衢州超滤离心管咨询

超滤离心管使用注意事项：当浓缩到剩下1ml时，取50ul缓冲溶液，加入10ul流穿，看有没变蓝色，以此判断超滤管是否漏掉蛋白。如果管漏了，将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。要精确判断是否漏管，用5mgml的BSA离心10min，再取流穿，跑蛋白胶或Bradford粗测，继续加入剩下的蛋白液浓缩（在冰上操作，防止蛋白受热），直到所有浓缩液都加完为止。离心过程中注意是否发生蛋白沉淀，导致堵管。若发生沉淀，要确定沉淀的具体原因，是蛋白浓度过高还是Buffer不合适；前者可用多根超滤管同时超滤，降低浓度的办法解决，后者的方法是换不同的缓冲溶液，直到蛋白不发生沉淀为止。超滤离心管能够去除混合物中的杂质和低分子量化合物，得到高纯度的目标化合物。衢州超滤离心管咨询

超滤离心管的分子量选择：按照样品量和目标分子量选择适当的超滤离心管，为了得到较高的收率，所选滤膜的截留分子量MWCO建议选择所需截留分子大小的1/3左右，不超过目标分子量的一半。因为超滤膜上孔径是平均孔径，膜上的孔并非均匀，离心高压下也可能渗漏，因此截留孔径越小，流速越慢但截留比例更大。如果样本浓度低体积大，可选择较小容积的超滤管多次重复加样离心。如果同时需要脱盐和去除可溶小分子杂质，可将待浓缩样品稀释到超滤管较大容积再离心，重复2次可除去99%盐。避免过长时间或者过速离心，虽然优良品质的产品都有防死端设计，可避免过度离心造成膜表面干而造成不可逆吸附。避免过度浓缩，体积越小，越容易因表面吸附而损失得率。离心后用Tips轻轻吹吸几次滤膜截留的溶液，必要时补加一定体积的缓冲液冲洗膜表面，有助于减少膜表面吸附，能提高回收率。尽量避免Tips接触膜表面。衢州超滤离心管咨询超滤离心管还可用于制备高纯度的酶、蛋白质等生物制品，以应用于不同领域的实验室操作。

一般来说，超滤的回收率可达90%以上。样本损失大多是由于滤膜表面和容器表面的非特异性吸附引起的。因此，选择口碑好、优良品质的浓缩离心管非常重要。作为过滤方面的老牌公司，提供了多种浓缩离心管，可对50 μl到60 ml的样本进行高效的浓缩和脱盐。它配备了（改良的聚醚砜）膜，确保低的非特异性吸附和高的回收率。当然，这个的前提是你选对了浓缩离心管。浓缩离心管，适合处理不同体积的样本。你可以根据你的样本量来选择。不过，如果样本浓度低体积大，可以选择较小容积的浓缩离心管多次重复加样离心。一旦样本体积确定，下一步就是选择适当的MWCO。对于蛋白质而言，建议所选滤膜的MWCO是欲截留分子大小的1/6-1/3。通常，截留孔径越小，流速越慢，但截留比例更大。

选择合适的超滤管，主要考虑MWCO和浓缩体积，较常见的是10kD。到底选择多大截留分子量比较合适呢?10kDa、 5kDa、还是30kDa?通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量为35kDa，就可以选择10kDa截留分子量的超滤 管。若目的蛋白分子量为10kD左右，则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书，注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同，表格中有。新买来的超滤是干燥的，使用前加入MilliQ水，水量完全过膜，冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超过管顶的白线为准。操作要轻，加入蛋白液前，超滤管需要插在冰上预冷。超滤离心管可用于分离细胞培养上清中的蛋白质和小分子物质。

我们面对上面客户反映的问题使用2次以上出现问题是很正常的，但是我们也不能保证客户使用5次，8次，还是更多次就一定会出现穿孔不能用，我们必须再一次强调提醒做实验的各位老师，这个超滤管必须严格按照说明书规定，一次性使用，不要重复使用，重复使用虽然有的人可以用几次，但是过滤效果已经严重影响了，效果肯定一次次的下降！你说这样过滤的样品做后续实验，那你的后续实验还可信吗？所以厂家也一再强调较好不要重复使用！另外，有的客户说自己的超滤管使用一次就碎了，这是什么原因呢？超滤管的质量问题还是离心机转速的问题呢？说到这里，我们也再一次提醒大家超滤管使用如果转速太高，离心力肯定会更大！这样不断用力磨损，很容易一次就碎了，也可能使用几次碎了！超滤离心管可用于分离和纯化各种大分子化合物，如蛋白质、核酸、多糖等。衢州超滤离心管咨询

超滤离心管的使用需要配合其他实验步骤，如样品制备、pH调整等。衢州超滤离心管咨询

离心过滤器具有快速超过滤功能，能够达到较高的浓缩系数，易于从稀释液和复杂的样本组合进行浓缩液回收。其竖式设计以及可用的滤膜表面积能提供快速的样本处理和较高的样本回收率(通常大于90%稀薄的初始溶液)，并能进行80倍浓缩。典型的处理时间为15至60分钟，这取决于标称分子量限值(NMWL)。竖式设计将溶质极化和之后造成的滤膜结垢降至较低，过滤装置中的物理止滤点防止过滤器旋转过度使样本干燥和造成样本损失。浓缩液用移液管从过滤器的样本槽中收集，而超过滤滤出液则收集到所提供的离心管中。该装置可在摆桶或定角转子中旋转。装置未经消毒，只供—次使用。衢州超滤离心管咨询