HEPES的化学结构与基本特性HEPES是一种两性离子缓冲剂,化学式为C8H18N2O4S,分子量238.3 g/mol。其结构由哌嗪环和乙磺酸基团组成,pKa值为7.5(25℃),在pH 6.8-8.2范围内具有优异的缓冲能力。作为Good's缓冲液家族成员,HEPES对细胞无毒性,且不与金属离子螯合,适合含金属离子的实验体系。其水溶性(>1 M)和低渗透压特性使其成为细胞培养的理想选择。HEPES的缓冲能力在4-37℃范围内变化<10%,优于Tris缓冲液。但高温(>50℃)会导致降解,需避免高压灭菌。HEPES溶液在光照下会生成过氧化物,需避光保存于4℃。使用前建议通过0.22 μm滤膜除菌,并检测过氧化物含量(如硫代硫酸钠滴定法)。国产注射用HEPES缓冲液中美双报高性价比;江西采购HEPES生产厂家
HEPES在细胞培养中的应用HEPES***用于哺乳动物细胞培养,尤其在CO2培养箱外操作时(如显微镜观察),可替代碳酸氢盐缓冲系统。推荐浓度为10-25 mM,过高浓度可能抑制细胞生长。需注意HEPES对光敏感,需避光保存。HEPES缓冲液能有效维持细胞外pH稳定,防止因CO2逸出导致的培养基碱化。在胚胎培养中,HEPES需严格过滤除菌,且浓度不超过15 mM,以避免影响囊胚发育。建议与**酸钠联用增强缓冲能力。HEPES还可用于原代细胞培养,其低离子强度特性减少了对细胞的机械损伤。广东辅料HEPES医院采购注射用HEPESCDE已登记;
血浆的酸碱平衡是维持人体正常生理功能的重要因素之一。pH值指示了溶液的酸碱性,正常人血浆的pH值通常在7.35-7.45之间。当血浆的pH值低于7.35时,我们称之为酸中毒。血浆pH值的异常变化可能会对身体的正常功能产生不利影响。在人体血浆中,存在多种缓冲体系来维持酸碱平衡,其中包括NaHCO3-H2CO3、蛋白质钠盐-蛋白质、氧合血红蛋白钾盐-氧合血红蛋白等。这些缓冲体系通过吸收或释放氢离子来调节血浆的pH值,维持其在正常范围内。当血浆pH值低于7.35时,我们称之为酸中毒。酸中毒可能由于多种原因引起,包括肺部呼吸功能障碍导致二氧化碳潴留、肾脏功能异常导致酸性物质排泄减少等。为了纠正酸中毒,医生可能会采取一些措施,如调整呼吸、给予碱药物等,以恢复血浆pH值到正常范围。总之,血浆的酸碱平衡对维持人体正常生理功能非常重要。缓冲体系在血浆中发挥着关键作用,通过吸收或释放氢离子来调节血浆的pH值,确保其保持在正常范围内。酸中毒时,医生会采取相应措施纠正异常的血浆pH值,以维持身体的正常功能。
HEPES在细胞培养中发挥作用的主要原理是基于其两性离子特性和稳定的缓冲能力。以下是具体解释:一、两性离子特性HEPES是一种两性离子缓冲剂,其分子结构中的磺酸基团和哌嗪基团能够分别与水分子结合形成氢键。这种结构使得HEPES能够在溶液中增加离子浓度,从而调节渗透压。随着HEPES浓度的增加,溶液中的离子浓度相应提高,导致渗透压的增大。这种渗透压的增加有助于维持细胞的正常水分平衡,保持细胞的正常形态和功能。HEPES供注射用 药用辅料注射用HEPES 中美双报;
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光敏感性与储存条件HEPES溶液在光照下会生成过氧化物,需避光保存于4℃。使用前建议通过0.22μm滤膜除菌,并检测过氧化物含量(如硫代硫酸钠滴定法)。过氧化物会氧化敏感的生物分子,如硫醇基团和某些荧光染料。长期储存的HEPES溶液应分装并避免反复冻融。商业化的HEPES粉末也应避光保存,因其在光照下会逐渐降解。HEPES溶液的pH会随时间缓慢变化,建议使用前重新校准。蛋白质纯化中的缓冲选择HEPES缓冲液(pH 7.5)适用于离子交换层析,因其不与His标签蛋白竞争结合镍柱。但需避免与EDTA联用,以防金属离子沉淀。HEPES在蛋白质结晶中也常用作缓冲液,其低离子强度减少了对晶体生长的干扰。在蛋白质稳定性研究中,HEPES缓冲液能有效维持蛋白质的天然构象。HEPES还可用于蛋白质的等电点测定,因其缓冲范围覆盖了多数蛋白质的等电点区域。江西采购HEPES生产厂家