病理实验外包，南京英瀚斯可开展冰冻切片免疫荧光染色1. 冰冻切片室温晾干15 min，可用含10%正常山羊血清的PBS室温封闭切片1小时（此步可不洗）。2. 滴加适当比例稀释的一抗或一抗工作液（抗体的量视组织大小而定，原则是可以均匀覆盖组织面，且保证整个过程中不会使组织干涸）。3. 将切片放在加了PBS的免疫组化湿盒，室温孵育2小时或4℃过夜。4. 第二天先将湿盒放到37℃回温1 h，然后吸取片上的一抗进行回收，将切片插入到小染缸PBS冲洗。5. 滴加用PBS稀释好的二抗（避光）置于分子杂交箱中37℃孵育1小时。回收二抗，切片置于染缸内，PBS洗5 min×3次。6. 滴加DAPI工作液染核，室温10~20 min（工作浓度0.1%染色15 min）。7. 回收DAPI，滴加5-10 μl 抗荧光衰减封片剂或中性树胶，用处理干净的盖玻片封片，即可到荧光显微镜或者共聚焦显微镜下观察拍照。8. 做好的片放在切片盒内，置于4℃冰箱，可保存一周左右。病理实验外包，医学实验外包，动物实验外包，就找南京英瀚斯。重庆专业的病理实验外包
病理实验外包，病理染色常见染色介绍TTC染色：TTC染色是TTC和活细胞线粒体内的琥珀酸脱氢酶反应,生成红色的甲月赞，用来表示细胞的活力。配制多为2％,染色要避光，37度条件下，它是评价脑缺血损伤常用的指标。TTC（2,3,5—氯化三苯基四氮唑）是脂溶性光敏感复合物,1894年初次合成用来检测种子的生存能力,1958年开始用来染色检测哺乳动物组织的缺血梗塞。它是呼吸链中吡啶—核苷结构酶系统的质子受体,与正常组织中的脱氢酶反应而呈红色,而缺血组织内脱氢酶活性下降,不能反应,故不会产生变化呈苍白。TTC可以被活细胞中的具有还原活性的酶(好像主要是琥珀酸脱氢酶)还原生成粉红色的还原产物，所以活组织部分呈现粉红色，而死亡的细胞的还原酶的活力已经消失，因此TTC不能被还原，所以死亡的组织呈现白色。南京英瀚斯，专业的病理染色实验服务平台。重庆专业的病理实验外包病理实验外包研究整体解决方案_英瀚斯生物。
病理实验外包，病理染色HE染色常见问题：Q3：细胞核染色过浅，颜色暗淡答：切片在苏木素染液中停留过短，或苏木素过度氧化失效，或分化时间太长。对策：重新染色。将组织切片放入0.01%氢氧化钠、0.5%氨水、饱和的碳酸氢钠溶液、乙醇溶液，每个3-5min即可，接着重新染色。可以适当地组织的嗜碱性以增强核染色，如Zenker液固定的切片可放入5%碳酸氢钠溶液中3h，自来水冲洗5-10min染色，或Bouin液固定的切片可放入5%碳酸氢钠溶液中1h，自来水冲洗10min染色。Q4：细胞核染色过深，胞浆着蓝色答：切片在苏木素染液中停留过长；或切片太厚；或分化时间太短。这种情况首先镜下看看切片厚度(比较好厚度1-2层细胞核)，要么重新染色，要么重新制片。南京英瀚斯，专业的病理染色实验服务平台。
病理实验外包，病理染色结缔组织染色法1.Mallory三色染色法蓝色：胶原和网状纤维淡蓝色：软骨、粘液、淀粉样变物质红色：神经胶原纤维、肌纤维、酸性颗粒橘红色：髓鞘、红细胞2.Masson三色染色法绿色：胶原纤维红色：肌纤维橘红色：红细胞3.显示胶原、网状和弹性纤维的三联染色法红色：胶原纤维黑色：网状纤维绿色：弹性纤维淡黄色：肌肉、红细胞南京英瀚斯，专业的病理染色实验服务平台。英瀚斯生物专业实验外包细胞实验及后续检测一站式完成。病理实验外包检测，公司自有实验室，欢迎考察。
病理实验外包，病理染色组织处理的要求：恰当的组织处理是做好免疫组化染色的先决条件，也是决定染色成败的内部因素，在组织细胞材料准备的过程中，不仅要求保持组织细胞形态完整，更要保持组织细胞的抗原性不受损或弥漫，防止组织自溶。如果出现自溶坏死的组织，抗原已经丢失，即使用很灵敏的检测抗体和高超的技术，也很难检出所需的抗原，反而往往由于组织的坏死或制片时的刀痕挤压，在上述区域易出现假阳性结果。组织及时取材和固定组织标本及时的取材和固定是做好免疫组化染色的关键第一步，是有效防止组织自溶坏死，抗原丢失的开始，离体组织应尽快的进行取材，比较好2h内，取材时所用的刀应锐利，要一刀下去切开组织，不可反复切拉组织，造成组织的挤压，组织块大小要适中，一般在2.5cm×2.5cm×0.2cm，切记取材时组织块宁可面积大，千万不能厚的原则，(也就是说组织块的面积可以大到3cm×5cm，但组织块的厚度千万不能超过0.2cm，否则将不利于组织的均匀固定)。固定液快速渗透到组织内部使组织蛋白能在一定时间内迅速凝固。从而完好的保存抗原和组织细胞形态。南京英瀚斯，专业的病理实验外包服务平台。海南专门做病理实验外包
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病理实验外包，病理染色方法分为石蜡切片法和冰冻切片两种，详细的实验方法如下：石蜡切片法实验方法及原理：石蜡切片是比较基本的切片技术，冰冻切片和超薄切片等都是在石蜡切片基础上发展起来的。苏木素与伊红对比染色法（简称H.E.对染法）是组织切片比较常用的染色方法。这种方法适用范围普遍，对组织细胞的各种成分都可着色，便于普遍观察组织构造，而且适用于各种固定液固定的材料，染色后不易褪色可长期保存。冰冻切片试验方法及原理：冰冻切片是指将组织在冷冻状态下直接用切片机切片。它实际上是以水为包埋剂，将组织进行冰冻至坚硬后切片的。在冰冻切片前组织不经过任何化学药品处理或加热过程，明显缩短了制片时间。同时，由于此法不需要经过脱水、透明和浸蜡等步骤，因而较适合于脂肪、神经组织和一些组织化学的制片，并作为快速切片的方法应用在临床诊断。重庆专业的病理实验外包
