缓冲溶液是许多生化反应、生产、实验过程中的重要溶液,对稳定溶液的酸碱度有重要的影响。本文以**常见的几种缓冲体系——磷酸盐缓冲溶液、硼酸盐缓冲溶液、三羟甲基氨基甲烷(简称Tris)-HCl缓冲溶液、羟乙基哌嗪乙磺酸(供注射用)(简称HEPES)缓冲溶液为例,介绍缓冲溶液的组成、缓冲原理及其在生物化学方面的应用。HEPES缓冲溶液具有对细胞无毒性、不易穿过生物膜、不参与细胞内生化过程等特点,所以在生化实验中具有***的应用,如可用于开放式细胞生长、细胞的长期观察、RNA或DNA提取试剂盒中。其次,相关研究表明以HEPES溶液做缓冲液有利于多肽在金纳米粒子表面的偶联反应。另外,HEPES缓冲溶液对镁生物降解影响的相关实验表明,HEPES能提高镁的生物降解性以及抑制镁不溶盐层的形成。国内AVT注射用HEPES已登记?上海登记号HEPES批量
各种配制方法总结如下:一、500ml1MHEPES,pH=7.0Stocksolution的配制119.15gHEPES溶解在400ml蒸馏水中,加0.5~1M的NaOH水溶液调节至少所需pH(HEPES的有效pH范围是6.8~8.2),然后用蒸馏水定容至500ml,于4摄氏度保存。二、加少量盐的HEPESBuffer配方(500ml)HEPES6.5g、NaCl8.0g、Na2HPO4.7H2O0.198g、用0.5MNaOH水溶液调节pH值,***定容。三、2×HEPES缓冲盐溶液的配制将1.6gNaCl、0.074gKCl、0.027gNa2HPO4.2H2O、0.2g葡聚糖(glucanordextran)和1gHEPES溶解在90ml的蒸馏水,用0.5MNaOH调节至所需pH值,再用蒸馏水定容至100ml即可。安徽供注射用HEPES现货国内AVT稳定供货HEPES!
在细胞培养过程中,经常少不了HEPES缓冲液。那么,HEPES缓冲液的配制和使用方法怎样呢?HEPES缓冲液是一种弱势,在开放式的培养条件中,若加入HEPES,可防止培养基内pH氧化升高,从而将PH维持在7.0左右。HEPES分子量为238.31,化学名:4-羟乙基哌嗪乙磺酸,分子式:C8H18N2O4S。HEPES常用于生物缓冲剂,pH值缓冲范围:6.8-8.2,用在生化诊断试剂盒、DNA/RNA提取试剂盒及PCR诊断试剂盒里。对细胞无毒性作用。它是一种氢离子缓冲剂,能较长时间控制恒定的pH范围。使用终浓度为10-50mmol/L。关于HEPES缓冲溶液的配制,不同的文献资料有不同的说法。根据用途,一种是单纯的HEPES+NaOH,另一种是HEPES+盐。
储存方法:HEPES缓冲液在2-8℃下可保存1年。注意事项:HEPES缓冲液运输时需要加冰袋。但储存时避免冷冻,否则会有盐类物质析出。N-三(羟甲基)甲基甘氨酸Tricine,CAS是5704-04-1,是一种两性离子缓冲液,名字由Tris和glycine衍生而来,结构类似于Tris,但是高浓度具有比Tris更弱的抑制性,也是“Good”缓冲液之一,**初开发用于提供叶绿体反应的缓冲体系。Tricine的有效pH缓冲范围为7.4-8.8,pKa=8.1(25℃),常用做电泳缓冲液,以及用来重悬细胞沉淀。Tricine具有低负电荷和高离子强度的特性,非常适用于电泳分离1~100kDa的低分子量蛋白。基于萤火虫荧光素酶的ATP分析实验中,比较10种常见的缓冲液,Tricine(25mM)表现出比较好的检测效果。另外,在自由基诱导的膜损伤实验中,Tricine还是一种有效的羟自由基清除剂。作者:泰安格林化工链接:艾伟拓稳定供应注射级海藻糖、蔗糖、TRIS/TRIS-HCl、HEPES等生物保护剂与缓冲盐。
生物缓冲剂HEPES粉末事实证明,HEPES优于碳酸盐缓冲液等其他缓冲液,可以避免二氧化碳释放导致细胞微细化生长,因此在细胞培养中频繁使用。HEPES的PH值随温度下降而下降,但磷酸盐与碳酸氢盐缓冲液的解离常数pK几乎不随温度变化。HEPES的行为与水相似,温度降低解离常数降低,HEPES可用于维持酶在低温下的结构和功能。HEPES为白色结晶粉末,纯度高、质量好,主要含量在99.50%以上,铁离子在5ppm以下,硫酸盐在0.05%以下,重金属残留量在10ppm以下。提供少量试用样品粉末,可自行配置于溶液中检测使用。国内AVT稳定供货注射级HEPES!山东大批量HEPES市场价格
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