重庆离心管咨询

离心管就是一个简单的可以承受高转速压力的管子，比如离一些样品，分离出上清沉淀。 蛋白浓缩和换Buffer通常使用的超滤管，目前较常用的就是Millipore的。目的蛋白的分子量与浓缩前体积、浓缩目标体积而定。可重复使用，使用一次就扔掉太浪费。以下是个人总结的使用方法和注意事项。离心超滤管会有一个类似于内管和外管的两个部分，内管中是带有一定分子量的膜，当高速离心时，分子量比它小的就漏到下面的管子(即外管)中了，分子量比它大的就截留在上面(即内管中)，就是超滤的原理。超滤离心管的选择主要看你要截留那部分物质，就选择比较小分子量小的，如果你要截留26KD的，你要的超滤管就要比26小。但两者也要有一定的差距，比如，选择20-25KD之间的就不合适，因为26的也可能会出去(这是由制造工艺决定的)。所以选择20KD以下的超滤管比较合适。超滤离心管的应用领域普遍，包括生物医学研究、制药工业、食品科学等。重庆离心管咨询

超滤离心管使用方法和注意事项：1、选择合适的超滤离心管，主要考虑MWCO和浓缩体积，通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量为35kDa，就可以选择10kDa截留分子量的超滤离心管。若目的蛋白分子量为10kD左右，则可以用截留分子量3kD的超滤离心管。2、新买来的超滤是干燥的，使用前加入MilliQ水，水量完全过膜，冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超过管顶的白线为准。操作要轻，加入蛋白液前，超滤离心管需要插在冰上预冷。3、质量和重心二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快，否则直接损坏超滤膜。开始离心超滤（离心机预冷至4度）。不同离心机的转速rpm换算成g之后，有所不同。离心机的加速度调至低档，减小对膜的压力。注意，一定要等离心机达到目的转速之后，方可离开离心机，否则离心机出问题时，无法*时间处理，后果不可预测！山东再生纤维素离心管厂家超滤离心管可以用于分离和纯化各种大分子化合物，如蛋白质、核酸、多糖等。

超滤离心管是否可以重复使用：离心超滤管通常不能消毒再次性使用。由于单管价格并不便宜，不少人尝试重复使用----经验是用蒸馏水清洗膜表面多次，离心一次到两次，那种可以反向离心的小管子可以加蒸馏水浸泡后反向多离心一次，会好些。可重复用于同一样品，不用时可用蒸馏水浸泡，但是要防止细菌污染。不同样品就不要混用了。有人说泡在20%酒精、1N的NaOH（氢氧化钠）中，防止长菌，而且防干，只要超滤膜侵了水，就不可以再让它干，但也有人说会破坏膜结构。反正厂家一般不支持重复用。多次重复使用会堵塞滤膜上的孔径，甚至出现漏液现象，影响实验结果。

蛋白质浓缩和替代缓冲液常用的超滤管，微孔(mwco10kd)常用的micon-ultra-15超滤管。根据靶蛋白的分子量、浓缩前的体积和浓缩的靶体积，还可提供不同尺寸和尺寸的其他类型的mwco超滤管。它可以重复使用。1。选择合适的超滤管主要考虑分子量和浓度。通常靶蛋白的分子量不应大于靶蛋白分子量的1/3。例如，当靶蛋白的分子量为35kDa时，可以选择靶蛋白分子量为10kDa的超滤管。如果靶蛋白的分子量约为10kd，则可使用分子量为3kd的超滤管。2。新购买的超滤是干燥的。使用前加入Milliq水。水的体积完全覆盖在膜上，冰浴或冰箱被预先冷却几分钟。倒出水后，可以加入蛋白质溶液。蛋白质添加量不超过管顶白线。超滤管在加入蛋白质溶液前需要在冰上预先冷却。三。平衡。超滤离心管是一个快速、便捷的方法来从混合物中分离和提取大分子，如蛋白质、核酸等。

注意:超滤离心管中的滤膜一旦润湿 后应避免变干。如果在预清洗后不是立即使用，则让液体保留在滤膜上，直到使用。6.使用方法：1）.将超滤内管插入所提供的一个微量离心管中。2）.向超滤管内管中加入不超过500 μL的样本,并盖上盖子。3）.将盖好盖子的超滤管放入离心转子中，让盖子的连接带朝着转子的中间;用一个类似的超滤管平衡。4）.以14,000 x g离心约10-30分钟,具体时间取决于所使用超滤管的NMWL。5）.离心结束后将整个超滤管从离心机中取出,取出内管。6）.为了回收浓缩后的溶质,将内管倒过来插在-个干净的微量离心管中。放在离心机中,让打开的盖子朝着转子的中间;用一个类似的超滤管进行平衡。以1 ,000 x g离心2分钟,使浓缩后的样本从超滤内管转移到收集管中。超滤液可以保存在收集管中。超滤离心管是一种用于分离和纯化生物大分子的工具。3K超滤离心管厂商

超滤离心管可以用于检测样品中的蛋白质、碳水化合物等有机分子。重庆离心管咨询

超滤离心管关于回收率的疑问？一般对浓度大于0.1mg/ml的溶质进行回收，回收率在90%以上。通常，样品损失是由于滤膜表面和料管表面的非特异性吸附造成的。为了获得较高的回收率，所选滤膜的截留率约为目标蛋白的1/3。超滤膜是一种非对称膜，其孔径呈正态分布。在高压离心下也可能发生泄漏，在这种情况下蛋白质可能会发生变形。因此，截留孔径越小，流速越慢，但回收率会更高。浓缩过程中有蛋白质沉淀，如何处理？如果蛋白质浓缩过快或过多，都可能造成蛋白质沉淀，浓缩后的蛋白质之后浓度不宜过高；对于对浓缩速度敏感、易沉淀的蛋白质，建议改进方法如下：1）降低离心速度，2）使用截留分子量较大的超滤膜3) 吹吸浓缩管，然后离心。重庆离心管咨询

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