伊立替康在制剂中易受pH影响,容易转化为羧酸盐型,而这种形式的药理活性较低,毒性更强,因此需要尽可能保持有效的内酯型。同时,脂质体制剂对于内外水相的pH差异也提出了一定的要求,需要保持外水相稍碱性,同时内水相保持酸性。在这种情况下,选择合适的缓冲剂尤为重要。羟乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)因不易穿过生物膜,可以稳定脂质体外水相的pH为弱碱性,同时不改变内水相的酸性pH,因此非常适用于伊立替康脂质体。在制剂研发中,需要考虑到伊立替康的化学性质、脂质体制剂的特点以及合适的缓冲系统,以保证制剂的稳定性和药效。因此,通过科学的配方设计和严格的制备工艺,有望解决伊立替康在制剂中的稳定性问题,从而保障药物的疗效和安全性。注射用HEPES缓冲液中美双报。湖北有登记号HEPES

在RNA研究中的注意事项HEPES可能抑制某些RNA酶活性,但高浓度会干扰逆转录反应。建议在RNA提取阶段使用Tris-EDTA缓冲液替代。HEPES在RNA电泳中常用作缓冲液,其低离子强度减少了对RNA迁移的干扰。在体外转录反应中,HEPES缓冲液能维持反应体系的pH稳定。但需注意HEPES可能结合某些金属离子,影响依赖金属离子的RNA酶活性。HEPES溶液在光照下会生成过氧化物,需避光保存于4℃。使用前建议通过0.22 μm滤膜除菌,并检测过氧化物含量(如硫代硫酸钠滴定法)。过氧化物会氧化敏感的生物分子,如硫醇基团和某些荧光染料。长期储存的HEPES溶液应分装并避免反复冻融。商业化的HEPES粉末也应避光保存,因其在光照下会逐渐降解。HEPES溶液的pH会随时间缓慢变化,建议使用前重新校准。山东试剂级HEPES药用采购GMP条件下生产艾伟拓注射级HEPES。

光敏感性与储存条件HEPES溶液在光照下会生成过氧化物,需避光保存于4℃。使用前建议通过0.22μm滤膜除菌,并检测过氧化物含量(如硫代硫酸钠滴定法)。过氧化物会氧化敏感的生物分子,如硫醇基团和某些荧光染料。长期储存的HEPES溶液应分装并避免反复冻融。商业化的HEPES粉末也应避光保存,因其在光照下会逐渐降解。HEPES溶液的pH会随时间缓慢变化,建议使用前重新校准。蛋白质纯化中的缓冲选择HEPES缓冲液(pH 7.5)适用于离子交换层析,因其不与His标签蛋白竞争结合镍柱。但需避免与EDTA联用,以防金属离子沉淀。HEPES在蛋白质结晶中也常用作缓冲液,其低离子强度减少了对晶体生长的干扰。在蛋白质稳定性研究中,HEPES缓冲液能有效维持蛋白质的天然构象。HEPES还可用于蛋白质的等电点测定,因其缓冲范围覆盖了多数蛋白质的等电点区域。
在电生理实验中的关键作用HEPES常用于膜片钳实验,其低离子强度特性可减少电流噪声。建议与NaCl、KCl等电解质配合使用,终浓度不超过20 mM以避免膜电位干扰。HEPES缓冲液能稳定膜电位,减少因pH波动导致的通道活性变化。在神经元电生理记录中,HEPES可替代碳酸氢盐缓冲液,避免CO2逸出对记录信号的干扰。HEPES的低金属离子结合特性使其适合研究金属离子敏感的通道蛋白。蛋白质纯化中的缓冲选择HEPES缓冲液(pH 7.5)适用于离子交换层析,因其不与His标签蛋白竞争结合镍柱。但需避免与EDTA联用,以防金属离子沉淀。HEPES在蛋白质结晶中也常用作缓冲液,其低离子强度减少了对晶体生长的干扰。在蛋白质稳定性研究中,HEPES缓冲液能有效维持蛋白质的天然构象。HEPES还可用于蛋白质的等电点测定,因其缓冲范围覆盖了多数蛋白质的等电点区域。注射用HEPES国产缓冲液CDE已登记。

HEPES缓冲体系在生物化学和细胞生物学研究中扮演着至关重要的角色。以下是对HEPES缓冲体系的详细介绍:在细胞培养中的应用维持pH稳定:在细胞培养中,HEPES能够维持培养液的pH稳定,为细胞提供一个适宜的生长环境。这对于细胞的生长、繁殖和代谢过程至关重要。减少乳酸积累:在某些培养基中,如RPMI-1640,HEPES有助于减缓细胞代谢产生的大量乳酸,从而避免培养液pH下降,抑制细胞生长。适用于无CO2环境:在需要避免CO2干扰的实验中,如细胞观察、转染等,HEPES能够确保细胞在一个稳定的酸碱环境中生长。国内AVT稳定供货注射级HEPES。黑龙江有登记号HEPES批量
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与其他的缓冲体系相比,HEPES突出的优势有以下几点:
1. pKa 和 buffer 比较稳定,随温度的变化很小。
2. HEPES 的缓冲能力不会与受其他离子的影响,同时HEPES本身也不会对其他离子的功能造成影,HEPES拥有性质稳定性。
3. 细胞培养基中pH的稳定性主要依靠培养基中的碳酸氢盐和5%的CO2共同维持。当细胞处于开放环境时,二氧化碳的弥散会导致pH上升脱离生理pH范围。可是添加HEPES缓冲对的培养基则不存在这方面问题。
4. HEPES不干扰细胞内的生化反应因为它不易穿过生物膜,因此它更适用于伊立替康脂质体。 湖北有登记号HEPES