浙江再生纤维素离心管生产厂

超滤作为一种膜分离技术，普遍应用于生物样品的浓缩、脱盐和缓冲液置换，其原理是溶液在力的作用下，通过超滤膜孔径的筛滤，大分子量的颗粒被截留下来，而水、溶剂和低分子量溶质则允许透过膜，从而达到浓缩、脱盐和缓冲液置换的目的，这种方法较大的特点是操作简便、快速、高效，可同时浓缩和纯化分子。如何使用超滤心离心管1. 使用角转子加到超滤装置上，较大样本量为15 毫升（Anavo Ultra-15）。2. 将带盖过滤装置放入离心机转子内; 用一个类似的装置来平衡。3. 使用定角转子时，将薄膜面板朝上定位，较大旋转 5000 xg，旋转 30 分钟。4. 为了回收浓缩的溶质，在过滤装置的底部插入一个移液管，通过左右扫动的方式将样品抽离，以保证总回收率。超滤液可贮存在离心管中。说明：为达到较佳回收率，离心后应立即取出浓缩样品。超滤离心管可用于从血浆或尿液中提取蛋白质和核酸等大分子化合物。浙江再生纤维素离心管生产厂

当浓缩到剩下1ml时，取50ul缓冲溶液，加入10ul流穿，看有没变蓝色，以此判断超滤管是否漏掉蛋白。如果管漏了，将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。要精确判断是否漏管，用5mgml的BSA离心10min，再取流穿，跑蛋白胶或Bradford粗测，继续加入剩下的蛋白液浓缩（在冰上操作，防止蛋白受热），直到所有浓缩液都加完为止。离心过程中注意是否发生蛋白沉淀，导致堵管。若发生沉淀，要确定沉淀的具体原因，是蛋白浓度过高还是Buffer不合适；前者可用多根超滤管同时超滤，降低浓度的办法解决，后者的方法是换不同的缓冲溶液，直到蛋白不发生沉淀为止。温州超滤离心管咨询离心机转速会影响到超滤效果，因此需要根据实验要求调整相应的转速。

超滤离心管使用的是再生纤维素膜，这种材质是蛋白吸附较低的超滤膜。但是对于一些疏水性蛋白或非极性蛋白，它们和膜的非特异吸附可能会增强，对于这种情况，可以尝试在实验前对超滤管进行封闭处理，也可以尝试换成Amicon Ultra0.5或2来进行实验，通过减小膜面积来降低非特异性吸附。超滤膜含有微量甘油。如果此成分干扰分析，可用缓冲液或Milli-Q水预清洗。如果干扰仍存在，用0.1N NaOH清洗，然后用缓冲液或Milli-Q水再次清洗后甩干。

超滤离心管的分子量选择：按照样品量和目标分子量选择适当的超滤离心管，为了得到较高的收率，所选滤膜的截留分子量MWCO建议选择所需截留分子大小的1/3左右，不超过目标分子量的一半。因为超滤膜上孔径是平均孔径，膜上的孔并非均匀，离心高压下也可能渗漏，因此截留孔径越小，流速越慢但截留比例更大。如果样本浓度低体积大，可选择较小容积的超滤管多次重复加样离心。如果同时需要脱盐和去除可溶小分子杂质，可将待浓缩样品稀释到超滤管较大容积再离心，重复2次可除去99%盐。避免过长时间或者过速离心，虽然优良品质的产品都有防死端设计，可避免过度离心造成膜表面干而造成不可逆吸附。避免过度浓缩，体积越小，越容易因表面吸附而损失得率。离心后用Tips轻轻吹吸几次滤膜截留的溶液，必要时补加一定体积的缓冲液冲洗膜表面，有助于减少膜表面吸附，能提高回收率。尽量避免Tips接触膜表面。使用超滤离心管时应注意避免振动或震动造成样品混乱并影响分离效果。

超滤离心管，备有四种材质的超滤膜：聚醚砜、三醋酸纤维素、再生纤维素和Hydrosart，可根据不同要求灵活选用；两种回收浓缩液的方法：既可用吸管直接吸取并回收，又可将离心管放入离心机反甩，将浓缩液甩入回收帽中，加盖保存。这两种方法都可使浓缩液达到近乎完全回收；截留分子量普遍，配有3K、5K、10k、30K、50K、100K、300K、1000K、0.2μl的聚醚砜膜；较新推出ZL产品Hydrosart膜2K型，具有极低的蛋白吸附特性，高流速、高通量，是免疫球蛋白浓缩和脱盐的理想用膜。超滤离心管可以通过手动或自动方式进行操作，以适应不同的实验室流程要求。山东3K超滤离心管生产商

超滤离心管可以用于分离各种生物样品，如血浆、细胞培养液、酶溶液等。浙江再生纤维素离心管生产厂

超滤离心管的分子量选择：按照样品量和目标分子量选择适当的超滤离心管，为了得到较高的收率，所选滤膜的截留分子量MWCO建议选择所需截留分子大小的1/3左右，不超过目标分子量的一半。因为超滤膜上孔径是平均孔径，膜上的孔并非均匀，离心高压下也可能渗漏，因此截留孔径越小，流速越慢但截留比例更大。如果样本浓度低体积大，可选择较小容积的超滤管多次重复加样离心。如果同时需要脱盐和去除可溶小分子杂质，可将待浓缩样品稀释到超滤管较大容积再离心，重复2次可除去99%盐。避免过长时间或者过速离心，虽然优良品质的产品都有防死端设计，可避免过度离心造成膜表面干而造成不可逆吸附。浙江再生纤维素离心管生产厂

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