市场上使用的病毒保存液主要有两种,一种是以运送培养基为基础改良的病毒维持液,另一种则为核酸提取裂解液改良的保存液。
前者的主要成分是Eagle's基础培养液(MEM)或Hank's平衡盐,添加了病毒生存所需的盐类、氨基酸、维生素、葡萄糖以及蛋白质,这种保存液使用酚红钠盐做为指示剂,溶液pH值在6.6-8.0时溶液呈粉红色。保存液中添加了必须的葡萄糖、L-谷氨酰胺和蛋白质,蛋白质的提供形式有胎牛血清或牛血清白蛋白,可以稳定病毒的蛋白质外壳。由于保存液营养成分丰富,有利于病毒的成活但是也有利于细菌的生长,如果保存液中污染了细菌,则会大量繁殖,其代谢产物中的二氧化碳会使保存液pH值下降,从粉红色变为黄色。因而大多数厂家都在配方中添加了抑菌剂成分,推荐使用的抑菌剂为青霉素、链霉素、庆大霉素及多粘菌素B等,不推荐使用叠氮钠、2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮(MCI)和
5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮(CMCI)等抑制剂,因为这些组分对PCR反应有影响。由于这种保存液提供的样本基本是活病毒,可以很大程度保持样本的原始性,后续不仅可以用于病毒的核酸提取检测,还能用于病毒的培养和分离。但是用于检测时应该注意的是必须灭活以后再进行核酸提取纯化。
美迪科的非灭活病毒保存液与市场上其他厂家相比较而言不仅添加了病毒所必须的Hanks缓冲液来构建中性环境。广州衣原体保存液****
美迪科的病毒保存液具备什么优势
品类齐全:能提供灭活型及非灭活型两种型号的病毒保存液,而且还可提供产品试用服务。
性质稳定:产品稳定,批次差异小。
价格优势:相比其他病毒保存液厂家,品质更有保障,有更多让利空间。
技术服务:配有十年以上专业团队提供技术支持。
资质齐全:公司产品均获得中国NMPA、欧盟CE、美国FDA
EUA、SGS、TUV、TGA、ISO13485认证资质,拥有多国产品注册商标权与销售权,产品远销欧洲、美洲、亚洲、中东等120个国家,获得广大客户的一致好评与认可。
病毒保存液的质量,是提高PCR检测阳性率与病毒分离阳性率的关键因素,从根本上决定了病毒采样管的质量。添加常温稳定的类,可解决采样后的霉菌污染问题,实现采样液的常温保存。 广州衣原体保存液****病毒和细菌受理化因素作用后失去性,称为灭活(inactivation)。
一次性使用病毒采样管(灭活型)的特点:
①、操作使用简单,无需配液,体系内含有高效病毒裂解液,采样后即刻灭活病毒,有效防止二次风险,保障运输及检测人员安全
②、病毒DNA/RNA可在常温保存与运输1周不降解,按大多数商业化试剂盒进行提取后,获得的DNA或者是RNA质量好,得率高,可完成各种基因检测及分析实验,如PCR或者是qPCR等,同时节省运输成本
③、内含核酸RNA酶抑制剂,很大程度保护病毒核酸稳定不被降解,大幅提高核酸提取效率。适用于、流感病毒、手足口病毒等常见的病毒样本采集保存运输工作,可采集咽拭子、鼻拭子或特定部位组织样本,储存的样本可用于后续的核酸提取或者纯化等临床试验。
另一种以核酸提取裂解液为基础配制的保存液,主要成分为平衡盐类、EDTA螯合剂、胍盐(如异硫氰酸胍、盐酸胍等)、阴离子表面活性剂(如十二烷基硫酸钠)、阳离子表面活性剂(如十四烷基三甲基草酸铵)、苯酚、8-羟基喹啉、二硫苏糖醇(DTT)、蛋白酶K等几种或多种组分,这种保存液是直接裂解病毒释放核酸,消除核酸分解酶(RNase),如果用于RT-PCR较为合适,但裂解液可以灭活病毒,这种样本不能用于病毒的培养分离。
病毒保存液使用的金属离子螯合剂推荐使用EDTA盐类(如乙二胺四乙酸二钾、乙二胺四乙酸二钠等),不推荐使用肝素类(如肝素钠、肝素锂),以免影响PCR检测。 病毒保存液,对于很多小伙伴们而言,这个名词是新奇的,殊不知它对于各种病毒的检测具有重要的意义。
前面已经说灭活病毒保存液可以使病毒失去活性,失去活性后是怎么来进行检测的呢?我们使用灭活型保存液的目的是裂解核酸,释放核酸然后通过后续的实时荧光RT-PCR进行核酸检测,通过这种方法来判断样本是否含有病毒特征核酸,即是否了病毒。而病毒结构单一,就只含有一种核酸和蛋白质,因此检测出特征核酸就检测出了病毒。通常我们在病毒采样后,样本并不是都能在样本采集处进行运输和保存的,因此我们就需要对采集到的病毒拭子进行运输和保留,不然病毒核酸会很快降解就无法检测到核酸了,所以就需要往采样管里加保存液来让病毒的核酸不要那么快被降解。可以进行2~8天的短期储存和运输,在-70℃或液氮环境中长期储存。唾液保存液品牌企业
由于病毒属于寄生生物,采样后体外就无法存活了,如果不能及时检测,就需要放入病毒保存液中进行保存。广州衣原体保存液****
灭活型病毒保存液主要是核酸提取裂解液改良的病毒裂解型保存液,液体含有高浓度的裂解盐,能够迅速高效地使待测样本里的病毒蛋白裂解失活,可以有效防止,同时又含有Rnase酶抑制剂,能保护病毒核酸不被降解,后续的NT-PCR实验只要能检测出病毒的核酸既可以做出诊断。而且能够在常温下保存相对较长的时间。
病毒的检测不同于常规的生化检测,病毒本身是一种结构简单的微生物,必须 寄生在活细胞内。采样后,病毒离开寄主细胞,在采样管内其蛋白质外壳和核酸都会很快降解,这样核酸检测时就无法判断初始采集的样本是否含有病毒,容易造成假阴性。 广州衣原体保存液****
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