HE染色常见问题：Q3：细胞核染色过浅，颜色暗淡答：切片在苏木素染液中停留过短，或苏木素过度氧化失效，或分化时间太长。对策：重新染色。将组织切片放入0.01%氢氧化钠、0.5%氨水、饱和的碳酸氢钠溶液、乙醇溶液，每个3-5min即可，接着重新染色。可以适当地组织的嗜碱性以增强核染色，如Zenker液固定的切片可放入5%碳酸氢钠溶液中3h，自来水冲洗5-10min染色，或Bouin液固定的切片可放入5%碳酸氢钠溶液中1h，自来水冲洗10min染色。Q4：细胞核染色过深，胞浆着蓝色答：切片在苏木素染液中停留过长；或切片太厚；或分化时间太短。这种情况首先镜下看看切片厚度(比较好厚度1-2层细胞核)，要么重新染色，要么重新制片。南京英瀚斯，专业的病理染色实验服务平台。常用HE染色试剂配制方法。江西专业的HE染色分析
HE染色石蜡和冰冻切片样本的处理，样品处理：a.对于石蜡切片:二甲苯中脱蜡5-10分钟;换用新鲜的二甲苯，再脱蜡5-10分钟;无水乙醇5分钟;90%乙醇2分;70%乙醇2分钟;蒸馏水2分钟.b.对于冰冻切片：蒸馏水2分钟。c对于培养细胞：用4%多聚甲醛固定10分钟以上。蒸馏水洗涤2分钟。换用新鲜的蒸馏水，再洗涤2分钟。苏木素伊红(HE)染色对于上述处理好的样品：苏木素染色液染色5-10分钟(可以根据染色结果和要求调整时间)。浸自来水中冲洗去多余的染色液，约10分钟。蒸馏水再洗涤一遍(数秒钟)。95%乙醇5秒。伊红染色液染色30秒-2分钟(可以根据染色结果和要求调整时间)。此时，如果需要直接观察，可以用70%乙醇洗涤2次。如需脱水、透明后封片按后续步骤进行，70%乙醇洗涤后仍可按照后续步骤进行脱水、透明和封片处理。湖北结果客观的HE染色HE染色切片知识以及如何做出漂亮的切片。
HE染色病理技术中**常用的一种方法，通过它可以做出病理诊断和发现寻求别的辅助方法，以达到准确，完整的病理诊断。一、染色目的 病理学的所有切片，都必须通过一种以上的染料，通过各种不同的方法，将切片中各种不同的物质，在不同染液的作用下，将其显示出来，使之在光学显微镜下，能够完全的观看各种结构。例如，HE染色，好质量的切片可以清晰地显示出多不同的结构，细胞核着蓝黑色，细胞浆着粉红色，软骨着蓝色等。清晰的结构为诊断提供的依据，因此，染色技术也是病理技术中的重要组成部分，必须不断地总结，方能提高。
HE染色全名为苏木精和伊红染色方法，是**基本的病理学染色技术。由于组织或细胞的不同成分对苏木精的亲和力不同及染色性质不一样。经苏木精染色后，细胞核及钙盐粘液等呈蓝色，可用盐酸酒精分化和弱碱性溶液显蓝，如处理适宜，可使细胞核着清楚的深蓝色，胞浆等其它成分脱色。再利用胞浆染料伊红染胞浆，使胞浆的各种不同成分又呈现出深浅不同的粉红色。故各种组织或细胞成分与病变的一般形态结构特点均可显示出来。质量好的HE具备条件1.细胞核与细胞浆蓝红相映，鲜艳亮丽；2.胞核鲜明、核膜、核染色质颗粒均清晰可见；3.组织或一般结构特点及假物质成分均能显示出来。HE染色观察细胞形态变化。
HE染色原理：易于被碱性或酸性染料着色的性质称为嗜碱性(basophilia)和嗜酸性(acidophilia)；而对碱性染料和酸性染料亲和力都比较弱的现象称为中性（neutrophilia)。构成组织内蛋白质的氨基酸的种类很多，它们有不同的等电点。在普通染色法中，染色液的酸碱度为pH6左右，细胞内的酸性物质如细胞核的染色质、腺细胞和神经细胞内的粗面内质网及透明软骨基质等均被碱性染料染色，这些物质称为嗜碱性。而细胞质中的其它蛋白质如红细胞中的血红蛋白、嗜酸粒细胞的颗粒及胶原纤维和肌纤维等被酸性染料染色，这些物质称为嗜酸型。如果改变染色液的酸碱度，pH值升高时，则原来被酸性染料染色的物质可变为嗜碱性；pH值降低时，原来被碱性染料染色的物质则可变为嗜酸性。所以说染色液的pH值可以影响染色的反应。脱氧核糖核酸（DNA）两条链上的磷酸基向外，带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏木精碱性染料以离子键结合而被染色。苏木精在碱性溶液中呈蓝色，所以细胞核被染成蓝色。HE染色中固定液如何配置。江西专业的HE染色分析
肾脏组织HE染色如何观察。江西专业的HE染色分析
HE染色脱蜡不净的原因及验证方法：1)二甲苯使用过久，含蜡成分太高或脱蜡效果差：可更换二甲苯验证。2)切片经烤片，冷却后放入二甲苯脱蜡或室温太低；延长拖拉时间或用热的切片脱蜡验证。3)脱蜡时间太短或振荡太少，幅度太小；可延长脱蜡时间或以多振荡来验证。4)洗涤二甲苯用的乙醇使用时间过久，导致乙醇中二甲苯含量过高，二甲苯残留在切片上（由于二甲苯与水不相溶，切片上有二甲苯的地方，苏木精就没有办法渗透进去，在切片染色完成后留下了点状的不着**域）：更换各道乙醇验证。5)二甲苯、乙醇质量不佳（偶有试剂瓶内装的试剂与试剂名不相符）：换批号验证。6)更换脱蜡液体时试剂拿错：需重新配置验证。7)更换脱蜡液体时试剂次序放错：需重新配置验证。8)烤片时间短，切片上水分没有烤干，也会导致着色不匀，出现点状发白区域。江西专业的HE染色分析
