选择合适的超滤管。通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量为35kDa,就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD左右,则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书,注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同。新买来的超滤是干燥的,使用前加入超纯水,水量完全过膜,冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超过管顶的白线为准。操作要轻,加入蛋白液前,超滤管需要插在冰上预冷。平衡。质量和重心二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快,否则直接损坏超滤膜。开始离心超滤(离心机预冷至4度)。超滤离心管有不同孔径可供选择,以适应不同尺寸和类型的分子筛选需求。成都浓缩超滤离心管供应商
离心技术主要用于各种生物样品的分离和制备,生物样品悬浮液盛放在离心管中在高速旋转下,由于巨大的离心力作用,使悬浮的微小颗粒(如细胞器、生物大分子的沉淀等) 以一定的速度沉降,从而与溶液得以分离。而离心管就是离心试验中必备的实验耗材之一。含有带电的或者疏水结构域的蛋白质更易于不可逆结合到不同表面。对超滤离心管表面做钝化预处理可降低蛋白质在膜表面的吸附性损失,大多数情况下,在浓缩稀蛋白溶液之前预处理柱子可以提高回收率,因为溶液可填满膜和表面暴露的空白蛋白吸附位点。钝化的方法是预先用较高容积的钝化溶液预浸泡柱子1小时以上,蒸馏水彻底冲洗柱子,再用蒸馏水离心一次以彻底除去可能残留在膜上的钝化溶液。注意钝化处理后别让膜干了。如果要留待以后使用,需要加无菌蒸馏水保持膜湿润。台州离心管选择超滤离心管的选择需要根据被过滤溶液或混合物的性质和所需的纯度和体积来确定。
根据其大小,又分为1.5ml、2ml、5ml、10ml、15ml、50ml等,国产的离心管一般就是这几个规格,用的较多的也就是10ml和50ml的。如果您的离心机是配30ml或者其他规格的离心管时,就要考虑进口的了。另外,离心管还有圆底和尖底,以及螺旋盖和插盖之分。螺旋盖的离心管带有较精细的刻度,插盖的只有一个总体的容量标示。实验室常用的离心管有塑料的和玻璃的,一般塑料的用的较多,因为玻璃的离心管不能用在高速或者超速离心机上。塑料的离心管又有PP(聚丙烯)、PC(聚碳酸酯),PE(聚乙烯)等材质。PP的管子性能相对来说比较好。塑料的离心管透明或者半透明,可以直观的看到样品离心情况,但是比较容易变形,抗有机溶剂的腐蚀性较差,所以使用寿命较短。因此,实验室一般会经常购买离心管。下面就对各种材质分别介绍一下。根据其材质的不同总体可以分为塑料和玻璃的,塑料的离心管用的较多,又可以分为PP、PC、PS等,根据不同需要,生产厂家会选择不同的塑料材料来进行制作。
一般来说,超滤的回收率可达90%以上。样本损失大多是由于滤膜表面和容器表面的非特异性吸附引起的。因此,选择口碑好、优良品质的浓缩离心管非常重要。作为过滤方面的老牌公司,提供了多种浓缩离心管,可对50 μl到60 ml的样本进行高效的浓缩和脱盐。它配备了(改良的聚醚砜)膜,确保低的非特异性吸附和高的回收率。当然,这个的前提是你选对了浓缩离心管。浓缩离心管,适合处理不同体积的样本。你可以根据你的样本量来选择。不过,如果样本浓度低体积大,可以选择较小容积的浓缩离心管多次重复加样离心。一旦样本体积确定,下一步就是选择适当的MWCO。对于蛋白质而言,建议所选滤膜的MWCO是欲截留分子大小的1/6-1/3。通常,截留孔径越小,流速越慢,但截留比例更大。使用超滤离心管时应注意避免与酸、碱等化学物质接触,以免损坏其结构和性能。
可以通过多个超滤管同时超滤来降低浓度,而后者通过改变不同的缓冲液直到没有蛋白质沉淀。用来浓缩蛋白质的。如果要更换缓冲液,当总蛋白溶液浓缩到1毫升左右时,轻轻添加一个新的缓冲液〈用0.22um超滤膜超滤后〉,然后连续浓缩到1毫升左右。浓缩液的之后体积取决于所需的蛋白质浓度,通常不超过500 ul,但也要浓缩到200 ul以下。根据每次至少10次的体积浓度计算,1000次以上的3次基本可以达到更换缓冲器的目的。提取之后浓缩蛋白的操作在冰上进行。黄色设备头(200ul)用于提取之后的蛋白质浓缩物。设备头沿设备头边缘轻轻插入。将蛋白溶液轻轻吹匀。注意不要触摸超滤膜。吸取浓缩液,一次较多吸200 ul,直至耗尽。之后留在管底的浓缩液不需要吸收,否则太困难,可能损坏超滤膜。之后,在无超滤膜的超滤管中加入milliq水,以防止超滤膜干燥。超滤离心管还可用于药代动力学和药物分析中,以确定药物代谢和药效学参数。舟山超滤离心管能干什么
超滤离心管可以去除混合物中的低分子量化合物,提高目标化合物的纯度。成都浓缩超滤离心管供应商
注意:超滤离心管中的滤膜一旦润湿 后应避免变干。如果在预清洗后不是立即使用,则让液体保留在滤膜上,直到使用。6.使用方法:1).将超滤内管插入所提供的一个微量离心管中。2).向超滤管内管中加入不超过500 μL的样本,并盖上盖子。3).将盖好盖子的超滤管放入离心转子中,让盖子的连接带朝着转子的中间;用一个类似的超滤管平衡。4).以14,000 x g离心约10-30分钟,具体时间取决于所使用超滤管的NMWL。5).离心结束后将整个超滤管从离心机中取出,取出内管。6).为了回收浓缩后的溶质,将内管倒过来插在-个干净的微量离心管中。放在离心机中,让打开的盖子朝着转子的中间;用一个类似的超滤管进行平衡。以1 ,000 x g离心2分钟,使浓缩后的样本从超滤内管转移到收集管中。超滤液可以保存在收集管中。成都浓缩超滤离心管供应商
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