离心机的加速度调至较低档,减小对膜的压力。注意,一定要等离心机达到目的转速之后,方可离开离心机,否则离心机出问题时,无法一时间处理。膜与转轴的方向根据说明书调整(角转离心机的情况是膜与轴垂直)。在实际使用中,一般转速开的比说明书里的要低,这样可以延长离心管的使用寿命。当浓缩到剩下1ml时,取50ul缓冲溶液,加入10ul流穿,看有没变蓝色,以此判断超滤管是否漏掉蛋白。如果管漏了,将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。要精确判断是否漏管,用5mgml的BSA离心10min,再取流穿,跑蛋白胶或Bradford粗测,继续加入剩下的蛋白液浓缩(在冰上操作,防止蛋白受热),直到所有浓缩液都加完为止。超滤离心管可以用于分离提取海洋样品中的藻类、细菌等微生物群落,以进行海洋生态学研究。安徽超滤离心管公司
超滤离心管(JetSpinTM -5、15)分别可处理体积5mL和15mL以内的样本,离心管包含一个内置聚醚砜(PES)膜过滤装置,聚醚砜膜具备低蛋白附着、高通量的特点,可应用在多种不同的截留分子量中,一般来说回收率能够达到90%以上。超滤离心管是一种用于分离液体的工具,常用于生物学和化学研究中。它的使用方法如下:1.将样品液体加入超滤离心管内。2.将超滤离心管放入离心机中进行离心。3.离心结束后,打开离心管,收集离心液。4.根据需要,可以在使用前或使用后对超滤离心管进行清洗和消毒。注意:每个研究史都有丕回要求:县体操作应根据实验所盂进行调整。舟山小型超滤离心管咨询超滤离心管可以用于制备血液制品、免疫球蛋白等缓解药物,以缓解某些自身免疫性疾病。
超滤离心管从细胞培养上清液中浓缩蛋白,在园子里找到一些关于浓缩蛋白的一些帖子,但还有些问题还是向园子里的大虾请教一下。我们定的是 15ml规格的管子,不知道有没有谁以前做过的,有关于转速,时间给一些建议,另外细胞上清液离心前是否需要什么预处理?离心之后回收蛋白时怎么尽量减少损失?如果要把管子重复利用,NaoH清洗后,如何在20%的乙醇中保存?是将其浸到乙醇中防于4度,还是在管子中灌入乙醇?我用过5ml的管子,当时使用的转速是4000rpm 8min,可以把5ml的样品液浓缩到约200ul,这只供参考,具体情况还要由您的样品决定。我保存5ml管子的方法是把内管取出,浸泡于装有20%乙醇的烧杯中。四度保存。
选择合适的超滤管,主要考虑MWCO和浓缩体积,较常见的是10kD。到底选择多大截留分子量比较合适呢?10kDa、 5kDa、还是30kDa?通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量为35kDa,就可以选择10kDa截留分子量的超滤 管。若目的蛋白分子量为10kD左右,则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书,注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同,表格中有。新买来的超滤是干燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全过膜,冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超过管顶的白线为准。操作要轻,加入蛋白液前,超滤管需要插在冰上预冷。超滤离心管适用于从细胞培养基、血浆、尿液等样品中分离蛋白质、核酸、多糖等大分子化合物。
选择合适的超滤管。通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量为35kDa,就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD左右,则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书,注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同。新买来的超滤是干燥的,使用前加入超纯水,水量完全过膜,冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超过管顶的白线为准。操作要轻,加入蛋白液前,超滤管需要插在冰上预冷。平衡。质量和重心二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快,否则直接损坏超滤膜。开始离心超滤(离心机预冷至4度)。超滤离心管可以用于制备高纯度的细胞培养基,以进行细胞培养和生长实验。安徽超滤离心管公司
超滤离心管的使用需要配合其他实验步骤,如样品制备、pH调整等。安徽超滤离心管公司
超滤离心管具有快速超滤功能,能够达到较高的浓缩倍数,轻松实现从稀释和复杂的混和样本中浓缩回收目的产物。垂直设计的超滤膜以及较大的有效滤膜表面积有助于快速的样本处理,获得较高样本回收率(通常>90%),并达到30倍的浓缩。产品特点:超滤离心管设计用于体外诊断,包括分析浓缩血清、尿液、脑脊液和其他体液;*内附膜可高效回收分子量范围的有效成分;*截留回收率高达80%以上;*标注浓缩量为200μl;*使用固定转子离心机时,较大处理样本量为10ml,较大RCF为5000xg;*使用吊桶式离心机时,较大处理样本量为12ml,较大RCF为4000xg;*热密封膜较大限度地减少了下游提取物;*垂直膜的设计减少浓缩所用时间(10-15分钟);*管体有带刻度印刷标识及可写入文字的白色的区域;*经过严格的泄漏测试。安徽超滤离心管公司