细胞培养基基本参数
  • 品牌
  • 华晨阳,iCleanhcy
  • 型号
  • HCY-BCM
  • 厂家
  • 深圳市华晨阳科技有限公司
细胞培养基企业商机

CMRL培养基是由康诺特医学研究室(ConnaughtMedicalResearchLaboratories)设计出来的,初用于L细胞(Earle)的无血清培养。CMRL培养基添加马血清或小牛血清后,特别适用于猴肾细胞的克隆培养以及其他哺乳动物细胞系的培养。本产品含有多类细胞培养所需的氨基酸、维生素、无机盐等多种成分,但不含蛋白质、脂类或任何生长因子,故此产品需搭配血清或无血清添加物使用。注意事项本产品经过滤除菌,使用时应注意无菌操作,避免污染;为保持本产品的比较好使用效果,请勿进行冻融处理;本产品用于科研或进一步研究使用,不用于诊断和。针对细胞培养应用,我们提供多种组分的 McCoy’s 5A改良培养基。海南医用细胞培养基生产产家

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    无血清培养基中通常需要添加一些额外的组分,才能帮助细胞贴壁生长,包括以下几大类物质:1)促贴壁物质:一般为细胞外基质,如纤连蛋白、层粘连蛋白等。它们还是重要的分裂素以及维持正常细胞功能的分化因子,对许多细胞的繁殖和分化,起着重要作用。纤连蛋白主要促进来自中胚层细胞的贴壁与分化,这些细胞包括成纤维细胞、肉瘤细胞、粒细胞、肾上皮细胞、肾上腺皮质细胞、CHO细胞、成肌细胞等。2)促生长因子:针对不同细胞添加不同的生长因子。也是刺激细胞生长、维持细胞功能的重要物质,有些是许多细胞必不可少的,如胰岛素。3)酶抑制剂:培养贴壁生长的细胞,需要用胰酶消化传代,在无血清培养基中需含酶抑制剂,以终止酶的消化作用,达到保护细胞的目的。常用的是大豆胰酶抑制剂。4)结合蛋白和转运蛋白:常见如转铁蛋白和牛血清白蛋白。牛血清白蛋白的添加量比较大,可增加培养基的粘度,保护细胞免受机械损伤。许多旋转式培养的无血清培养基都含有牛血清白蛋白。5)微量元素:硒是常见的。山西华晨阳细胞培养基Ham’sF-10营养混合物(Ham’sF-10Nutrient Mixture)是由Ham针对CHO细胞无血清培养设计出的一种培养基。

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    Dulbecco’s改良培养基–DMEM(Dulbecco’sModifiedEagleMedium)是在MEM培养基的基础上研制的,与MEM培养基相比,氨基酸的含量增加了2倍,维生素的含量增加了4倍,同时还增加了非必须氨基酸、微量铁离子以及**酸钠。DMEM培养基**初设计葡萄糖含量为1000mg/L(低糖型),后来又发展出葡萄糖含量为4500mg/L(高糖型),现已广泛应用于各种细胞的培养。HEPES是一种优良的生物缓冲剂,对细胞无毒性作用,添加HEPES的培养基能够较长时间保持恒定的PH范围,可以有效的防止培养液PH波动较大对细胞生长产生不利的影响。可用于无CO2培养箱。酚红在培养基中被用来作为PH值的指示剂,用以持续监测培养液的酸碱度,在低PH值时酚红使培养液呈黄色,而较高的PH值时使培养液呈紫色,PH值~,**适合细胞培养。但酚红也有一些缺点,研究表明酚红可以模拟固醇类***(特别是雌***)的作用,因此在用到雌***敏感的细胞时(如乳腺组织),比较好使用不含酚红的培养基。酚红会干扰流式细胞分析时候的检测。此外,一些无血清培养基的配方中若存在酚红会干扰钠-钾平衡。

