扫描电镜(SEM)具有分辨率高和景深长等特点,因此图像层次丰富,立体感强,能够显示细胞和组织的三维结构形貌(图12-13),因此普遍应用于生物样品表面及其断面微细结构的观察。 自1966年首先台商品SEM诞生以来,发展一直很快,仪器本身性能如分辨率和多功能等不断提高外,样品制备技术也不断地改进和完善。样品制备的质量是直接决定SEM能否发挥较为佳性能,并拍出理想图片的关键所在。考虑到生物样品质地柔软、容易变形、导电性差、二次电子发射率低以及含水量多等特点,在制备SEM样品时,必须掌握以下原则: (1)每一操作过程,都应注意防止样品的污染和损伤,使被观察的样品尽可能保持原有的外貌和微细结构; (2)去除样品内水份,以利于维持SEM的真空度和防止镜筒的污染。但在脱水和干燥处理时,要尽量减少避免样品体积变小和收缩变形等人工损伤; (3)降低样品表面的电阻率,增加样品的导电性能,以提高二次电子发射率,建立适度的反差和减少样品的充放电效应; (4)观察组织细胞的表面或内部微结构,应注意和保护样品的观察面。 扫描电镜可得到有关物质微观形貌的信息;对x射线的采集,可得到物质化学成分的信息。江苏整体扫描电镜推荐
扫描电镜技术在医学形态学的研究中已成为不可缺少的科研工具与手段。在医学中,扫描电镜技术应用于疾病模型、培养细胞或组织鉴定、伤情诊断,药理作用与效果 的观察、疑难病症的电镜诊断等。比如,应用扫描电镜对人脑原发性胶质瘤的瘤细胞和问质的超微形态特征进行研究直观地观察到瘤组织内各种成分之间的相互关系, 以供鉴别诊断。4)古生物学 古生物学是研究过去的生物及其发展的科学。扫描电镜技术不*能够研究微体古生物整体形态,而目可以深入现察壳体内细小突起的数量关系及分布转点,为古生物群 体的鉴定以及形态分类提供真实的依据。比如,应用扫描电镜对陨石进行研究,为进一步了解宇宙、地球以及生命起源提供了宝贵的资料。广东整体扫描电镜哪家好扫描电镜(SEM)是介于透射电镜和光学显微镜之间的一种微观形貌观察手段。
扫描电镜在化学中的应用 扫描电镜技术在材料学的应用十分普遍,比如,可用扫描电镜观察研究薄膜传感器压阻的灵敏度,用于观测碳化硅颗粒增强的铝基复合材料的界面反应产物的形貌。 五、在工业中的应用 1)在半导体工业中的应用 由于半导体器件体积小、重量轻、寿命长、功率损耗小、机械性能钞好,因而适用的范围广。然而半导体器件的性能和稳定性在很大程度上受它表面的微观状态的影响。 一般半导体器件试制和生产过程中包括了切割、研磨,抛光以及各种化学试剂处理等一系列序,正是在这些过程中,会造成表而的结构发生惊人的变化,所以几乎每一 个步骤都需对扩散区的深度进行测量或者直接看到扩散区的实际分布情况,而生产大型集成电路更是如此。因此,扫描电镜被普遍应用于半导体工业中,比如,用于质 量监控与公益诊断、器件分析、失效分析和可靠性研究、电子材料研制分析等。
SEM扫描电镜样品的制备过程如下:①取材 根据需要,切取适当大小的样品。专门的SEM备有灵活可动,范围较大的样品台,样品可大些。装在透射电镜上的扫描附件,活动范围较小,样品直径应在3~4mm左右。②漂洗 用缓冲液把组织表面洗净,否则会影响正常形态,但以快速和轻巧为宜,尽量保护组织或组织的表面结构,使其不致因不慎的操作造成人为损伤。③固定 用25~5%戊二醛固定30分钟或更长时间。Boyde建议用戊二醛固定几天到几个月,这样会增加组织的韧性,减少脱水造成的萎缩。④漂洗 用缓冲液洗3次,洗去未结合的戊二醛。⑤重固定 1%锇酸固定1~2小时。⑥漂洗 用缓冲液洗去未结合的锇酸。⑦脱水 用30%、50%、70%、80%、90%、95%、100%、100%acetone或乙醇溶液各10分钟,大于1mm的样品可脱水10~20分钟。⑧干燥 一般情况下,可把脱水后的样品放在空气中自然干燥或45℃热风吹干。有些研究工作要求尽量完好保存样品表面的精细结构,可用真空干燥法、冷冻干燥法和临界点干燥法等使样品干燥。这些方法都比空气干燥法效果好,其中临界点干燥法优点多,多被研究工作者采用。 扫描电镜视频放大器放大的二次电子信号是一个交流信号。
扫描电子显微镜类型多样,不同类型的扫描电子显微镜存在性能上的差异。根据电子器种类可分为三种:场发射电子器、钨丝器和六硼化镧 。其中,场发射扫描电子显微镜根据光源性能可分为冷场发射扫描电子显微镜和热场发射扫描电子显微镜。冷场发射扫描电子显微镜对真空条件要求高,束流不稳定,发射体使用寿命短,需要定时对针尖进行清洗,*局限于单一的图像观察,应用范围有限;而热场发射扫描电子显微镜不*连续工作时间长,还能与多种附件搭配实现综合分析。在地质领域中,我们不*需要对样品进行初步形貌观察,还需要结合分析仪对样品的其它性质进行分析,所以热场发射扫描电子显微镜的应用更为普遍。扫描电子显微镜在其微观结构分析研究方面同样显示出极大的优势。广东整体扫描电镜哪家好
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扫描电镜样本临界点干燥法 临界点干燥法是利用物质在临界状态时,其表面张力等于零的特性,使样品的液体完全汽化,并以气体方式排掉,来达到完全干燥的目的。这样就可以避免表面张力的影响,较好地保存样品的微细结构。此法操作较为方便,所用的时间也不算长,一般约2~3小时即可完成,所以是较为为常用的干燥方法。但用此法, 需要特殊仪器设备。临界点干燥是在临界点干燥仪中进行的,操作步骤如下: a.固定、脱水:按常规方法进行。如样品是用乙醇脱水的,在脱水至100%后,要用纯acetone置换15~20分钟。 b.转入中间液:由纯acetone转入中间液醋酸异戊酯中,时间约15~30分钟。 c.移至样品室:将样品从醋酸异戊酯中取出,放入样品盒,然后移至临界点干燥仪的样品室内,盖上盖并拧紧以防漏气。 d.用液体二氧化碳置换醋酸异戊酯:在达到临界状态(31℃, 72.8大气压)后,将温度再升高10℃,使液体二氧化碳气化,然后打开放气阀门,逐渐排出气体,样品即完全干燥。 江苏整体扫描电镜推荐
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