注意事项浓度控制:根据实验需求和细胞类型,严格控制HEPES的浓度。一般来说,培养液内含20mmol/L HEPES即可达到良好的缓冲效果。pH调节:在配制含有HEPES的培养基时,需要准确调节pH值至适合细胞生长的范围内。储存条件:配制好的含有HEPES的培养基应存放在适当的温度下,避免长时间暴露于空气中或受到污染。综上所述,HEPES缓冲体系具有***的缓冲范围、CO2无关性、低毒性、稳定性强和膜不透性等优势,在细胞培养和其他生物化学研究中发挥着重要作用。通过合理控制HEPES的浓度和配制方法,可以维持细胞培养环境的pH稳定,提高细胞的生长和代谢效率。国内艾伟拓稳定供货HEPES!江西7365-45-9HEPES实验室采购
二、药用功能与应用缓冲作用:HEPES在pH值为6.8~8.2的范围内具有良好的缓冲能力,能够维持溶液pH的稳定。在药用辅料中,HEPES常用于制备各种注射剂、口服液等制剂,以确保药物在储存和使用过程中pH值的稳定。细胞保护作用:HEPES对细胞无毒性作用,且能够降低某些化学物质的细胞毒性。在细胞培养中,HEPES能够维持细胞的正常形态和功能,提高细胞的生存率。促进药物吸收:作为促透剂,HEPES能够促进药物分子通过皮肤或黏膜的吸收,提高药物的生物利用度。其他应用:HEPES还用于制备各种生化试剂盒、诊断试剂等,为医药产品的质量和安全性提供保障。在某些特定的药物制剂中,HEPES还起到稳定剂、增溶剂等作用。江苏HEPES大批量采购注射用HEPES国产缓冲液CDE已登记;
在电生理实验中的关键作用HEPES常用于膜片钳实验,其低离子强度特性可减少电流噪声。建议与NaCl、KCl等电解质配合使用,终浓度不超过20 mM以避免膜电位干扰。HEPES缓冲液能稳定膜电位,减少因pH波动导致的通道活性变化。在神经元电生理记录中,HEPES可替代碳酸氢盐缓冲液,避免CO2逸出对记录信号的干扰。HEPES的低金属离子结合特性使其适合研究金属离子敏感的通道蛋白。蛋白质纯化中的缓冲选择HEPES缓冲液(pH 7.5)适用于离子交换层析,因其不与His标签蛋白竞争结合镍柱。但需避免与EDTA联用,以防金属离子沉淀。HEPES在蛋白质结晶中也常用作缓冲液,其低离子强度减少了对晶体生长的干扰。在蛋白质稳定性研究中,HEPES缓冲液能有效维持蛋白质的天然构象。HEPES还可用于蛋白质的等电点测定,因其缓冲范围覆盖了多数蛋白质的等电点区域。
4. 在电生理实验中的关键作用HEPES常用于膜片钳实验,其低离子强度特性可减少电流噪声。建议与NaCl、KCl等电解质配合使用,终浓度不超过20 mM以避免膜电位干扰。5. 蛋白质纯化中的缓冲选择HEPES缓冲液(pH 7.5)适用于离子交换层析,因其不与His标签蛋白竞争结合镍柱。但需避免与EDTA联用,以防金属离子沉淀。光敏感性与储存条件HEPES溶液在光照下会生成过氧化物,需避光保存于4℃。使用前建议通过0.22 μm滤膜除菌,并检测过氧化物含量(如硫代硫酸钠滴定法)。艾伟拓稳定供货注射级HEPES。
在RNA研究中的注意事项HEPES可能抑制某些RNA酶活性,但高浓度会干扰逆转录反应。建议在RNA提取阶段使用Tris-EDTA缓冲液替代。HEPES在RNA电泳中常用作缓冲液,其低离子强度减少了对RNA迁移的干扰。在体外转录反应中,HEPES缓冲液能维持反应体系的pH稳定。但需注意HEPES可能结合某些金属离子,影响依赖金属离子的RNA酶活性。HEPES溶液在光照下会生成过氧化物,需避光保存于4℃。使用前建议通过0.22 μm滤膜除菌,并检测过氧化物含量(如硫代硫酸钠滴定法)。过氧化物会氧化敏感的生物分子,如硫醇基团和某些荧光染料。长期储存的HEPES溶液应分装并避免反复冻融。商业化的HEPES粉末也应避光保存,因其在光照下会逐渐降解。HEPES溶液的pH会随时间缓慢变化,建议使用前重新校准。艾伟拓稳定供货注射级HEPES!上海高纯度HEPES价格
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(5)缓冲溶液在稳定性方面各显利弊:①Tris-HCl缓冲溶液pH值受外界影响较大,一般现用现配。同时需要注意Tris是一级脂肪胺,分子结构中的氨基易与醛类化合物发生缩合反应,是一些生化实验的抑制剂。②硼酸盐缓冲液有一定毒性,不宜用做注射液或者口服液的缓冲液。③虽然磷酸盐缓冲溶液稳定性很好,但磷酸根具有一定的络合能力会抑制一些与金属离子有关的生化反应。④HEPES缓冲溶液是较理想的生物缓冲剂,但其有多种生物学效应,如:缩短血液凝固时间、减缓平滑肌收缩频率以及阻断细胞膜上的阴离子通道等,在一定程度上会影响患者身体状态,使用时应需注意。江西7365-45-9HEPES实验室采购