上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心:周斌兵课题组近期在《Leukemia》期刊上发表成果,指出碱基切除修复通路关键聚合酶 polβ在介导错配修复缺陷的急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞对巯嘌呤耐药和存活中发挥重要作用。研究发现,polβ抑制剂与 6-TG 联合使用时对错配修复缺陷细胞表现出明显的协同效应,并在 ALL 细胞系、病人来源的原代细胞和异种移植小鼠模型多个层面验证了其在复发难治型 ALL 中的***潜力。该研究为进一步优化儿童 ALL 巯嘌呤临床精细用***案奠定了理论基础。DNA聚合酶需要能量,如ATP,它在合成DNA链的过程中需要能量来驱动反应的进行。海南TaqDNA聚合酶源头厂家

大肠杆菌DNA聚合酶I的多重功能解析大肠杆菌DNA聚合酶I(PolI)是唯早被发现的DNA聚合酶,兼具聚合与外切活性,在复制和修复中扮演多面手角色:(1)5'→3'聚合活性:催化dNTP聚合,延伸DNA链,但持续合成能力低(唯约20核苷酸/次结合),非复制主酶;(2)5'→3'外切活性:切除RNA引物或损伤DNA片段,在冈崎片段处理中至关重要——先切除前一个冈崎片段的RNA引物,再用聚合活性填补缺口;(3)3'→5'外切校正活性:识别并切除错配碱基,提高合成准确性;(4)实验应用:PolI的Klenow片段(切除5'→3'外切结构域后)常用于DNA末端标记、cDNA第二链合成;其5'→3'外切活性用于nicktranslation制备放射性探针。与PolIII相比,PolI的功能更偏向“修复与加工”,而PolIII负责“大规模DNA合成”,二者在大肠杆菌中形成功能互补。 广西taq酶DNA聚合酶哪里买基因克隆中,先用限制酶切割 DNA,再用 DNA 连接酶连接载体与目的片段,构建重组 DNA。

DNA聚合酶与RNA聚合酶的功能差异与协同作用DNA聚合酶和RNA聚合酶分别催化DNA和RNA的合成,是基因表达和传递的关键酶。功能差异:(1)底物与产物:DNA聚合酶以dNTP为底物,合成DNA;RNA聚合酶以NTP为底物,合成RNA(mRNA、tRNA、rRNA等)。(2)模板依赖性:二者均需模板,但DNA聚合酶需RNA引物或已有DNA链提供3'-OH;RNA聚合酶可直接起始转录(从头合成)。(3)校对能力:DNA聚合酶多具3'→5'外切校正活性,保真性高(错误率10⁻⁶-10⁻⁸);RNA聚合酶校正功能较弱,错误率约10⁻⁴-10⁻⁵(因RNA为暂时中间体,错误影响较小)。(4)作用阶段:DNA聚合酶主要在DNA复制(S期)发挥作用;RNA聚合酶在转录阶段(贯穿细胞周期)活跃。协同作用:在DNA复制中,RNA聚合酶(如原核生物的引物酶DnaG)合成RNA引物,为DNA聚合酶提供起始位点;在逆转录过程中,逆转录酶(一种特殊的DNA聚合酶)以RNA为模板合成cDNA,实现遗传信息从RNA到DNA的传递。二者的分工与协作确保了遗传信息的准确复制和表达。
DNA聚合酶的主要功能是通过复制过程合成DNA。这个过程对维持和传递遗传信息至关重要。DNA聚合酶是成对工作的,它们同时复制DNA的两条链。它们在新生DNA链的3′-OH端添加脱氧核苷酸。DNA链通过聚合酶的聚合活性以5′→3′的方向延伸。腺嘌呤(A)与胸腺嘧啶(T)配对,鸟嘌呤(G)与胞嘧啶(C)配对。DNA聚合酶本身无法启动复制过程,它们需要一个引物来添加核苷酸。在原核生物中,DNA聚合酶III是主要负责复制的酶。而在真核生物中,DNA聚合酶δ是复制的主要酶。DNA聚合酶I通过其5′→3′外切酶活性去除RNA引物,并通过其聚合酶活性在滞后链上替代引物。DNA 聚合酶在细胞周期 S 期活跃,确保染色体准确复制,为细胞分裂做准备。

不同的DNA聚合酶具有不同的特性和功能。有些DNA聚合酶具有较高的持续合成能力,能够快速地延伸DNA链;而另一些则在保真度方面表现出色,即确保复制过程中碱基配对的准确性,减少错误的发生。在细胞分裂时,DNA聚合酶起着至关重要的作用。它能够迅速而准确地复制整个基因组,为新细胞提供与母细胞相同的遗传信息,保证了细胞的正常生长和分裂。DNA聚合酶还参与了DNA损伤的修复过程。当DNA受到外界因素的影响而出现损伤时,特定的DNA聚合酶会被***,识别并修复受损的部位,维持基因组的完整性。为了适应各种复杂的环境和需求,DNA聚合酶在进化过程中逐渐形成了多种类型。例如,真核生物中的DNA聚合酶种类比原核生物更为丰富,以满足不同的生物学功能。细胞分裂时,DNA 聚合酶确保遗传物质准确复制,维持物种稳定性。广东taq DNA聚合酶批发
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DNA聚合酶的化学本质:蛋白质属性与结构基础DNA聚合酶的化学本质为蛋白质,其基本组成单位是氨基酸。氨基酸通过脱水缩合形成肽链,再折叠成具有催化活性的三维结构。例如,大肠杆菌DNA聚合酶I(PolI)由一条含928个氨基酸的多肽链组成,分子量约109kDa;而真核生物DNA聚合酶δ(Polδ)是四聚体蛋白,包含催化亚基(POLD1)和辅助亚基,需与增殖细胞核抗原(PCNA)结合以增强持续合成能力。作为蛋白质,DNA聚合酶的活性受温度、pH、金属离子(如Mg²⁺)等因素影响:高温可导致其变性失活,低温抑制活性;Mg²⁺作为辅因子,参与催化位点的构象形成及dNTP的结合。此外,部分DNA聚合酶(如端粒酶)含RNA组分,但催化重要仍为蛋白质(TERT亚基),属于特殊的逆转录酶类DNA聚合酶。 海南TaqDNA聚合酶源头厂家
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