胎牛血清有必要做热灭活吗?实验证明,经过正确处理的热灭活胎牛血清,对于大多数的细胞而言都是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或完全没有任何作用,甚至可能因为高温处理影响了血清的质量,从而造成细胞生长速率的降低。经过热处理的血清,沉淀物的形成会明显的增多,这些沉淀物在倒置显微镜下观察,像是“小黑点”,常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使此类沉淀物增加得更多,这常常会使研究者误认为是微生物的分裂扩增。因此我们建议客户,若非必须,可以不需要做热处理这一步。如此一来,不但节省客户宝贵的时间,更确保血清的质量。胎牛血清在融化过程中,瓶子里冰块的底部你会看见亮亮的蛋白丝就是血清中大量的蛋白在快速融化。汕头标准胎牛血清哪里有卖
胎牛血清的生产工艺:透析胎牛血清,顾名思义,需经过透析。它是在4°C下用特定的透析膜对血清在0.15MNaCl中透析。由于该透析膜只允许10kDa以下的小分子穿过,在渗透压的作用下,这些小分子便从血清中渗析到透析膜外的NaCl溶液中。10kDa以下的小分子有化学小分子、核苷酸、某些盐、低分子量蛋白质、氨基酸、细胞因子、葡萄糖、残留Antibiotic和其他外源分子。那么透析的效果如何?以及透析到何时呢?由于不可能监测全部小分子,因此常选用葡萄糖为体现。血清中葡萄糖<5mg/dL,即可以停止透析了。透析过程中,除监测葡萄糖浓度外(可采用葡萄糖氧化酶方法测定),还需仔细监测pH值和渗透压。汕头标准胎牛血清哪里有卖胎牛血清中含有大量对细胞生长必需的生长因子。
如何区别真假胎牛血清:外观,拿到血清,较先接触的是血清外观,对于缺少细胞培养经验的人来说,外观的判断尤为重要,颜色根据血红蛋白含量的不同,胎牛血清可表现出黄色或红色,我国的细胞培养用血清标准是不高于20mg/dl,实际上,血红蛋白含量的高低对血清并无直接影响,这个指标的意义在于能体现出采的血过程的严谨规范程度,良好的操作能降低血清的溶血。国产血清的点很分散,大多是由屠户采的血后马上离心收集,所以很少会有溶血,表现出明亮的蜡黄色,当然,国产血清也很少有标准意义上的胎牛血清。进口胎牛血清或多或少总有点溶血,因为真正的胎牛血清凝血功能差,红细胞容易破裂。总的来说,国产的血清呈现出蜡黄。进口的血清,质量较好的呈现出谈黄、微红色,差点的呈现出橘红色或鲜红色。当然,热灭活胎牛血清或保存不当的血清,由于血红蛋白的破坏氧化,会呈现出暗红,甚至咖啡色。
为什么要热灭活胎牛血清?胎牛血清加热可以灭活补体系统。开启的补体参与溶解细胞事件,刺激平滑肌收缩,细胞和血小板释放组胺,开启淋巴细胞和巨噬细胞。在免疫学研究,培养ES细胞,昆虫细胞和平滑肌细胞时,推荐使用热灭活胎牛血清。为什么储存在冰箱中的胎牛血清会出现少量沉淀?胎牛血清没有预老化,储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。这应该不会影响血清的质量。推荐在-20℃储存胎牛血清,避免反复冻融。胎牛血清是细胞培养中常用的天然培养基。
胎牛血清与其它牛血清有何区别?胎牛血清(FoetalBovineSerum,简称FBS):胎牛血清是指怀孕3-8个月的母牛被屠宰后,发育未完全的胎牛心脏密闭穿刺采的血后,通过一系列工艺处理获得。此时胎牛血中含有特殊的生长发育因子,一旦胚胎发育完全这些因子会自动消失。新生牛血清(NewbornCalfSerum,简称NBCS):出生14小时内未进食的新生牛,通常采用颈动脉采集血液分离得到的血清。小牛血清(CalfSerum):出生后3天至6月龄小牛动脉采的血分离血清。成年牛血清(AdultBovineSerum,简称ABS)指的是屠宰时收集全血后分离得到血清。透析胎牛血清是在胎牛血清的基础上进行加工的。汕头标准胎牛血清哪里有卖
胎牛血清进行动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能。汕头标准胎牛血清哪里有卖
胎牛血清要求:1、性状、外观:浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。2、蛋白质含量:3.5%~5.0%(w/v)。3、血红蛋白含量:≤0.02%(w/v)。4、无菌检验:阴性。5、支原体检验:阴性。6、细菌内的毒性:≤5(EU/ml)。7、牛腹泻病毒:阴性。8、大肠杆菌噬菌体:阴性。9、支持细胞增殖:(Sp2/0-Ag14)生长曲线(接种浓度)较大增殖浓度≥2.5×106个/ml,细胞倍增时间:≤15h,克隆率:≥85%。血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、无机物等。汕头标准胎牛血清哪里有卖
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胎牛血清存在一些问题,如批次间的变异性、潜在的病原体污染和免疫原性等。批次间的变异性是指不同批次的胎牛血清在成分和质量上存在差异。这可能会对实验结果的可重复性和可比性造成影响。为了解决这个问题,一些研究人员提出了对胎牛血清进行特殊处理的建议。例如,可以通过超速离心、过滤、冻干等方法来去除一些不需要的成分,以提高胎牛血清的一致性和稳定性。另一个问题是潜在的病原体污染。胎牛血清是从动物体内提取的,因此存在一定的病原体污染风险。这些病原体可能包括病毒、细菌、菌等。虽然现代的血清处理方法可以有效地去除或灭活大部分病原体,但仍然存在一定的风险。为了降低这个风险,一些研究人员建议使用经过特殊处理的胎牛血清...