在细胞培养实验里，DMEM 培养基的使用过程需严谨规范。收到培养基后，应及时存放于 2-8°C 的环境中，低温可有效减缓培养基内成分的降解速度，确保其营养成分的稳定性。在使用前，需将培养基预热至 37°C，模拟人体体温环境，让细胞在适宜温度下开启生长旅程。同时，由于 DMEM 培养基多采用碳酸氢钠缓冲系统，需将培养环境的 CO₂浓度维持在 5 - 10%，以此精细调控培养基的 pH 值处于 7.2 - 7.4 的生理适宜区间，为细胞打造稳定且舒适的 “居住空间”，促进细胞健康生长。Dulbecco’s 改良培养基增加了非必须氨基酸、微量铁离子以及**酸钠。辽宁细胞培养基
无血清培养基中通常需要添加一些额外的组分，才能帮助细胞贴壁生长，包括以下几大类物质：1）促贴壁物质：一般为细胞外基质，如纤连蛋白、层粘连蛋白等。它们还是重要的分裂素以及维持正常细胞功能的分化因子，对许多细胞的繁殖和分化，起着重要作用。纤连蛋白主要促进来自中胚层细胞的贴壁与分化，这些细胞包括成纤维细胞、肉瘤细胞、粒细胞、肾上皮细胞、肾上腺皮质细胞、CHO细胞、成肌细胞等。2）促生长因子：针对不同细胞添加不同的生长因子。也是刺激细胞生长、维持细胞功能的重要物质，有些是许多细胞必不可少的，如胰岛素。3）酶抑制剂：培养贴壁生长的细胞，需要用胰酶消化传代，在无血清培养基中需含酶抑制剂，以终止酶的消化作用，达到保护细胞的目的。常用的是大豆胰酶抑制剂。4）结合蛋白和转运蛋白：常见如转铁蛋白和牛血清白蛋白。牛血清白蛋白的添加量比较大，可增加培养基的粘度，保护细胞免受机械损伤。许多旋转式培养的无血清培养基都含有牛血清白蛋白。5）微量元素：硒是常见的。湖北RPMI-1640细胞培养基检测M199全称Medium 199，即培养基199，是Morgan等在1950年设计的，初用于鸡胚成纤维细胞的营养研究。
干细胞研究同样与 DMEM 培养基紧密相连。DMEM 培养基能够为干细胞群体的维持和扩增提供适宜环境。以胚胎干细胞为例，高糖型 DMEM 培养基凭借充足的能量供应，助力胚胎干细胞保持良好的生长状态，维持其多能性。在诱导干细胞分化为特定细胞类型时，科研人员可根据需求对 DMEM 培养基进行优化，添加特定的生长因子等成分，引导干细胞向目标细胞分化。比如，在神经干细胞向神经元细胞分化的研究中，通过调整 DMEM 培养基成分，促进神经干细胞的分化进程，为神经再生医学研究奠定基础。
RPMI-1640细胞培养基RPMI-1640是Moore等人于1967年在美国纽约州法罗市的罗斯韦尔公园纪念研究所（RoswellParkMemorialInstitute,RPMI）开发出来的，RPMI是该研究所开发的一类细胞培养基，1640是培养基代号。RPMI-1640是改进型的McCoy‘s5A培养基，使用碳酸氢盐缓冲系统，与大多数哺乳动物细胞培养基不同的是其典型的PH8的配方。RPMI-1640培养基是为淋巴细胞培养专门设计的，现在已应用于各种正常细胞培养，包括HeLa细胞、Jurkat细胞、MCF-7细胞、PC12细胞、PBMC细胞、星形胶质细胞，是培养基之一。RPMIRPMI1640培养基相比其他培养基之所以具有独特的效果，是因为其中含有还原剂谷胱甘肽和高浓度的维生素。RPMI1640培养基含有生物素、维生素B12以及PABA，这些成分是Eagle’sMEM和DMEM所不具备的。针对细胞培养应用，我们提供多种组分的RPMI1640改良培养基。McCoy’s 5A培养基还用于组织活检培养、细胞建系，以及一些淋巴细胞和较难培养的细胞的培养。
Ham’sF-12营养混合物（Ham’sF-12NutrientMixture）是由Ham在1969年以Ham’sF-10营养混合物为基础设计而成的，初用于CHO细胞的无血清培养。Ham’sF-12常作为无血清培养的基础培养液，在低血清含量下时，特别适合单细胞培养和克隆化培养，添加血清后也广泛应用于细胞和原代细胞的培养，如大鼠肝细胞、大鼠前列腺上皮细胞、软骨细胞、大鼠成肌细胞、鸡胚胎细胞等。此外，Ham’sF-12与DMEM等体积混合后，得到的DMEM/F12培养基营养更为丰富，使用更为较广。NEAA（非必须氨基酸），是在MEM培养基的基础上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天（门）冬酰胺、L-天（门）冬氨酸、L-脯氨酸、L-丝氨酸和甘氨酸7种NEAA，能降低细胞培养时细胞自身生产非必须氨基酸的副作用，有效促进细胞增殖代谢。葡萄糖可以根据研究需要，随意调节葡萄糖的浓度，方便快捷。高糖型培养基普遍应用于生长快、粘附性低的细胞、杂交瘤的骨髓瘤细胞、克隆细胞、DNA转染的转化细胞、各种原代病毒宿主细胞、单一细胞的培养以及疫苗的生产，例如利用CHO细胞表达EPO和生产乙肝疫苗。低糖培养基更适合代谢作用较慢、依赖性贴壁细胞的培养。 TNM-FH昆虫培养基可用于各种鳞翅类昆虫细胞的培养。含有多类细胞培养所需的氨基酸、无机盐等多种成分。广东实验细胞培养基全国发货
MCDB是为特定细胞设计的低蛋白和无血清培养的培养基。辽宁细胞培养基
细胞培养基的种类按照细胞培养基的发展历史，细胞培养基大致可分为平衡盐溶液、天然细胞培养基、合成细胞培养基、无血清细胞培养基、限定化学成分细胞培养基等几大种类。（balancedsaltsolution，BSS）BSS主要是由无机盐、葡萄糖组成，它的作用是维持细胞渗透压平衡，保持pH稳定及提供简单的营养。其主要用于细胞的漂洗、配制其他试剂等。几种常用的BSS配方如下（表1-1）。D-Hank's与Hank's的一个主要区别是前者不含有Ca2+和Mg2+，因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因为Ca2+、Mg2+是细胞膜的重要组成成份，参与细胞粘附等功能，使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免细胞结团。此外，Hanks液和Earle液是常用的BSS基础溶液，前者缓冲能力较弱，适合于密闭培养；后者缓冲能力较强，适合于5%CO2的培养条件。表1-1几种常用的BSS配方。辽宁细胞培养基
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