扫描电镜观察生物试样。因电子照射而发生试样的损伤和污染程度很小。同其他方式的电子显微镜比较,因为观察时所用的电子探针电流小(一般约为10- 10~10- 12A)电子探针的束斑尺寸小(通常是5 nm到几十纳米),电子探针的能量也比较小(加速电压可以小到2 kV),而且不是固定一点照射试样,而是以光栅状扫描方式照射试样,因此,由于电子照射而发生试样的损伤和污染程度很小,这一点对观察一些生物试样特别重要。扫描式电子显微镜(SEM)中的电子束尽量聚焦在样本的一小块地方,然后一行一行地扫描样本。入射的电子导致样本表面散发出电子,显微镜观察的是这些每个点散射出来的电子。由于这样的显微镜中电子不必透射样本,因此其电子加速的电压不必非常高。场发射扫描电子显微镜是一种比较简单的电子显微镜,它观察样本上因强电场导致的场发射所散发出来的电子。英瀚斯提供场发射扫描电子显微镜 ,配备高亮度肖特基场发射灯丝,可以获得高分辨率和低噪声成像效果。江西靠谱的扫描电镜公司
扫描电镜以观察样品的表面形态为主。扫描电镜样品的制备,必须满足以下要求: ①保持完好的组织和细胞形态; ②充分暴露欲观察的部位; ③良好的导电性和较高的二次电子产额; ④保持充分干燥的状态。 某些含水量低且不易变形的生物材料,可以不经固定和干燥而在较低加速电压下直接观察,如动物毛发、昆虫、植物种子、花粉等,但图像质量差,而且观察和拍摄照片时须尽可能迅速。对大多数的生物材料,则应首先采用化学或物理方法固定、脱水和干燥,然后喷镀碳与金属以提高材料的导电性和二次电子产额。扫描电镜生物样品制备技术 常规扫描电镜对样品要求:必须是干燥的,不含水分或挥发性物质;具有一定机械强度,能耐受电子束轰击;具有导电性,被激发时能够产生足够的二次电子。生物材料特点:含水分多,质地柔软,机械强度小;组成元素的原子序数低,导电性差,激发后二次电子的产额较少。制样的任务:通过一系列处理,既要尽量完美地保存材料的固有形态,又要改良其物理性能,使其适合在电镜下观察成像 以下即为步骤方法、所需注意项目、以及操作中的使用技巧。湖南整体扫描电镜推荐英瀚斯专业承接扫描电镜检测。
扫描电镜超薄切片实际上是样品的二维切片,不能表达细胞的三维结构,而且在观察切片后所拍摄的显微照片时,容易造成错误的印象,用扫描电子显微镜( SEM )能直接观察标本表面的三维空间结构,真实地反映各种细胞表面和断裂面的形态特征,其照明源与透射电镜基本相同,由电子器经聚光镜汇聚成极细胞的电子探针,电子探针受扫描发生器控制,在样品表面逐点逐线的扫描,样品被电子轰击所产生的二次电子被收集、转换、放大,在电视荧光屏上同步扫描成像。二次电子的发射量与样品的表面形态有关,从而在荧光屏上出现表面起伏的样品立体图像。扫描电镜细胞样品的预处理包括取材、固定、脱水等。
扫描电子显微镜是一种多功能的仪器,具有很多优越的性能,是用途较为为普遍的一种仪器,它可以观察纳米材料。所谓纳米材料就是指组成材料的颗粒或微晶尺寸在0.1~100 nm范围内,在保持表面洁净的条件下加压成型而得到的固体材料。纳米材料具有许多与晶态、非晶态不同的、独特的物理化学性质。纳米材料有着广阔的发展前景,将成为未来材料研究的重点方向。扫描电子显微镜的一个重要特点就是具有很高的分辨率,现已普遍用于观察纳米材料。扫描电镜的工作原理是用一束极细的电子束扫描样品。
分辨能力是扫描电镜SEM较为重要的性能指标,目前,钨灯丝SEM二次电子像的分辨率为3nm~6nm,但是,这不是日常工作能实现的,只是验收指标,它与观察条件、图象的亮度、对比度、信噪比有关。 钨灯丝SEM在日常工作条件下,用普通试样照相,能作到6nm分辨率就相当不易了。在此分辨率下,可以在5万倍以上拍出清晰照片。通常情况下,用3万倍对普通样品照相(如陶瓷、矿物),能给出清晰二次电子照片,就属高水平。 当研究某个样品,确定它的形貌特征时,要根据工作要求、它的表面特征和实际的预观察结果,选择适宜的放大倍数照相,不是放大倍数越大越好。在几万倍放大倍数下,很多样品表面缺乏细微形貌,难以得到清晰照片。高放大倍数时,取样面积很小,*为试样表面的很小一部分,缺乏代表性。扫描电子显微镜除了观察表面形貌外,还能进行成分和元素的分析,以及通过电子通道花样进行结晶学分析,。宁夏专业的扫描电镜价格
通常所说的扫描电镜像指的就是二次电子像,它是研究样品表面形貌的有用的电子信号。江西靠谱的扫描电镜公司
扫描电镜操作基本步骤 1 、取材 扫描电镜下观察的样品尺寸要求比较宽松,一般1cm3左右样品都能适合大多数扫描电镜观察。 2 、固定 铺片培养的细胞取出浸入 PBS 中,漂洗细胞表面。然后将细胞铺片放入青霉素小瓶中,加 4 ℃ 预冷的 3% 戊二醛,在 4 ℃ 固定 2h 或过夜,吸出固定剂,用 PBS 浸洗 2 次,每次 10min ,再用 4 ℃ 预冷的 1% 锇酸。在 4 ℃ 固定 1h ,然后用 PBS 浸洗 2 次,每次 10min 。 3 、脱水 acetone / 醋酸异戊酯( 1 : 1 )脱水 10min ,接下来醋酸异戊酯脱水 30min ,或用系列梯度酒精( 30% 、 50% 、 70% 、 80% 、 90% 、 95% 、 100% )脱水,每种浓度酒精通过 2 次,每次 15min 。 江西靠谱的扫描电镜公司
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