在生物医学领域,染色技术一直是研究和诊断中不可或缺的重要手段。其中,H-E染色(苏木精-伊红染色)作为组织学、胚胎学和病理学中很基本、使用很普遍的技术方法,为医学研究和临床诊断提供了强有力的支持。H-E染色,全称为苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining),是一种在医学病理诊断中普遍应用的染色技术。这种染色方法通过特定的化学染料将组织切片中的不同成分染成不同的颜色,从而清晰地显示出组织细胞的形态结构。苏木精作为碱性染料,主要染色细胞核,使其呈现紫蓝色;而伊红作为酸性染料,则主要染色细胞质和其他细胞外基质,使其呈现红色或粉红色。这种颜色对比使得细胞核与细胞质之间的界限清晰可辨,为病理诊断提供了重要依据。染色液若不慎泄漏,需立即进行清理和处理。云南病理染色液招标采购
分化:将切片浸泡在分化液中,去除细胞核以外的多余染色。这一步骤有助于使染色更加清晰。返蓝:将切片浸泡在返蓝液中,使酸化后的细胞核颜色更加蓝化。这一步骤能够进一步增强染色效果。伊红染色:将切片浸泡在伊红染色液中,使细胞浆染成红色。染色时间较短,一般只需要几秒钟到几十秒不等。脱水与透明:将切片依次经过不同浓度的乙醇溶液进行梯度脱水,然后浸泡在二甲苯中进行透明处理。这一步骤的目的是去除切片中的水分和其他杂质,使其更加透明清晰。封片:在切片上滴加一滴中性树胶,然后盖上盖玻片进行封片处理。这一步骤能够保护切片并使其更加稳定耐用。检验染色液招标采购染色液若变质,会影响染色效果,需及时更换。
伊红在H-E染色中主要负责染色细胞质和其他细胞外基质。作为一种化学合成的酸性染料,伊红在水中离解成带负电荷的阴离子,与蛋白质的氨基正电荷(阳离子)结合,从而使细胞浆染色。具体来说,伊红能够染色细胞浆、红细胞、肌肉、结缔组织、嗜伊红颗粒等组织成分,使其呈现不同程度的红色或粉红色。这种染色效果与蓝色的细胞核形成鲜明的对比,使得组织切片中的结构更加清晰、易于观察。细胞浆是细胞内除细胞核以外的部分,包括内质网、高尔基体、线粒体等细胞器以及细胞质基质。在H-E染色中,伊红能够染色细胞浆,使其呈现粉红色或红色。这种染色效果不仅有助于区分细胞核与细胞质,还能够清晰地显示出细胞浆内的各种细胞器。这对于研究细胞的结构和功能具有重要意义。
H-E染色是一个复杂而精细的过程,需要经过多个步骤才能确保染色效果。以下是H-E染色的主要操作步骤:固定:使用甲醛或其他固定剂处理组织样本,保持其原有结构。脱水:使用不同浓度的乙醇溶液对组织样本进行脱水处理,以去除组织中的水分。切片:将脱水后的组织样本切成薄片,以便进行染色观察。染色:首先使用苏木精对切片进行染色,使细胞核呈现紫蓝色;然后使用伊红对切片进行复染,使细胞质和其他细胞外基质呈现红色或粉红色。脱水透明:使用无水乙醇和二甲苯对切片进行脱水透明处理,以便用中性树胶封盖。封片:使用中性树胶将切片封盖在载玻片上,以便进行观察和保存。自动化染色机能提高H-E染色的效率和一致性。
H-E染色液在医学研究中的应用普遍而深入。它不仅被用于组织学和病理学的常规染色中,还被普遍应用于tumour学、免疫学、遗传学等多个领域的研究中。在组织学和病理学中,H-E染色液是诊断疾病的重要工具之一。通过对组织切片进行H-E染色,医生能够清晰地观察到细胞和组织结构的形态变化,从而判断病变的性质和程度。这对于疾病的早期诊断和调理具有重要意义。在tumour学研究中,H-E染色液被用于观察tumour细胞的形态特征和分布规律。通过对tumour组织进行H-E染色,研究人员能够清晰地看到tumour细胞的形态、大小、核分裂象等特征,从而判断tumour的恶性程度和预后情况。这对于制定个性化的调理方案具有重要意义。染色后,组织切片需妥善保存,避免褪色和损坏。云南病理染色液招标采购
染色液应保存在阴凉、干燥、通风的地方。云南病理染色液招标采购
切片质量是评估H-E染色质量的基础。完善的切片应该具有适当的厚度(通常为4-6微米)、均匀性、完整性以及平整度等特点。切片质量的好坏直接影响到染色效果和观察结果。此外,切片还应保持平坦无皱褶、折叠,无污染物和气泡,盖玻片周围不得有胶液外溢,以确保透明度良好。H-E染色质量受到多种因素的影响,包括组织固定方式、染色时间、染色剂浓度、洗涤次数和时间以及切片厚度等。这些因素在染色过程中起着至关重要的作用,需要严格控制以确保染色结果的准确性和可靠性。云南病理染色液招标采购
洗涤步骤在H-E染色中也不可忽视。洗涤次数过少可能导致染色剂残留,影响观察效果;而次数过多则可能导致染色剂流失,组织着色不足。因此,需要适当控制洗涤次数和时间以确保组织颜色完整且清晰。切片厚度是影响H-E染色质量的关键因素之一。过厚的切片可能导致染色不均,因为染料难以深入组织内部;而过薄的切片则可能导致染料渗透不足,使得组织颜色过浅。因此,需要严格控制切片厚度以确保染色的均匀性和清晰度。评估H-E染色质量需要综合考虑多种方法和标准,包括肉眼观察法、显微镜观察法以及量化分析方法等。同时,还需要严格控制影响染色质量的多种因素,如组织固定方式、染色时间、染色剂浓度、洗涤次数和时间以及切片厚度等。通过...