2、HEPES缓冲液HEPES是一种非离子两性缓冲液,其在pH7.2~7.4范围内具有较好的缓冲能力,常用在体外诊断、DNA/RNA提取、脂质体药物等方面。①HEPES缓冲液优点:在开放式培养或细胞观察时能维持较恒定的pH值,并对细胞无毒性作用。②HEPES缓冲液缺点:在高浓度时对一些细胞可能有毒,与其他缓冲剂相比成本略高。二、Tris-HCl缓冲液与HEPES缓冲液的应用1、Tris-HCl缓冲液的应用Tris常用于蛋白或者核酸的缓冲液,其在电泳缓冲液中与甘氨酸构成缓冲体系,稳定电泳过程中的pH,由于其具有弱碱性,水溶液的pH在10.5左右,可通过添加HCl或者NaOH制备不同pH的缓冲液,根据缓冲理论,Tris缓冲液的有效范围通常是pH7.0-9.2之间。此外,Tris还可以制备表面活性剂、硫化促进剂和一些药物(磷霉素等)的中间物,在化妆品、医药、涂料以及合成中均有应用。应用于体内时,Tris作为一种不含钠的氨基缓冲碱,在体液中与H2CO3结合,生成碳酸氢盐。因此它能缓冲酸,而且能降低CO2张力,有纠正急性呼吸性酸中毒和代谢性酸中毒双重效果,其作用较碳酸氢钠快而强。试剂级TRIS-HCl应用。四川高纯TRIS实验室采购
在生物制剂研发及生产过程中常会用到缓冲液,其作用是在有限的范围内调整溶液的pH值,使溶液的酸碱度符合制剂成分适宜的范围。**常用的缓冲液有很多,如磷酸盐缓冲液、Tris-HCl缓冲液、HEPES缓冲液、氨基酸缓冲液等。不同的缓冲液差别液很大,***主要来对比两种**常用的缓冲液:Tris-HCl缓冲液与HEPES缓冲液各自的优缺点。一、Tris-HCl缓冲液与HEPES缓冲液优缺点对比1、Tris-HCl缓冲液Tris缓冲液是在生化研究及制剂生产中使用较***的一种缓冲剂,其本身为弱碱,常用有效pH在“中性”范围,如Tris-HCl缓冲液:pH=7.5~8.5;Tris-磷酸盐缓冲液:pH=5.0~9.0。①Tris-HCl缓冲液优点碱性较强,可以只用这一种缓冲液配置由酸到碱的范围pH缓冲液;对生物化学过程干扰很小,不与钙、镁离子及重金属离子发生沉淀。②Tris-HCl缓冲液缺点pH受浓度影响较大,稀释10倍,pH变化大于0.1。温度效应大,如4℃时pH=8.4,37℃时pH=7.4。黑龙江77-86-1TRIS医院采购注射用TRIS-HCl应用。
Tris-HCl缓冲液的缓冲原理为:Tris中的-NH2与HCl结合生成Tris·HCl盐。季铵基团Tris·H+与Tris形成缓冲对,溶液中存在Tris·H++H2O←→Tris+H3O+平衡关系,凭借该平衡移动来发挥缓冲作用。其缓冲范围一般为7.0~9.0。由于Tris对生化过程干扰很小,不与钙、镁离子及重金属离子发生沉淀,所以在DNA、蛋白质等生物大分子实验中经常应用,Tris-HCl缓冲溶液可以做DNA、蛋白质的溶解液或提取液,也是DNA相关研究实验中的重要缓冲液,如DNA的捕获与释放、染色体的特异性标记等方面。具体应用方面,目前已上市的**mRNA疫苗其中一款(mRNA-1273®,Moderna,2020)选用Tris作为缓冲体系。已上市抗体药物中也有Tris的应用,如全球较早全人源的肿瘤坏死因子拮抗剂注射用依那西普(Enbrel,恩利)。
生物缓冲液是一种能在加入少量酸或碱时防止PH值改变的溶液,PH缓冲系统主要用来维持生物的正常PH值,在生理环境中起到重要的作用。在生化研究实验中,也常常使用缓冲液来维持实验体系的酸碱度。由于不同实验中所需PH值范围不同,也有很多生物缓冲液的种类可供选择,并且在不同的领域都各有优缺点。TRIS-HCL(氨丁三醇)缓冲液TRIS-HCL缓冲液在生物化学研究中使用比较***,本身为弱碱性,有效PH值范围在7.5-8.5。优点:碱性较强,可以只用这一种缓冲液配置由酸到碱的范围PH缓冲溶液。对生物化学过程干扰很小,不与钙、镁离子及重金属离子发生沉淀。缺点:PH受浓度影响较大,稀释10倍PH变化大于0.1;温度效应大,如4℃时PH=8.4,37℃时PH=7.4。了解更多氨丁三醇相关资讯,敬请关注上海艾伟拓!
Tris衍生缓冲液除了Tris-HCl之外,Tris还有多种衍生缓冲液:TBS=Tris-HCl+NaCl+KCl,常用于清洗免疫染色的组织或WesternBlotting中的蛋白印迹膜等;TBST=Tris-HCl+NaCl+tween20,做WesternBlotting中常用的一种洗膜缓冲液;TE=Tris-HCl+EDTA,对DNA的碱基有保护性,常被用于DNA的稳定和储存;TAE=Trisbase+乙酸+EDTA,是大片段DNA短时间电泳时***使用的缓冲系统;TBE=Trisbase+硼酸+EDTA,适用于长时间DNA电泳,对较小片段分离效果较好。试剂级TRIS-HCl缓冲液。贵州TRIS大批量采购
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Tris常用于蛋白或者核酸的缓冲液,其在电泳缓冲液中与甘氨酸构成缓冲体系,稳定电泳过程中的pH,由于其具有弱碱性,水溶液的pH在10.5左右,可通过添加HCl或者NaOH制备不同pH的缓冲液,根据缓冲理论,Tris缓冲液的有效范围通常是pH7.0-9.2之间。此外,Tris还可以制备表面活性剂、硫化促进剂和一些药物(磷霉素等)的中间物,在化妆品、医药、涂料以及合成中均有应用。应用于体内时,Tris作为一种不含钠的氨基缓冲碱,在体液中与H2CO3结合,生成碳酸氢盐。因此它能缓冲酸,而且能降低CO2张力,有纠正急性呼吸性酸中毒和代谢性酸中毒双重效果,其作用较碳酸氢钠快而强。①Moderna**核酸疫苗(mRNA-1273,pH7.0-8.0)将SM-102、DSPC、胆固醇以及PEG脂质与溶于pH5.0乙酸盐缓冲液中的mRNA以2.5:1(脂质:mRNA)的比例混合,再将混合物用Tris-HCl(pH=7.5)中和,加入蔗糖作为冷冻保护剂,***将制备得到的溶液进行无菌过滤,-70℃下冷冻保存准备进一步使用。四川高纯TRIS实验室采购