    1.细胞培养基的种类按照细胞培养基的发展历史,细胞培养基大致可分为平衡盐溶液、天然细胞培养基、合成细胞培养基、无血清细胞培养基、限定化学成分细胞培养基等几大种类。(balancedsaltsolution,BSS)BSS主要是由无机盐、葡萄糖组成,它的作用是维持细胞渗透压平衡,保持pH稳定及提供简单的营养。其主要用于细胞的漂洗、配制其他试剂等。几种常用的BSS配方如下(表1-1)。D-Hank's与Hank's的一个主要区别是前者不含有Ca2+和Mg2+,因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因为Ca2+、Mg2+是细胞膜的重要组成成份,参与细胞粘附等功能,使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免细胞结团。此外,Hanks液和Earle液是常用的BSS基础溶液,前者缓冲能力较弱,适合于密闭培养;后者缓冲能力较强,适合于5%CO2的培养条件。天然培养基指来自动物体液或利用组织分离提取的一类培养基,如血浆、血清、鸡胚浸出液等。其优点是营养成分丰富,培养效果良好,但缺点是成分复杂,来源受限且制作过程复杂、批间差异大。目前使用的天然培养基是血清,另外各种组织提取液、促进细胞贴壁的胶原类物质在培养某些特殊细胞也是必不可少。水解乳蛋白是乳白蛋白经蛋白酶和肽酶水解的产物。RPMI-1640是改进型的McCoy ‘s 5A培养基,使用碳酸氢盐缓冲系统。

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    III)细胞系的大规模连续培养。该培养基主要用于培养和维护鳞翅类衍生细胞系和扩增这些细胞系的病毒。IPL-41培养基基础也以用于无血清夜蛾细胞的杆状病毒重组蛋白表达。(balancedsaltsolution,BSS)BSS主要是由无机盐、葡萄糖组成,它的作用是维持细胞渗透压平衡,保持pH稳定及提供简单的营养。其主要用于细胞的漂洗、配制其他试剂等。目前用于细胞培养的血清主要是牛血清,培养某些特殊细胞也用人血清、马血清等。牛血清对绝大多数哺乳动物细胞都是适合的,但并不排除在培养某种细胞时使用其他动物血清更合适。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。合成培养基是根据天然培养基的成分,用化学物质模拟合成、人工设计、配制的培养基。DMEM培养基**初设计葡萄糖含量为1000mg/L(低糖型),后来又发展出葡萄糖含量为4500mg/L(高糖型)。北京细胞培养基全国发货

M199含有独特的成分,包括腺嘌呤、腺苷、次黄嘌呤、胸腺嘧啶、以及其他的维生素。海南医用细胞培养基生产产家

    L-谷氨酰胺(Glutamine)是细胞培养中所必要的一种营养,但其在溶液中不安定,会自发降解生成氨和焦谷氨酸,其中氨对细胞危害;而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中格外的安定,不会自发的降解。细胞运用其机制是:在细胞培训时,细胞会日益向培养液中获释一种肽酶,将L-丙氨酰-L-谷氨酰水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺,而后细胞会将这两种水解产物吸收运用。细胞运用L-丙氨酰-L-谷氨酰的过程与流加培养方针相像,连续的将低浓度水准的L-谷氨酰胺加入到培养液中,从而提高了L-谷氨酰胺的利用率,且不会生成剩余的氨,更有利于细胞的生长。L-丙氨酰-L-谷氨酰可以取而代之等摩尔的L-谷氨酰胺,适用于所有的细胞,几乎无须适应,并且可以延长细胞的培养时间,缩减传代次数,即节约了时间也节省了钱财。与添加L-谷氨酰胺的培养基中培训的细胞相比之下,活性减低得更慢。延滞期稍为延长的缘故是肽酶的释放和二肽的消化需一定的时间。NEAA(非须要氨基酸),是在MEM培养基的基本上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天(门)冬酰胺、L-天(门)冬氨酸、L-脯氨酸、L-丝氨酸和甘氨酸7种NEAA,能下降细胞培育时细胞自身生产非须要氨基酸的副作用,有效性推动细胞增殖代谢。葡萄糖可以根据研究需。海南医用细胞培养基生产产家

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