HE染色常见问题：Q3：细胞核染色过浅，颜色暗淡答：切片在苏木素染液中停留过短，或苏木素过度氧化失效，或分化时间太长。对策：重新染色。将组织切片放入0.01%氢氧化钠、0.5%氨水、饱和的碳酸氢钠溶液、乙醇溶液，每个3-5min即可，接着重新染色。可以适当地组织的嗜碱性以增强核染色，如Zenker液固定的切片可放入5%碳酸氢钠溶液中3h，自来水冲洗5-10min染色，或Bouin液固定的切片可放入5%碳酸氢钠溶液中1h，自来水冲洗10min染色。Q4：细胞核染色过深，胞浆着蓝色答：切片在苏木素染液中停留过长；或切片太厚；或分化时间太短。这种情况首先镜下看看切片厚度(比较好厚度1-2层细胞核)，要么重新染色，要么重新制片。南京英瀚斯，专业的病理染色实验服务平台。科研常备实验操作之HE染色。广西质量好的HE染色价格
HE染色观察肝脏HE染色切片，首先要在显微镜下找到肝脏的标志性结构——肝小叶。显微镜首先调4倍物镜，调准焦螺旋至视野清晰，可以看到肝小叶结构。人的肝小叶之间结缔组织少，小叶分隔不明显，但动物如猪或小鼠，其肝小叶分界非常明显。肝小叶**有**静脉，在横切片上显示为空洞。肝小叶之间为将物镜调制10倍或20倍，就可以清楚地看到肝小叶结构。肝细胞以**静脉为中心向周围放射状排列，称为肝板。一般在20倍物镜下可以清晰看到肝细胞。20倍物镜下，肝细胞内染色为蓝色的是细胞核，细胞核大而圆，居中，异染色质少而着色浅，能清晰看到核仁。肝细胞胞质丰富，多成嗜酸性，当蛋白质合成旺盛时，胞质内出现散在的嗜碱性物质。肝细胞内有丰富的细胞器比如溶酶体、高尔基体、内质网，等等，但是在光镜下是无法看到的，需要在电镜下才能观察到。当然，肝小叶内除了肝细胞，还有胆小管、肝血窦、肝巨噬细胞等组织形态，但是在HE染色时并不容易观察到。做肝脏HE染色切片主要目的一般都是为了观察肝细胞形态是否完整、胞核有无增大、肝小叶形态是否完整，以检测药物等刺激因素对肝脏的损伤作用。广西质量好的HE染色价格HE染色是常见的病理染色，是比较基础是病理染色之一。
HE染色就是用苏木精和伊红对细胞内的核糖体和细胞质染色的方法。H:Hematoxylin，苏木精E:Eosin，伊红苏木精（Hematoxylin,H）是一种碱染料，可将细胞核和细胞内核糖体染成蓝紫色，被碱染料染色的结构具有嗜碱。伊红（，E）是一种酸染料，能将细胞质染成红色或淡红色，被酸染料染色的结构具有嗜酸。染色前，须用二甲苯脱去切片中的石蜡，再经由高浓度到低浓度酒精，***入蒸馏水，就可染色。 很多细胞在新生时期胞浆对伊红着色较淡或轻度嗜碱，当其衰老时或发生退行变则呈现嗜伊红浓染。 胶原纤维在老化和出现透明变时，伊红着色由浅变深。
HE染色分化作用：染色后，用某些特定的溶液将组织过多结合的染色剂脱去，这个过程称为分化作用，所用的溶液称为分化液。在HE染色中用0.5%盐酸乙醇作为分化液，因酸能破坏苏木精的醌型结构，使组织与色素分离而褪色。经苏木精染色后，必须用0.5%盐酸乙醇分化，使细胞核过多结合的苏木精染料和细胞浆吸附的苏木精染料脱去，在进行伊红染色，才能保证细胞核与细胞浆染色的分明。因此，在HE染色中分化是极为关键的一步。返蓝作用：分化之后，苏木精在酸性条件下处于红色离子状态，呈红色，在碱性条件下处于蓝色离子状态，呈蓝色。组织切片经0.5%盐酸乙醇分化后呈红色或粉红色，故分化之后，立即用水出去组织切片上的酸而终止分化，再用弱碱性水（0.2%氨水）使苏木精染上的细胞核呈现蓝色，这个过程称为返蓝作用或蓝化作用。另外用自来水浸洗也可使细胞核返蓝，但所需时间较长。肾脏组织HE染色如何观察。
HE染色骨组织的处理方式：组织里存有钙盐可妨碍用常规方法制作良好切片。骨组织及钙化病灶，经过固定后，需要先将钙盐除去使组织软化，才能进行常规切片。如果脱钙不全，则切片容易撕开或碎裂，损伤切片刀刀刃。脱去钙盐的过程，称为脱钙。骨组织固定24小时后，锯下不超过0.5cm厚的薄骨片，以4%甲醛溶液固定后，进行脱钙。骨组织过厚则需延长脱钙时间，但长时间浸于强酸会影响切片染色效果。取材骨组织固定于10%甲醛溶液24小时后再锯取厚度约0.5cm骨片固定以10%甲醛溶液固定2天脱钙将组织置于脱钙剂中，每日更换新鲜液，直至组织软化为止除酸流水冲洗24小时脱水、浸蜡、切片进行常规脱水、透明、浸蜡、切片南京英瀚斯，专业的病理染色实验服务平台。HE染色中固定液如何配置。江苏值得信赖的HE染色服务
HE染色，即是苏木精-伊红染色法，是形态学比较常用的染色方法。广西质量好的HE染色价格
HE染色实验步骤：（1）样品制备：对于贴壁生长细胞，胰酶消化，调整细胞浓度约1×105/ml，滴加于盖玻片上(置于6孔板中)，培养相应时间后，取出细胞爬片，用PBS洗涤3次。（2）样品固定：95%乙醇固定20min，PBS洗涤2次，每次1min。（3）染核：苏木素染液染色2-3min，自来水洗涤。（4）分色：镜下观察，若细胞核染色过深，用1%盐酸酒精溶液分色数秒，自来水洗涤。（5）染胞质：浸入伊红染液染色1min，自来水洗涤。（6）吹干或自然晾干细胞爬片后，中性树胶封片。若细胞用4%多聚甲醛固定，则染色时间相应延长，苏木素染色12-15min，伊红5min即可广西质量好的HE染色价格
