一提起蛋白质浓缩、更换缓冲液,我们都会想起超滤。这是一种我们都很熟悉的膜分离技术。它可用来分离溶液中极小的颗粒和溶解的分子。这种方法的较大特点是操作简便,只需要浓缩离心管和离心机,即可圆满完成我们的任务。与层析、透析等方法相比,超滤对被处理的分子更加温和。它不需要有机萃取,就不会导致蛋白变性。这种方法非常高效,可同时浓缩和纯化分子。操作可在低温(比如冷库)下进行。另外,快速、便宜,也是许多人青睐它的原因。浓缩离心管的操作很简单。选择适当的浓缩离心管,加入待处理的样本,按照离心管的指示进行离心操作,之后回收截留的样本。在离心力的作用下,溶液中的小分子溶质和溶剂透过超滤膜,被收集在滤过液收集瓶中,而大分子溶质被超滤膜截留在浓缩离心管中。这种分离的主要依据是分子大小,但分子形状和电荷等其他因素也会有影响。超滤离心管也可用于海洋科学研究中,以检测水样中的微量元素和化合物。广州小型超滤离心管公司
下面是处理和重复使用超滤管的步骤。将超滤管中的水倒出来,用Milliq水轻轻冲洗几次。[如管底有可见蛋白质沉淀,可先加水,再用设备头吹气,注意不要碰触膜,吹气至沉淀悬浮,再倒出,不要冲自来水。)然后加入0.2 mNaOH溶液,室温放置20分钟,平衡超滤。在此期间定量管。离心10分钟。倒出剩余的MaOH溶液,将管芯浸入Milliq烧杯(1L或2L)中。放器数小时,然后用新水替换,放置数小时,不断稀释Na0E浓度。50ml管道和盖子用自来水冲洗,内壁用Milliq水冲洗。取出浸入水中的芯,并将其加入几乎满毫升的水中。在50毫升试管中注入毫升水。慢慢地将芯放入50毫升离心管中,排出一些水。然后盖上盖子,4度存放,直到下次使用。一般来说,根据上述步骤和注意事项,每根渠道在三到四年内不会受损。苏州100K超滤离心管价钱多少超滤离心管还可用于制备高纯度的酶、蛋白质等生物制品,以应用于不同领域的实验室操作。
超滤离心管是否可以重复使用:离心超滤管通常不能消毒再次性使用。由于单管价格并不便宜,不少人尝试重复使用----经验是用蒸馏水清洗膜表面多次,离心一次到两次,那种可以反向离心的小管子可以加蒸馏水浸泡后反向多离心一次,会好些。可重复用于同一样品,不用时可用蒸馏水浸泡,但是要防止细菌污染。不同样品就不要混用了。有人说泡在20%酒精、1N的NaOH(氢氧化钠)中,防止长菌,而且防干,只要超滤膜侵了水,就不可以再让它干,但也有人说会破坏膜结构。反正厂家一般不支持重复用。多次重复使用会堵塞滤膜上的孔径,甚至出现漏液现象,影响实验结果。
超滤离心管使用的是再生纤维素膜,这种材质是蛋白吸附较低的超滤膜。但是对于一些疏水性蛋白或非极性蛋白,它们和膜的非特异吸附可能会增强,对于这种情况,可以尝试在实验前对超滤管进行封闭处理,也可以尝试换成Amicon Ultra0.5或2来进行实验,通过减小膜面积来降低非特异性吸附。超滤膜含有微量甘油。如果此成分干扰分析,可用缓冲液或Milli-Q水预清洗。如果干扰仍存在,用0.1N NaOH清洗,然后用缓冲液或Milli-Q水再次清洗后甩干。超滤离心管是一种经济、有效且环保的分离技术,具有普遍应用前景。
玻璃离心管玻璃离心管是由玻璃制成的,不同厂家可能使用的玻璃成分不同,所以强度上可能会略有差异。我们的普通玻璃试管可以承受的相对离心力(RCF) 通常小于3000g ,而硼硅玻璃管一般可以承受超过10000g 以上的相对离心力。但由于玻璃离心管质量易碎,所以玻璃管一般不用于高速离心机,用得也不多。由于玻璃本身的特性,它具有良好的化学稳定性,能与酸、碱和有机溶剂和平共存。玻璃管外形稳定,能承受一定程度的挤压,但不能抵抗碰撞,在 高速离心时容易破碎,虽然能抵抗高温,能抵抗热冲击,但在温度突然剧烈变化的环境中也很容易断裂。超滤离心管还可以用于提取DNA、RNA等核酸分子,并在基因工程和生物技术中发挥重要作用。苏州100K超滤离心管价钱多少
超滤离心管可以用于分离各种生物样品,如血浆、细胞培养液、酶溶液等。广州小型超滤离心管公司
蛋白质浓缩和替代缓冲液常用的超滤管,微孔(mwco10kd)常用的micon-ultra-15超滤管。根据靶蛋白的分子量、浓缩前的体积和浓缩的靶体积,还可提供不同尺寸和尺寸的其他类型的mwco超滤管。它可以重复使用。1。选择合适的超滤管主要考虑分子量和浓度。通常靶蛋白的分子量不应大于靶蛋白分子量的1/3。例如,当靶蛋白的分子量为35kDa时,可以选择靶蛋白分子量为10kDa的超滤管。如果靶蛋白的分子量约为10kd,则可使用分子量为3kd的超滤管。2。新购买的超滤是干燥的。使用前加入Milliq水。水的体积完全覆盖在膜上,冰浴或冰箱被预先冷却几分钟。倒出水后,可以加入蛋白质溶液。蛋白质添加量不超过管顶白线。超滤管在加入蛋白质溶液前需要在冰上预先冷却。三。平衡。广州小型超滤离心管公司