重庆灭活病毒保存液****

非灭活型的病毒采样管：

除了灭活型的病毒保存液，保存的病毒完整性更好，检出率更高，出了核酸检测外还可以用于其他研究。

灭活型病毒保存液则使用上更安全，操作环境要求也不用那么严格，各有各的优势，目前研究的非灭活病毒保存液的成分主要为Hank’s液基础，在这个基础上，添加了氯化钾，氯化镁和氯化钙等物质为致病菌提供必须的营养离子使之专一性更强、且保存时间更长，更大限度保存致病菌形态的完整性，提高致病菌提取率。

非灭活型的一次性病毒采样管的特点：

①、低温非冻型保存，不破坏病毒的外壳，方便长途运输。

②、适用于各种拭子样品，包括口腔拭子、鼻腔拭子、咽喉拭子等。

③、保存液中添加了氯化钾、氯化镁和氯化钙等物质为致病菌提供了必须的营养离子，使病菌专一性更强、且保存时间更长，可以更大限度保存致病菌形态的完整性，提高致病菌的提取率。

④、保存液中的成分可以有效防止细菌和污染。 主要是核酸提取裂解液改良的病毒裂解型保存液。能有效阻止操作员二次，但是又含有Rnase抑制剂。重庆灭活病毒保存液****

生物病毒是一种个体及其微小的生物，甚至比、细菌还要小得多，必须在活细胞内寄生并以复制方式增殖，是一种非细胞型生物。因此，不论是灭活型还是非灭活型，采样之后，病毒都是只能存活很短时间的。如果没有病毒保存液，病毒在体外几分钟就会大量降解。采样管主要是用于病毒核酸检测的，所以灭活型的保存液虽然使病毒裂解了，但是里面添加的RNA酶抑制剂可以保护其核酸，实验时只要能检测出核酸就可以作出诊断了。

影响病毒保存时间还有一个重要的因素，那就是温度。一般来说，灭活型的保存液由于只需要保护核酸不被降解，在4摄氏度保存一周，-20摄氏度保存一个月，-80摄氏度保存一年。非灭活的保存液在取样后如果不能及时检测，务必要4摄氏度低温保存，保存时间不超过48小时，如果无法及时送往检测点的需要-70摄氏度温度以下保存。 山西核酸检测病毒保存液批发价格比如异地运输或邮寄标本，或样品太多无法按时进行检测等等，这时病毒保存液就起到了相当大的作用。

灭活型病毒保存液的原理：

主要是核酸提取裂解液改良的病毒裂解型保存液，里面添加有高浓度的裂解盐，能够迅速高效地使待测样本利的病毒蛋白裂解失活，可以有效防止操作员二次，同时又含有Rnase酶抑制剂，能保护病毒核酸不被降解，后续的实验只要能检测出病毒的核酸即可以做出诊断。而且能在常温下保存相对较长的时间，节省了病毒样品保存以及运输的成本。

非灭活型病毒保存液的原理：

它同时保留了病毒的蛋白质外壳以及病毒核酸DNA或者RNA，这样就可以保证病毒样本核酸在送检过程中的完整性，虽然操作失误时会也有一定的性风险，但是这种保存液很大程度地保持了病毒样本的原始性，是一种培养型的病毒运输介质，需要注意的是采样后长时间保存需要保持严格低温保存。

市场上使用的病毒保存液主要有两种，一种是以运送培养基为基础改良的病毒维持液，另一种则为核酸提取裂解液改良的保存液。

前者的主要成分是Eagle's基础培养液(MEM)或Hank's平衡盐，添加了病毒生存所需的盐类、氨基酸、维生素、葡萄糖以及蛋白质，这种保存液使用酚红钠盐做为指示剂，溶液pH值在6.6-8.0时溶液呈粉红色。保存液中添加了必须的葡萄糖、L-谷氨酰胺和蛋白质，蛋白质的提供形式有胎牛血清或牛血清白蛋白，可以稳定病毒的蛋白质外壳。由于保存液营养成分丰富，有利于病毒的成活但是也有利于细菌的生长，如果保存液中污染了细菌，则会大量繁殖，其代谢产物中的二氧化碳会使保存液pH值下降，从粉红色变为黄色。因而大多数厂家都在配方中添加了抑菌剂成分，推荐使用的抑菌剂为青霉素、链霉素、庆大霉素及多粘菌素B等，不推荐使用叠氮钠、2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮(MCI)和

5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮(CMCI)等抑制剂，因为这些组分对PCR反应有影响。由于这种保存液提供的样本基本是活病毒，可以很大程度保持样本的原始性，后续不仅可以用于病毒的核酸提取检测，还能用于病毒的培养和分离。但是用于检测时应该注意的是必须灭活以后再进行核酸提取纯化。

由于病毒属于寄生生物，采样后体外就无法存活了，如果不能及时检测，就需要放入病毒保存液中进行保存。

另一种以核酸提取裂解液为基础配制的保存液，主要成分为平衡盐类、EDTA螯合剂、胍盐(如异硫氰酸胍、盐酸胍等)、阴离子表面活性剂(如十二烷基硫酸钠)、阳离子表面活性剂(如十四烷基三甲基草酸铵)、苯酚、8-羟基喹啉、二硫苏糖醇(DTT)、蛋白酶K等几种或多种组分，这种保存液是直接裂解病毒释放核酸，消除核酸分解酶(RNase)，如果用于RT-PCR较为合适，但裂解液可以灭活病毒，这种样本不能用于病毒的培养分离。

病毒保存液使用的金属离子螯合剂推荐使用EDTA盐类(如乙二胺四乙酸二钾、乙二胺四乙酸二钠等)，不推荐使用肝素类(如肝素钠、肝素锂)，以免影响PCR检测。 可在较宽的温度范围内维持病毒的活性，降低病毒分解速度，提升病毒分离的阳性率。中国病毒保存管病毒保存液采购

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