比较不同的神经功能损伤评分标准对小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)运动功能障碍评估的效能。方法:应用MOG35-55多肽加完全福氏佐剂乳化后免疫20只C57BL/6小鼠,复制EAE小鼠模型,并使用3种不同的评分标准(Kono's5分法、Hooper's7分法、Weaver's15分法)观察和评估实验动物的发病情况,对实验小鼠在发病初期、高峰期的神经功能障碍进行定量的功能损伤评价。结果:3种评分标准比较,在发病初期,15分法和7分法评估神经损伤症状的敏感性相当,比5分法高;高峰期,以症状评分与病理评分的相关性程度来比较3种评分法的效度,15分法效度比较高,7分法次之。结论:Weaver's15分法评价EAE模型神经功能损伤症状,具有明显的优势,推荐作为今后EAE研究的优先评分法。啮齿动物EAE模型仍有许多局限性。广东专业的eae模型怎么造模
EAE模型是实验动物通过神经组织(其中的某些成分)或病毒诱导产生的。EAE的诱导有主动诱导法和被动诱导法两种。不同的免疫方法,可影响抗原递呈,激发不同的免疫反应,这不但影响EAE的发生率,还可影响其发展与转归。通常采用主动诱导法制备EAE模型,将抗原与佐剂的混合乳剂直接注射至动物体内,经过一定时间的潜伏期,诱导EAE的产生。抗原注射部位的不同,可影响EAE的发生率、潜伏期、死亡率及复发率。常用的注射部位有脚垫、颈部及背部(皮下、皮内、肌肉)、腹腔和尾静脉等多种,其中以皮下多点注射及脚垫注射的发病率比较高,而颈部注射则有较高的复发率。 因多次注射易引发免疫耐受,现在多采用单次注射抗原法。重庆比较好的eae模型EAE模型反映人类的MS不同临床,免疫学和组织学方面的多样性。
不同品种或同一品种不同品系动物对EAE的易感性主要受免疫反应基因(Ir基因)影响,Ir基因的调节作用表现为T细胞表面受体对髓鞘碱性蛋白(MBP)的特异性表达。动物的种类不同,其受体表达能力不同,对自身抗原的反应性不同,因而对EAE的易感性也不同,因此在选择动物时需要寻找EAE模型的敏感动物。鉴于对EAE敏感的Lewis、DA大鼠,PL/J,SJL/J小鼠的价格昂贵、不宜获得且难以饲养,国内多采用价廉易得的Wistar大鼠,但其敏感性不及前者。
自噬在EAE模型中的研究鲜有报道,本实验提出在EAE早期,即存在着自噬水平的降低,并贯穿疾病全程。进一步抑制自噬水平,可以促使疾病早期小胶质细胞***,增高病程中IL-1β的表达水平及炎细胞浸润情况,加重神经功能缺损,所以EAE自噬水平的降低是导致疾病炎症反应发***展的可能原因。这为***MS提供了新的临床思路和***策略。但本实验尚不能明确自噬降低的原因,有待进一步的研究。HE染色结果显示免疫后16 d及30 d EAE+3-MA组小鼠炎细胞浸润情况较同时间点EAE模型组加重EAE具有复杂的神经药理学特征,许多目前已用或即将使用的MS药物得以开发、测试或验证,基于EAE研究。
MOG,英文全名Myelinoligodendrocyteglycoprotein,中文名髓鞘少突胶质细胞糖蛋白,髓鞘的一种微量成分,属于免疫球蛋白超家族成员之一。t也是特定表达于***系统(CNS)的自身抗原,诱导多发性硬化症的原发性脱鞘特征。MOG(35-55)是髓鞘少突胶质细胞糖蛋白的免疫优势表位,能够诱导强烈的T细胞和B细胞应激反应,具高度致脑炎性,能够诱导啮齿类动物的实验性白身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型。EAE是**普遍的MS动物模型,具有MS许多的临床和病理生理学特征。单次注射MOG(35-55)能够产生一种复发-缓解型神经性疾病,表现出大量斑块状脱髓鞘病症。1-甲基-4-苯基-1,.2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的多巴胺神经元损伤模型,免疫接种MOG(35-55)能抑制该神经元的白发再生功能。EAE模型的发生与年龄密切相关。海南大鼠eae模型动物实验外包
PLP也是常用建立EAE模型的髓鞘抗原,模型呈现缓解-复发的特点,多用来建立复发-缓解型EAE模型。广东专业的eae模型怎么造模
EAE模型的被动转移实验是研究其发病机制的**直接证据,也是研究EAE的***及预防措施的良好模型。将抗原***的PLP特异性T细胞转输给同一品系的正常大鼠或小鼠,也可引起EAE。MBP特异性自身反应性T细胞在MS的发病机制中也起着关键作用,T细胞必须先在外周活化,通过血管内皮细胞进入CNS才能致病。EAE的神经症状通常根据Kono等提出的标准分为5级。0级:无任何临床症状;1级:动物尾巴无力,2级:尾部无力+肢体无力,3级:肢体轻度麻痹,4级:肢体严重麻痹,被动翻身后不能复原;5级:濒死状态或死亡。广东专业的eae模型怎么造模