ml培养基重悬细胞,1:3传代至培养皿中培养。
2、将长到培养皿80%-90%的细胞用胰酶消化下来,1000rpm离心,去除上清,加入完全培养基重悬细胞,将细胞分别种在6孔板中,每孔种1×105个细胞。
3、将细胞进行扩增培养,对细胞进行计数,将数量调整为2×107个细胞/ml。5、8周龄15只裸鼠适应性饲养7天后,随机分为3组,每组分别在右腋皮下接种2×106(100ul/只)细胞。接种约两周后出现结节,每周瘤大小两次。将裸鼠放入鼠笼中正常饲养4周后处死裸鼠,取裸鼠瘤拍照冻存。 实验动物模型的造模方法?新疆实验动物模型制作方法
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双转基因实验动物模型。利用基因打靶技术培育出的APP/PS-1双转基因鼠,在3月龄时出现学习记忆障碍、Aβ增多和形成SP,6月龄时即可出现严重的学习记忆力衰退、认知功能障碍,神经元变性和突触丢失等多种AD病理特性。对AD 病理特征Aβ和SP方面的研究主要采用APP/PS-1双转基因鼠。但其外源性基因表达不够稳定性、动物价格高。
APP/PS1/Tau 三转因模型。APP/PS1/Tau 三转基因小鼠模型是由APPSwe、PS1、TauP301L基因系突变建立的,首先在皮质区和出现Aβ异常沉积、SP 和NFTs 形成,随后海马区也逐渐出现 Aβ沉积、SP和NFTs,以及突触丢失、神经元变性AD临床病理表现。APP/PS1/Tau三转基因小鼠模型是目前与AD 病理特征接近的转基因动物模型,但其外源性基因表达稳定性较差、造模较困难且造价高。 新疆实验动物模型制作方法
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