本发明涉及一种快速提取血液和口腔拭子基因组DNA的方法。背景技术：近年来，随着荧光PCR技术的不断成熟。该技术在科研及检验领域得到了应用，成为分子生物学领域不可或缺的一项重要技术。在进行遗传背景分析过程中，血液、唾液和口腔拭子成为重要的生物分析样本。但是，由于血液、唾液和口腔拭子中存在有很多PCR反应物，例如血液中含有血红素，蛋白质，脂肪，抗凝剂等，唾液和口腔拭子含有蛋白质，脂肪，抗凝剂等，使得用血液、唾液和口腔拭子直接进行荧光PCR反应变得尤为困难。因此，现在临床上往往先要从血液、唾液和口腔拭子样本中纯化出DNA，才能进行样本的DNA扩增。提取血液、唾液和口腔拭子基因组的方法种类非常多，传统酚氯仿抽提法，高盐盐析法，模离心柱吸附法，磁珠法，等等。经典的血液核酸提取方法包括几个过程。1.通过低渗液涨破红细胞，将血红素物质释放出来，然后离心，清洗去除血红素。2.通过裂解液裂解白细胞，释放核酸物质。3.通过离心柱或纳米磁珠特异性吸附核酸物质，去除其他杂质。4.通过漂洗液洗掉挂在离心柱或纳米磁珠表面的化学试剂残留和蛋白残留。5.加入洗脱液将核酸从离心柱或纳米磁珠上洗脱下来。 .有着出众的灵活性：**水样采集器和棉签拭子设计，能采集不同量的水样，提高了拭子的检测范围和灵活性。湖南DNA口腔拭子源头厂家
口腔拭子DNA提取介绍所述iCleanhcy的DNA口腔细胞的试剂盒允许从人口腔拭子的基因组DNA的快速和有效的纯化。
DNA样本准备裂解液后，您可以在使用iCleanhcy不到15分钟纯化DNA技术。根据所使用的DNA纯化试剂盒，可以使用液体处理机器人单独或在自动化系统中处理样品。对于套件预期用途的iCleanhcy设计DNA口腔细胞试剂盒以允许从人颊细胞拭子或来自漱口水/或者唾液采集器手机人体唾液的沉淀细胞中分离以下量的基因组DNA。在加工前，样品可以在4°C下储存长达2周，而DNA产量或质量没有明显损失，不会降解。纯化的基因组DNA适用于下游应用，例如PCR,芯片.iCleanhcy?的DNA归口腔细胞培养基：在150微升的总体积在1-3毫微克/微升的浓度制作的基因组DNA的归一化产率。
iCleanhcy的DNA口腔细胞培养基：纯化的基因组DNA的6微克。重要提示：DNA产量各不相同，取决于几个因素，包括服用拭子的人的技术，供体是高还是低的脱落剂，以及使用的拭子类型。优点使用iCleanhcy的DNA口腔细胞的试剂盒，分离基因组DNA提供了以下优点：使用基于磁珠的技术分离基因组DNA，无需使用危险化学品，离心或真空歧管在样品制备和裂解后不到15分钟内。 湖南DNA口腔拭子源头厂家然后将沾有口腔脱落细胞的拭子在洁净通风处、至少一小时直至晾干，装回采集管，完成取样。
妇科拭子
观察发育情况，**分布及多少，有无畸形，外阴皮肤有无红疹、脓肿、血肿、包块、湿疹、溃疡、糜烂、抓痕、外伤、色素脱失、萎缩、增厚等，前庭部有无充血、溃烂、赘生物，尿道口有无分泌物及赘生物，处女膜有无裂痕，会**有无裂伤及损伤程度，前庭大腺有无肿大、触痛，开口处有无充血、***及脓性分泌物，必要时嘱患者用力屏气以增加腹压，观察有无应力性尿失禁、阴道前后壁膨出及子宫脱垂，并注意其程度。中文名妇科拭子外文名DisposableCervicalSampler别名简称妇科采样刷，妇科采样器***使用妇科门诊,体检中心，妇科检查对象女性检查项目外**检查目录1妇科试子介绍2妇科检查项目妇科拭子妇科试子介绍编辑别名简称：妇科拭子（妇科采样刷，妇科采样器）[1]英文名：DisposableCervicalSampler妇科拭子***使用于妇科门诊,体检中心，妇科检查用于妇科检查妇科拭子妇科检查项目编辑外**检查阴道检查检查者手持窥阴器蘸温开水，以左手分开两侧大小**，右手将窥阴器沿阴道后壁斜向插入，边进边旋转成正位，缓慢张开两叶，暴露宫颈。注意阴道壁粘膜色泽、皱襞，有无充血、出血、裂伤、溃疡、赘生物。
