使用羟乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）缓冲体系时的注意事项由于哌嗪基团的存在，当羟乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）暴露于光线中时，会产生H2O2，这对培养的细胞或其它有生物活性的物体产生毒性，同时对氧化还原敏感的物质不宜共同使用，因此羟乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）作为缓冲液的操作应尽量在避光条件下进行。羟乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）在生化领域常见的使用浓度为10-25mM，当浓度低于10mM时缓冲能力较弱，不能起到较好的缓冲效果，当浓度较高时对一些细胞可能具有毒害作用。艾伟拓长期稳定供应注射级海藻糖、蔗糖、TRIS/TRIS-HCl、羟乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）等生物保护剂与缓冲盐，GMP条件生产，中美双报，供注射用，**内***，DNase&RNasefree，符合国际主流药典标准，助力重组蛋白疫苗、mRNA疫苗、腺病毒载体疫苗、脂质体、单双抗、抗体偶联药物等生物制剂生产与中外申报！国产注射用HEPES缓冲液CDE已登记状态为A购买。备案登记号HEPES药用采购
4. 在电生理实验中的关键作用HEPES常用于膜片钳实验，其低离子强度特性可减少电流噪声。建议与NaCl、KCl等电解质配合使用，终浓度不超过20 mM以避免膜电位干扰。5. 蛋白质纯化中的缓冲选择HEPES缓冲液（pH 7.5）适用于离子交换层析，因其不与His标签蛋白竞争结合镍柱。但需避免与EDTA联用，以防金属离子沉淀。光敏感性与储存条件HEPES溶液在光照下会生成过氧化物，需避光保存于4℃。使用前建议通过0.22 μm滤膜除菌，并检测过氧化物含量（如硫代硫酸钠滴定法）。现货HEPES生产厂家国产注射用HEPES缓冲液CDE已登记状态为A采购；
（5）缓冲溶液在稳定性方面各显利弊：①Tris-HCl缓冲溶液pH值受外界影响较大，一般现用现配。同时需要注意Tris是一级脂肪胺，分子结构中的氨基易与醛类化合物发生缩合反应，是一些生化实验的抑制剂。②硼酸盐缓冲液有一定毒性，不宜用做注射液或者口服液的缓冲液。③虽然磷酸盐缓冲溶液稳定性很好，但磷酸根具有一定的络合能力会抑制一些与金属离子有关的生化反应。④HEPES缓冲溶液是较理想的生物缓冲剂，但其有多种生物学效应，如：缩短血液凝固时间、减缓平滑肌收缩频率以及阻断细胞膜上的阴离子通道等，在一定程度上会影响患者身体状态，使用时应需注意。
HEPES在细胞培养中发挥作用的主要原理是基于其两性离子特性和稳定的缓冲能力。以下是具体解释：对细胞的保护作用降低细胞毒性：某些化学物质在培养基中容易产生细胞毒性，影响细胞的生长和繁殖。HEPES能够降低这些化学物质的细胞毒性，从而保护细胞免受损伤。形成保护层：HEPES分子还可以通过吸附在细胞表面，形成一层保护层，减少细胞间的摩擦和碰撞，降低细胞的损伤风险。这有助于提高细胞的生存率和实验结果的可靠性。
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根据GIR的调研结果，全球4-羟乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）在2021年的收入大约为55百万美元，预计到2028年将达到73百万美元，年复合增长率为%。该产品可以细分为HEPES粉末和HEPES溶液，并主要应用于细胞培养、蛋白质提取和其他领域。全球主要生产商包括Avantor、ThermoFisher、Merck、Lonza、Cytiva、PromegaCorporation、MPBiomedicals、SpectrumLaboratory、BiologicalIndustries、CaymanChemical、SERVAElectrophoresisGmbH、Bio-Techne、BioSpectra、Corning、FUJIFILMIrvineScientific,Inc.、DojindoLaboratories、XZLBio-Technology、SuzhouYacooScience、HaihangChemical、YunbangBio-pharmaceutical等公司。该产品的市场主要分布在北美、欧洲、亚太地区、南美洲以及中东和非洲等地区。其中，北美地区（美国、加拿大、墨西哥）、欧洲地区（德国、法国、英国、俄罗斯、意大利等）、亚太地区（中国、日本、韩国、印度、东南亚等）、南美洲（巴西、阿根廷等）以及中东和非洲地区（沙特阿拉伯、埃及、尼日利亚、南非等）都是该产品的重要市场。注射用HEPESCDE已登记；上海现货HEPES医院采购
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注意事项浓度控制：根据实验需求和细胞类型，严格控制HEPES的浓度。一般来说，培养液内含20mmol/L HEPES即可达到良好的缓冲效果。pH调节：在配制含有HEPES的培养基时，需要准确调节pH值至适合细胞生长的范围内。储存条件：配制好的含有HEPES的培养基应存放在适当的温度下，避免长时间暴露于空气中或受到污染。综上所述，HEPES缓冲体系具有***的缓冲范围、CO2无关性、低毒性、稳定性强和膜不透性等优势，在细胞培养和其他生物化学研究中发挥着重要作用。通过合理控制HEPES的浓度和配制方法，可以维持细胞培养环境的pH稳定，提高细胞的生长和代谢效率。备案登记号HEPES药用采购
