HE染色注意事项:1、染色时调节pH值很重要。如果组织块在福尔马林中固定时间长,组织酸化而影响细胞核着色。因此,要在自来水中冲洗时间长一些或在饱和碳酸锂水溶液中处理10-30min,这样可以使细胞核着色较深。染伊红时胞浆着色不佳,可在伊红溶液中滴加1-2滴冰醋酸。2、切片染苏木精后,分色这一步是关键,应在显微镜下控制进行,一般以细胞核染色清楚(晰)而细胞质基本无色为佳。如果过分延长分色时间将导致染色太浅,应重新染色后再行分色。3、切片经酒精脱水后,入二甲苯时可出现白色不透明状态,此为脱水不彻底,应将切片退回无水酒精,更换酒精、二甲苯,以求彻底脱水与透明。4、在染色过程中不要让切片干燥,以免切片收缩、变形,影响神经元形态。5、切片从二甲苯取出或进入二甲苯前,切片周边均应擦干净或吸干多余水分。6、***封固时,要用中性树脂,防止日后褪色,盖片要选大于组织块的面积,如漏出一部分不久将会褪色,所用树脂浓度要适当,树脂封固时不能有气泡。常规HE染色和特殊染色服务。新疆结果客观的HE染色价格
HE染色不管怎么操作,始终无法染色或淡染答:这种情况一般因为组织固定时采用了酸性甲醛;或者组织在甲醛中浸泡时间太长;或者久置的甲醛变性分解为甲酸。补救:防患于未然,要么使用新鲜的中性甲醛固定,要么在存放的甲醛中加一点碳酸钠中和甲酸。对于已经固定的组织可考虑再次固定;对于已经制出的片子,染色前采用5%重铬酸钾溶液浸泡半小时以上,然后自来水漂洗5min,可改善染色。也可以将切片放入3%硫酸铁铵溶液中,补充染色媒介,增强苏木素与组织的亲和力(苏木素染色必须要媒介才能染上,单纯的苏木素与组织的亲和力很弱)。江西值得信赖的HE染色价格科研常备实验操作之HE染色。
HE染色法的话,不能准确说出细胞器的颜色,实验记录或考试时只能说染色效果为 :细胞核蓝色,胞质、肌纤维、胶原纤维和红细胞呈深浅不一的红色。或者详细说明如下:细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色,软骨基质、钙盐颗粒呈深蓝色,粘液呈灰蓝色。细胞浆被伊红染成深浅不同的粉红色至桃红色,胞浆内嗜酸性颗粒呈反光强的鲜红色。胶原纤维呈淡粉红色,弹力纤维呈亮粉红色,红血球呈橘红色,蛋白性液体呈粉红色。苏木精染液为碱性 ,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色 ;伊红为酸性染料 ,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。
HE染色构成组织内蛋白质的氨基酸的种类很多,它们有不同的等电点。在普通染色法中,染色液的酸碱度为pH6左右,细胞内的酸性物质如细胞核的染色质、腺细胞和神经细胞内的粗面内质网及透明软骨基质等均被碱性染料染色,这些物质称为嗜碱性。而细胞质中的其它蛋白质如红细胞中的血红蛋白、嗜酸粒细胞的颗粒及胶原纤维和肌纤维等被酸性染料染色,这些物质称为嗜酸型。如果改变染色液的酸碱度,pH值升高时,则原来被酸性染料染色的物质可变为嗜碱性;pH值降低时,原来被碱性染料染色的物质则可变为嗜酸性。所以说染色液的pH值可以影响染色的反应。骨组织HE染色的操作流程。
HE染色碱染料染主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着色。学上常用的一种染色方法为苏木精 伊红染色法。苏木精 伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,简称HE染色法 ,石蜡切片技术里常用的染色法之一 。苏木精染液为碱 ,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色 ;伊红为酸染料 ,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色,软骨基质、钙盐颗粒呈深蓝色,粘液呈灰蓝色。细胞浆被伊红染成深浅不同的粉红色至桃红色,胞浆内嗜酸颗粒呈强的鲜红色。胶原纤维呈淡粉红色,力纤维呈亮粉红色,红血球呈橘红色,蛋白液体呈粉红色。HE染色原理 试剂 染色步骤 注意事项 。甘肃专业的HE染色外包
HE染色,即是苏木精-伊红染色法,是形态学比较常用的染色方法。新疆结果客观的HE染色价格
HE染色伊红着色淡分析及应对原因:(1)伊红染液的pH值可能大于5;(2)蓝化液残留过多;(3)切片太薄;(4)切片经伊红染色后在乙醇脱水时间过长。对策:检查伊红染液的pH值,如果必要的话,用乙酸将其调节在4~5之间,从而使伊红染色彩艳丽。确保每次蓝化步骤完成后,使用的弱碱性溶液被充分洗去,玻片上没有残留的弱碱性溶液。检查切片的厚度。脱水时不要让切片在低浓度乙醇停留时间过长,因为含水多的低浓度乙醇会将伊红的颜色分化掉。新疆结果客观的HE染色价格