胸水外泌体脂质组学

外泌体(exosome)是多种活细胞经过“内吞–融合–外排”等一系列过程主动向胞外分泌的直径为30~150nm的双层膜结构细胞外囊泡(extracellularvesicles,EVs),广fan存在于血液、尿液和唾液等生物体液中,并通常作为细胞间胞质蛋白、核酸和脂质的转移载体发挥运输调控作用,被认为是细胞间通讯的核xin部分。外泌体于1983年在HARDING等和PAN等研究羊网织红细胞分化的过程中被发现,并于1996年由RAPOSO等证实能够作为一种细胞间通讯结构在免疫系统中发挥作用后得到了广fan关注。近年来,随着外泌体在中流、心血管和感ran性疾病等多种疾病形成中的生物学作用和功能被逐渐揭示,尤其是2015年MELO等发现,外泌体Glypican-1蛋白可有效区分慢性胰腺炎与胰腺ai以来,外泌体作为疾病诊断、预后预测标志物以及药物靶向zhiliao载体的转化医学应用也得到了迅速的推进。外泌体在心脏修复中起着关键作用。胸水外泌体脂质组学

利用蛋白质免疫印迹和酶联免疫吸附分析技术可以对外泌体标志性蛋白质进行定性定量分析。其中蛋白免疫印迹是外泌体的经典表征手段之一，操作时往往需要细胞裂解液作为阴性对照。常用的外泌体标志性蛋白质包括四跨膜蛋白质CD63、CD81、CD9、中流易感基因101蛋白(TSG101)、水通道蛋白2(AQP2，尿液中)和凋亡诱导因子6相互作用蛋白(Alix)等，内参蛋白质可以是肌动蛋白(βActin)或甘油醛－3-磷酸脱氢酶，阴性对照蛋白可以是阻抑素(PHB，线粒体标志蛋白)或钙联结蛋白Calnexin。在酶联免疫吸附析法中，外泌体裂解液通过固载有抗体的固相基质，随后与检测抗体共孵育。两种方法均存在操作繁琐、耗时长的问题，相比较而言，酶联免疫吸附分析法比蛋白质免疫印迹法更加快速，适用于高通量分析。干细胞外泌体提取试剂盒报价外泌体被工程化改造后，具有靶向特定细胞类型或组织的功能。

外泌体是新型治理剂，恶性瘤细胞往往能够通过分泌大量外泌体抑制宿主固有免疫。对外泌体的质谱研究发现，恶性瘤细胞的外泌体含有大量活化型的表皮生长因子受体（epidermalgrowthfactorreceptor，EGFR），可以抑制宿主细胞α型干扰素(IFN-α)的产生。这就解释了为什么部分瘤患者固有免疫低下，也为晚期病症患者的治理提供一个新的策略和理论依据。除了瘤，外泌体在其他疾病如心血管疾病等的诊断和治理的相关临床试验也在世界范围内开展中。

结果表明，PS亲和法可以检测到许多目前为止都无法检测的外泌体蛋白质和RNA。应用Tim4的外泌体强结合能力，可用ELISA或FACS高灵敏度定性检测、定量分析外泌体。以前无法用超速离心法提取的微囊泡，也通过运用PS亲和法实现高纯度提取。本指导书中对该技术进行详细说明，这项技术的有用性今后将受到世界各方评价，有望在外泌体和微囊泡生理功能的分析研究上起重大贡献。外泌体的检测和提取还遇到一个困难即：对各种外泌体的分类。研究人员尚未统一定义以何种方法提取的细胞外囊泡可以称之为外泌体，给实验数据的分析和重复性确认带来困难。近年，随着国际细胞外囊泡协会的成立、世界性研究者研讨会的举办，提案MISEV指南作为国际标准，计划或已经开始进行EV研究的科学家请务必阅读这些方针。随着外泌体的功能逐渐被发现，近年来，应用这些功能的医治法也在被开发出来。

在20世纪80年代，外泌体被描述为从网织红细胞分泌的内体来源的囊泡。人们对这些细胞外囊泡的兴趣逐渐增加，因为它们似乎参与了很多细胞过程。外泌体携带蛋白质、脂质和RNAs，介导体内不同细胞类型之间的细胞间通讯，从而影响正常和病理状态。只有近，科学家才认识到将外泌体与其他类型的细胞外囊泡分开的困难，这排除了特定功能对不同类型分泌的囊泡的明确归因。为了阐明这个复杂但正在发展的科学领域，该综述着重于外泌体和其他分泌的细胞外囊泡的定义。讨论了它们的生物发生，分泌及其后续的命运，因为它们的功能依赖于这些重要过程。在抗原呈递细胞中的外泌体发挥作用的报道后，人们对外泌体的兴趣增强。外泌体抑制剂

外泌体的复杂性，为疾病检测和监测提供了一个多指标的诊断窗口。胸水外泌体脂质组学

作用机制主要是旁分泌的间充质干细胞（MSC）被普遍地用于医治各种人类疾病。已经证明没有一个因素足以调解MSC的医治效果。然而，由许多细胞（包括MSC）分泌的外泌体膜囊泡是有吸引力的候选物作为其功效的载体。外泌体可以运输和运送大量的蛋白质、脂质和核酸，并可以改变细胞和身体部位的功能。除了作为细胞间通讯的关键作用之外，外泌体越来越多地被认为是疾病的生物标志物和预后因子。此外，它们有潜力被用作临床应用基因和药物递送的载体。该文回顾了外泌体的生物发生、分子组成及其作为细胞间通讯的信使的作用，着重于其作为干细胞医治的载体的潜力。胸水外泌体脂质组学