口腔拭子介绍口腔拭子有很多种，比如植绒口腔拭子，聚酯纤维口腔拭子，尼龙口腔拭子，海绵口腔拭子，棉花口腔拭子，还有PVA口腔拭子，锯齿状口腔拭子，不同的口腔拭子有不同的作用，以及不同的采样方法，采集的细胞量也不同，都是用于口腔基因检测采样，分子诊断，细胞学，疾病学。口腔拭子产品用途：尼龙植绒拭子用途***，在用于细菌学样本处理、***学细胞培养、DFA检验、快速直接的检验、酶免疫法检测、聚合酶链反应和基于分子诊断的检测，以及法医鉴定时都十分理想。也可用于流感、猪流感、禽流感、手足口等呼吸道***的咽喉部采样。产品特点：1.具有超常的吸水能力，可以将其表采集的标本数量由传统采样拭子的20%提高到了60%2.对收集到的标本有超过90%的释放率，从而确保了结果的高度可靠性3.针对不同的标本类型选用了不同的保存液4.塑料杆上有独特的可折断设计，方便标本运输5.环氧乙烷灭菌消毒，独立包装规格:CY-98000??CY-98000FS锯齿状口腔拭子包装：独立包装产地：中国深圳品牌：华晨阳/iCleanhcy生产商：深圳市华晨阳科技有限公司用途：基因检测采样，分子诊断，基因学，口腔学，细胞学，疾病学，实验室，研究所。法医，公安系统DNA。口腔细胞采样时要撕开口腔拭子外包装，小心取出口腔拭子（注意：整个取样过程中手不能接触拭子部分）。
本发明的特征在于：应用本发明的血液基因组DNA提取方法在10分钟内提取血液基因组可用于荧光PCR扩增检测，主要步骤如下。（1）将**管颠倒混匀后，吸取100μL血液或者吸取100μL口腔拭子样本保存液至，加入200μL的核酸释放剂，涡旋混匀，然后5000g离心30s，弃上清，获得细胞沉淀。（2）将步骤（1）中得到的血液细胞沉淀中再加入200μL核酸释放剂，涡旋振荡1min，至沉淀完全散开，然后5000g离心30s，弃上清。（口腔拭子样本则无需进行此步骤）。（3）向步骤（2）所获得的沉淀中加入50μL核酸释放剂，涡旋振荡1～2min；室温放置5min，12000g离心30s，取上清液即为提取的基因组DNA；所述的核酸释放剂组成为20mM～80mM的氢氧化钠溶液、～、～、～、～***钠、～3%甲酰胺；所述荧光PCR反应液组成为ROX、TaqMan探针、引物、dNTP、dUTP、UDG、BSA、聚合酶及缓冲液。附图说明图1为实例1检测的8份血液样本平行实验的荧光扩增曲线图。图2～图5为实施例1提供的四份血液样本的三次平行实验的荧光扩增曲线图。图6为实施例2对比实例1提供的对8份血液样本平行实验的荧光扩增曲线图。具体实施方式为了使本领域技术领域人员更好地理解本申请中的技术方案。口腔拭子 非常大限度的样本洗脱及转移，对微量DNA样本采集尤为出色。湖南DNA口腔拭子源头厂家
口腔拭子适用于采集任何年龄段人群的DNA样本。湖南DNA口腔拭子源头厂家
下面将结合实施例对本发明作进一步说明。实施例1一种可用于荧光PCR扩增的快速提取全血基因组的方法中的荧光PCR扩增反应液包括浓度或含量和组分如表1。将所述的荧光PCR扩增反应液对血液样本中的管家基因***DH进行荧光PCR扩增，方法如下：将**管颠倒混匀后，吸取100μL血液至，加入200μL的核酸释放剂，涡旋混匀，然后5000g离心30s，弃上清，获得细胞沉淀；然后再加入200μL核酸释放剂，涡旋1min至沉淀完全散开，5000g离心30s，弃上清；向细胞沉淀中加入50μL核酸释放剂，涡旋振荡1min，室温放置5min，12000g离心30s，取上清液即为提取的血液基因组DNA；取上清液3μL，加入到配制好的荧光PCR反应液，于ABI7500荧光PCR仪中进行扩增。所述的荧光PCR扩增程序如下。步骤①：50℃，2min，循环1次。步骤②：95℃，5min，循环1次。步骤③：95℃15s，55℃30s（收集荧光），循环40次。结果分析：平行扩增的荧光定量PCR反应中，阴性对照无扩增，说明反应体系正常，无污染。用本发明处理了10份来源不同的人血液样本，然后用人管家基因***DH引物进行荧光PCR扩增检测，结果如图1所示。 湖南DNA口腔拭子源头厂家
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