血液中外泌体提取

众所周知外泌体是供体细胞分泌出来的胞外囊泡，被受体细胞吸收后起到调控受体细胞功能，这篇综述文章主要讨论了外泌体的生成、生化性质以及作为药物递送载体的潜力。外泌体在比较多生理病理上起着重要的作用，如免疫中抗原呈递、肉瘤的生长与迁移、组织损伤的修复等。不同细胞分泌的外泌体具有不同的组成成分和功能，可作为疾病诊断的生物标志物。外泌体具有脂质双层膜结构，能比较好的保护其包被的物质，且能靶向特定细胞或组织，因此是一种比较好靶向给药系统。外泌体实际应用之前，需要使用大型动物模型进行进一步研究和临床试验。血液中外泌体提取

细胞摄取诊疗性外泌体：从树突状细胞、成纤维细胞和间充质细胞中分离出的诊疗性外泌体可对靶细胞产生特定的作用，包括新抗原呈递、免疫调节和药物有效载荷传递。诊疗性外泌体对靶细胞的影响可能是通过不同的进入或相互作用机制来控制的。完整的外泌体的进入可能包括受体介导的内吞作用、网格蛋白包被小凹、脂筏、吞噬作用、小凹和大胞饮作用。外泌体内容物的进入或外泌体信号的诱导可能涉及配体受体诱导的细胞内信号或融合，从而将外泌体内容物沉积到细胞质中。乳液外泌体提取试剂盒价钱外泌体膜含有MHC-1/2蛋白，能绑定特异性的肽链。

研究外泌体介导的microRNA的调控机制，第一步通过microRNA表达谱的检测分析来源于肝病细胞的外泌体。第二步，应用肝细胞和外泌体共培养实验得出以下结论：来源于肝病细胞的外泌体能促进肝病细胞的生长及迁移侵袭，且外泌体有运输microRNA至受体细胞的功能。第三步，研究发现Vps4A是一个外泌体的重要调控因子，与肝病的发生有着密切的关系，Vps4A基因的表达下调肝病的发生及转移相关。通过microRNA高通量测序发现Vps4A基因能导致外泌体分泌肝病相关的重要microRNA，与肝病的发生密切相关。

当外泌体在1980年初次被发现后，其被认为是细胞排泄废物的一种方式，如今随着大量对其生物来源、其物质构成及运输、细胞间信号的传导以及在体液中的分布的研究发现外泌体具有多种多样的功能。外泌体的功能取决于其所来源的细胞类型，其可参与到机体免疫应答、抗原提呈、细胞迁移、细胞分化、肉瘤侵袭等方方面面。有研究表明肉瘤来源的外泌体参与到肉瘤细胞与基底细胞的遗传信息的交换，从而导致大量新生血管的生成，促进了肉瘤的生长与侵袭。外泌体的作用是消除废物并介导大脑活动，从而阻止神经退行性疾病的发病机理。

免疫印迹或蛋白质印迹是分析外泌体较常用的方法之一，其原理是外泌体上特异性抗原与抗体结合。首先对样品进行处理将囊泡裂解并将蛋白质变性，变性后，通过SDS-PAGE分离蛋白质，然后将其转移到硝酸纤维素膜或聚偏二氟乙烯（PVDF）膜上并暴露于针对目的抗原的抗体中。抗体特异性识别膜表面上的抗原，然后将膜暴露于第二抗体中。通过二抗的荧光标签或与二抗偶联的辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶基团进行检测。常用的标记蛋白为CD63、CD81、TSG101和ALIX等。但是此方法的特异性和重复性会受到所用抗体质量的限制。外泌体的直径比微泡的要小，后者直径为100nm-1μm。外泌体功能在研究初期阶段发现是参与细胞成熟过程中去除不必要的蛋白质。外泌体的研究进展

外泌体作为核酸的药物递送载体。血液中外泌体提取

外泌体的来源与特征：外泌体是一种存在于细胞外的多囊泡体，通过细胞内吞泡膜向内凹陷形成，其大小均一，直径为40-100nm，密度为1.10-1.18g/mL。外泌体可由间充质干细胞、淋巴细胞和肉瘤细胞等多种类型细胞主动分泌释放。外泌体内主要含有核酸、蛋白质和脂质等，可作为疾病诊断标记物、调控靶细胞功能、参与细胞生物学活动等。例如：含有miR-140-5p的滑膜间充质干细胞来源外泌体(SMSC-Exo影响软骨组织再生；骨髓间充质干细胞来源外泌体携带的miR-196a可调节成骨细胞分化促进大鼠颅骨缺损的骨再生。血液中外泌体提取

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