HE染色反蓝的原理:苏木素染液,细胞核内的染色质主要是去氧核糖核酸(DNA),DNA的双螺旋结构中,两条链上的磷酸基向外,带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木素精碱性染料以离子或氢键结合而被染色。苏木精在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色。 分化:苏木素染色之后,用水洗去未结合在细胞上的染液,但是在细胞核中结合过多的染料和细胞浆中吸附的染料必须用分化液1%盐酸酒精脱去,才能保证细胞核和细胞浆染色的分明,把这个过程称为染色的分化作用。因酸能破坏苏木素的醌型结构,使色素与组织解离,分化不可过度。蓝化:分化之后苏木素在酸性条件下处于红色离子状态,在碱性条件下处于蓝色离子状态,而呈蓝色,所以分化之后用水洗去酸而中止分化,再用弱碱性水使苏木精染上的细胞核变呈蓝色,称蓝化作用,一般多用自来水浸洗即可变蓝,也可用温水(50度温水比较好)变蓝。HE染色取材、染色以及分析方法介绍。甘肃比较好的HE染色外包
HE染色攻略:HE染色又称为苏木精-伊红染色,染色后组织或细胞可以借助普通光学显微镜观察与鉴别细胞凋亡与细胞坏死的一种染色方法。这种方法适用范围***,对组织细胞的各种成分都可着色,便于***观察组织构造,而且适用于各种固定液固定的材料,染色后不易褪色可长期保存。经过HE染色,细胞核被苏木素染成蓝紫色,细胞质被伊红染色呈粉红色。可以观察细胞结构、组织层次等等。首先切片组织是否完整,组织有无损伤;然后看切片有无刀痕;***细胞核是否清晰可见,胞核与包浆要对比鲜明。四川质量好的HE染色外包让您放心的实验外包公司,专业HE染色实验服务平台。
HE染色就是用苏木精和伊红对细胞内的核糖体和细胞质染色的方法。H:Hematoxylin,苏木精E:Eosin,伊红苏木精(Hematoxylin,H)是一种碱染料,可将细胞核和细胞内核糖体染成蓝紫色,被碱染料染色的结构具有嗜碱。伊红(,E)是一种酸染料,能将细胞质染成红色或淡红色,被酸染料染色的结构具有嗜酸。染色前,须用二甲苯脱去切片中的石蜡,再经由高浓度到低浓度酒精,***入蒸馏水,就可染色。 很多细胞在新生时期胞浆对伊红着色较淡或轻度嗜碱,当其衰老时或发生退行变则呈现嗜伊红浓染。 胶原纤维在老化和出现透明变时,伊红着色由浅变深。
HE染色等常规染色,组化或是荧光优先推荐做石蜡切片。原因:石蜡切片对组织的形态保存比冰冻切片好,并且对抗原基本无影响。脂质染色(油红O染**odipy染色,尼罗红染色)必须做冰冻切片,不能做石蜡切片。以下染色必须要新鲜或冷冻组织冰冻切片:ROS染**-半乳糖甘酶染色,ATP染色,胆固醇染色。如果标本已经放在-80°冰箱冷冻了之后又想要做石蜡切片,将标本取出来千万不要解冻直接放于固定液内固定(在固定液内边解冻边固定)。组织形态结构保存完好顺序:新鲜组织立即投入固定液内固定石蜡切片>组织-80°冷冻后投入固定液内固定石蜡切片>新鲜组织立即投入固定液内固定冰冻切片>组织-80°冷冻后直接冰冻切片。脑组织HE染色如何观察?
HE染色细胞浆染色原理:细胞浆内主要成分是蛋白质,为两性化合物、细胞浆的染色与pH值有密切关系,当pH调到蛋白质等电点4.7-5.0时,胞浆对外不显电性,此时酸或碱性染料不易染色。当pH调到6.7-6.8时,大于蛋白质的等电点pH值,表现酸性电离,而带负电荷的阴离子,可被带正电荷的染料染色,现时胞核也被染色,核和胞浆难以区分。因此必须把pH调至胞浆等电点以下,在染液中加入醋酸使胞浆带正电荷(阳离子),就可被带负电荷(阴离子)的染料染色。伊红Y是一种化学合成的酸性染料,在水中离解成带负电荷的阴离子,与蛋白质的氨基正电荷(阳离子)结合而使细胞浆染色,细胞浆、红细胞、肌肉、结缔组织,嗜伊红颗料等被***成不同程度的红色或粉红色,与蓝色的细胞核形成鲜明的对比。关于HE染色,常用的结果分析原理。甘肃比较好的HE染色外包
HE染色的基本原理和结果分析。甘肃比较好的HE染色外包
HE染色常见问题:Q3:细胞核染色过浅,颜色暗淡答:切片在苏木素染液中停留过短,或苏木素过度氧化失效,或分化时间太长。对策:重新染色。将组织切片放入0.01%氢氧化钠、0.5%氨水、饱和的碳酸氢钠溶液、乙醇溶液,每个3-5min即可,接着重新染色。可以适当地组织的嗜碱性以增强核染色,如Zenker液固定的切片可放入5%碳酸氢钠溶液中3h,自来水冲洗5-10min染色,或Bouin液固定的切片可放入5%碳酸氢钠溶液中1h,自来水冲洗10min染色。Q4:细胞核染色过深,胞浆着蓝色答:切片在苏木素染液中停留过长;或切片太厚;或分化时间太短。这种情况首先镜下看看切片厚度(比较好厚度1-2层细胞核),要么重新染色,要么重新制片。南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。甘肃比较好的HE染色外包