胎牛血清:胎牛血清(FBS),胎牛血清是一种性状、外观浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛;新牛血清取自出生24小时之内的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。1、性状、外观浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。2、蛋白质含量3.5%~5.0%(w/v)。3、血红蛋白含量≤0.02%(w/v)。4、无菌检验阴性。5、支原体检验阴性。6、细菌内的毒性≤5(EU/ml)。7、牛腹泻病毒阴性。8、大肠杆菌噬菌体阴性。9、支持细胞增殖(Sp2/0-Ag14)生长曲线(接种浓度)较大增殖浓度≥2.5×106个/ml,细胞倍增时间≤15h克隆率≥85%。热灭活目的是为了去除血清中补体等对热敏感的物质,但是在胎牛血清中对补体的灭活则明显没有必要。无锡细胞培养用血清报价
如何挑选好的胎牛血清:好的胎牛血清是实验的成功的前提是所有实验人做细胞培养的共识,如何挑选好的胎牛血清,可以从以下几个方面着手。1.外观,好的血清应是透明清亮,土黄色或棕黄色,无沉淀或极少沉淀,比较粘稠。如发现血清浑浊,不透明,含许多沉淀物,说明血清污染或血清中的蛋白质变性;若棕红色,说明,血清中的血红蛋白含量太高,有溶血现象。2、总蛋白含量,胎牛血清一般范围是30-40mg/ml,数值偏高,说明牛龄偏大,不是胎牛;数值偏低,表明血清可能掺水了。3、血红蛋白,标准为不高于,20mg/dl,颜色越红,数值越高;反之,数值越低。4、pH国产血清,大多高于7.5,进口胎牛血清,大多低于7.5,具体原因未知,可能和牛龄有关。深圳优等胎牛血清哪家好热灭活反而影响胎牛血清中的活性成分。
胎牛血清都有哪些重要的指标:一、内的毒性,内的毒性是革兰氏阴性菌的细胞壁外壁层上的特有成分。当细菌死亡自溶或粘附在其它细胞时,才表现其毒性。内的毒性直接参与细胞凋亡,血清中内的毒性含量越低,对细胞毒性越小,越利于细胞的生长和传代;内的毒性含量过高,会直接导致细胞提前老化。国际上规定,胎牛血清的级别,应以内的毒性水平的高低来确定,其中,特级胎牛血清的内的毒性应<10EU/ml。二、血红蛋白含量,胎牛血清的颜色会根据血红蛋白含量的不同表现出黄色、淡黄色、橘红色、微红色等。细胞培养用血清的标准是血红蛋白含量不高于20mg/dl,颜色越红,数值越高;反之,数值越低。实际上,血红蛋白含量的高低对血清并无直接影响。这个指标的意义在于能体现出采的血过程的严谨规范程度,良好的操作能降低血清的溶血。
胎牛血清有必要做热灭活吗?实验证明,经过正确处理的热灭活胎牛血清,对于大多数的细胞而言都是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或完全没有任何作用,甚至可能因为高温处理影响了血清的质量,从而造成细胞生长速率的降低。经过热处理的血清,沉淀物的形成会明显的增多,这些沉淀物在倒置显微镜下观察,像是“小黑点”,常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使此类沉淀物增加得更多,这常常会使研究者误认为是微生物的分裂扩增。因此我们建议客户,若非必须,可以不需要做热处理这一步。如此一来,不但节省客户宝贵的时间,更确保血清的质量。胎牛血清能结合或调变它们所结合的物质活力。
如果胎牛血清解冻后发现有絮状沉淀物出现,应该如何去除?胎牛血清中的沉淀物出现有很多种原因,但较普遍的原因是由于胎牛血清中脂蛋白的变性所造成,而血纤维蛋白在胎牛血清解冻后,也会存在于胎牛血清中,这也是造成沉淀物的主要原因之一。但少量絮状沉淀物,并不影响胎牛血清本身的质量。如果想要去除这些絮状沉淀物,可以采取离心法,400g,离心1~2分钟,将上清重新分装即可使用。胎牛血清中含有丰富的促进细胞生长的成分,如维生素、运输蛋白、微量元素、生长因子等。胎牛血清的无菌检验:阴性;支原体检验: 阴性;细菌内有毒的 ≤5(EU/ml)。温州OriCell血清
胎牛血清的其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚。无锡细胞培养用血清报价
胎牛血清融化方法:只要2.5个小时,温和有效地加快了水融化的速度,另一方面,融化过程中可以间断轻轻摇摆瓶子,让蛋白在瓶中混匀。此方法不但节约了时间,而且较大限度减少了血清沉淀出现的几率。血清融化过程中,蛋白质会比水先融化。冰块底部亮亮的细丝就是融化中的蛋白,血清在培养细胞中,比较重要的是利用它的活性的因子,因此,融化过程中较大限度地保留因子的活性,就变得非常重要。回忆一下,细胞复苏时,要保持细胞的活性,我们是要遵循“快融”原则还是“慢融”原则呢?快融!血清同样如此!三步法需要两个半小时,4℃过夜需要大约10个小时(冰箱一般设2-8℃,所以各实验室融化时间会稍有出入)。无锡细胞培养用血清报价
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胎牛血清存在一些问题,如批次间的变异性、潜在的病原体污染和免疫原性等。批次间的变异性是指不同批次的胎牛血清在成分和质量上存在差异。这可能会对实验结果的可重复性和可比性造成影响。为了解决这个问题,一些研究人员提出了对胎牛血清进行特殊处理的建议。例如,可以通过超速离心、过滤、冻干等方法来去除一些不需要的成分,以提高胎牛血清的一致性和稳定性。另一个问题是潜在的病原体污染。胎牛血清是从动物体内提取的,因此存在一定的病原体污染风险。这些病原体可能包括病毒、细菌、菌等。虽然现代的血清处理方法可以有效地去除或灭活大部分病原体,但仍然存在一定的风险。为了降低这个风险,一些研究人员建议使用经过特殊处理的胎牛血清...