免疫组化结果背景染色较深的原因有哪些？
（1）抗体浓度过高：一抗浓度过高是常见的原因之一。解决办法是，每次使用新抗体前应当对其工作浓度进行测试，使每一抗体个体化，找到适合自己实验室的理想工作浓度，既使是即用型的抗体也应如此，不能只简单的按说明书进行染色。
（2）抗体孵育时间过长或温度较高：解决办法是，严格执行操作规程，比较好随身佩带报时表或报时钟，及时提醒，避免因遗忘而造成时间延长。现在流行的二步法（Polymer）敏感性很高，要求一抗孵育的时间不是传统的1小时，而是30分钟，因此，要根据染色结果进行调整。
（3）DAB变质和显色时间太长：DAB比较好现用现配，如有沉渣应进行过滤后再用。配制好的DAB不应存放时间太长，因为在没有酶的情况下，过氧化氢也会游离出氧原子与DAB产生反应而降低DAB的效力，未用完的DAB存放在冰箱里几天后再用这种似乎节约的办法是不可取的。DAB的显色比较好在显微镜下监控，达到理想的染色程度时立即终止反应。但是当染**太多时或用染色机时，这样做似乎不现实，但至少应对一些新的或少用的抗体显色时进行监控，避免显色时间过长。
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免疫组化的局限性。灵敏度高、精确性和特异性是一种理想的cancer标记物必须具有的，但至今所发现的cancer标记物还没有能完全满足这些标准。某些正常细胞也分泌一些cancer标记物，因此cancer细胞学并不是单独产生一种标记物，即选用一组抗体比单一抗体更有利。在cancer诊断中评估免疫组化的局限性主要在抗体特异性和解释方面。在免疫组化操作中都必须有适当的阳性与阴性对照，作为技术完整性质量控制，如对照组被忽略或不理想时，免疫组化染色的结果要谨慎对待，免疫组化的正确结果不仅要依靠技术步骤上规范化操作，而且有赖于正确的解释，在报告免疫组化染色结果时不应孤立地解释，应考虑到诊断与鉴别诊断、所应用的抗体特性、所研究组织性质，同时还要注意假阳性与假阴性结果的干扰。甘肃免疫组化外包英瀚斯生物做免疫组化怎么样？
免疫组化的局限性，可能会有假阳性。阳性信号定位不正确即为假阳性，包括着色不匀、背景着色、边缘效应，另外组织的某些特定成分也能导致假阳性结果。假阳性可能的原因有:(1)一抗浓度及一抗是否失效，抗体有一个合适的浓度范围且必须在有效期内使用，过期的抗体或者不着色，或者背景着色，形成假阳性;(2)试剂未充分覆盖组织，组织边缘的试剂易干浓度较组织中间高致深染;(3)抗体孵育时间过长，由于室温的影响夏季孵育时间稍短，冬季孵育时间稍长;(4)操作过程中组织变干，造成组织边缘收缩或损坏形成伪影，产生假阳性;(5)3，3'-二氨基联苯胺(DAB)显色时间太长，DAB宜现配现用，配制时间比较好在30min以内;(6)由于胞浆里含有较多的蛋白质，因此间质和胞浆中出现很多非特异性的染色，如内源性酶血红蛋白、肌红蛋白等造成的着色，可以通过血清封闭解决;乳腺cancer组织中的脂肪细胞、淋巴细胞也会产生非特异性的染色;(7)非特异性抗体吸附常见于坏死组织中，使坏死组织呈较高的背景染色，在免疫组化中应避免选择坏死组织较多的蜡块。
免疫组化的定量分析怎么做？
免疫组化的定量分析是通过图像分析软件对显色结果进行定量评估。免疫组化常用的方法有光密度分析和阳性细胞计数。光密度分析是通过测量显**域的光密度值，评估目标蛋白的表达水平。免疫组化阳性细胞计数是通过计数显色阳性的细胞数量，评估目标蛋白的表达水平。定量分析需要考虑多个因素，如显色强度、背景信号和切片厚度。此外，免疫组化定量分析的结果通常只能进行半定量分析，不能提供***的定量数据。 免疫组化protocol，详情请看英瀚斯生物官网。
免疫组化临床应用对“未分化”cancer的分类。未分化cancer包括cancer或肉瘤，在HE切片上由于cancer的“未分化”而缺少cancer细胞的起源特征不能分类，初步区分组织学类型用非特异性抗体，在其基础上再选用特异性抗体做进一步鉴定。如分化差的cancer可显示Vimentin或S-100蛋白，有时淋巴瘤可以表达上皮膜抗原，一些黑色素瘤表现出角蛋白，这同时也强调了在cancer诊断中应使用一组抗体而不是单个抗体。如果您有实验外包的需求，可以与我们南京英瀚斯生物进行联系，我们也有做免疫组化的服务！免疫组化检测经验总结！湖北切片免疫组化注意事项
免疫组化怎么做？步骤方法？山西大鼠免疫组化价格
免疫组化中IHC vs ICC的区别。英瀚斯生物为您说明。除了生物学来源，IHC和ICC在样品处理的程度上也有所不同。ICC需要透化，要么通过固定过程，要么是单独的透化步骤，这样抗体才能与细胞内的靶点相结合。而IHC可能不要单独的透化步骤，这取决于切片的厚度和固定方法。包埋在石蜡中的IHC切片必须进一步处理，才能进行抗体染色。一旦处理好样品，IHC和ICC的染色操作就几乎没什么差异了。当然，就染色而言，根据所使用的抗体来优化还是少不了的。山西大鼠免疫组化价格
