细胞转染实验是生物医学实验室中常规的研究手段,目的是把外源基因、蛋白或者小分子导入到靶细胞内。目前主要有三种主流方法:生物转染,物理转染和化学转染。其中生物转染主要是利用病毒等微生物作为基因导入载体,以慢病毒、腺病毒和腺相关病毒等常见,其侵染效率可以达到90%以上,但常因安全性等问题,很多实验室对其敬而远之。物理转染主要包括显微注射、电穿孔和基因,无论哪一种都需要特定的设备,且一分钱一分货,性能好的价格也都很性感。
PEI 25K和40K哪个好用?聚乙烯亚胺PEI转染试剂使用比例
准备DNA-PEI复合物:DNA、PEI试剂和稀释剂在进行以下步骤前需先使其升至室温。依据表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他适合的无蛋白培养基稀释适量DNA。用同样的培养基稀释PEI试剂。每1μgDNA需用2-5μL线性PEI转染试剂。一边轻轻涡旋装有DNA溶液的试管,一边将稀释的线性PEI转染试剂滴加至试管中(注意:请勿颠倒添加顺序)。充分混匀后,室温静置10~25min以形成DNA-PEI复合物。当溶液体积较大时,请用圆底聚丙烯管,例如Falcon5mL/14mL离心管。转染细胞:直接向每个孔中加入DNA-PEI复合物并轻轻涡旋培养板/培养皿。在无血清条件下转染时,去除生长培养基,替换成无血清培养基,然后滴DNA-PEI复合物。转染3h后,添加?体积的包含30%血清的生长培养基。更多关于Polysciences PEI,欢迎咨询上海曼博生物!四川PEI转染试剂哪个品牌好线性的和分支的PEI转染试剂哪个好?
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PEI转染试剂的工作原理是什么?聚乙烯亚胺PEI转染试剂使用比例
稳定转染方法:
1.接种细胞:转染前,用胶原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化细胞并计数(不建议用胰酶)。调整细胞浓度,将细胞铺入细胞培养的器皿,每个孔置入的细胞量应能使转染时细胞汇合度达到70~80%。2.准备DNA-PEI复合物:DNA、PEI试剂和稀释剂在进行以下步骤前需先使其升至室温。依据表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他适合的无蛋白培养基稀释适量DNA。用同样的培养基稀释PEI试剂。每1μgDNA需用1.5-5μL线性PEI转染试剂(这个需要客户自行摸索配比,每一批转染试剂和每一批DNA比例可能会稍有不同)。一边轻轻涡旋装有DNA溶液的试管,一边将稀释的线性PEI转染试剂滴加至试管中(注意:请勿颠倒添加顺序)。充分混匀后,室温静置10~25min以形成DNA-PEI复合物。当溶液体积较大时,请用圆底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL离心管。 聚乙烯亚胺PEI转染试剂使用比例
上海曼博生物医药科技有限公司是国内一家多年来专注从事血小板裂解液,WB自动孵育系统,微流控器官芯片,蓝牙无线标签机的老牌企业。公司位于自由贸易试验区达尔文路16幢104室,成立于2019-02-15。公司的产品营销网络遍布国内各大市场。公司现在主要提供血小板裂解液,WB自动孵育系统,微流控器官芯片,蓝牙无线标签机等业务,从业人员均有血小板裂解液,WB自动孵育系统,微流控器官芯片,蓝牙无线标签机行内多年经验。公司员工技术娴熟、责任心强。公司秉承客户是上帝的原则,急客户所急,想客户所想,热情服务。公司会针对不同客户的要求,不断研发和开发适合市场需求、客户需求的产品。公司产品应用领域广,实用性强,得到血小板裂解液,WB自动孵育系统,微流控器官芯片,蓝牙无线标签机客户支持和信赖。PL Bioscienc,Quan-Lab,Polysciences,Sirion Biote,CN-Bio,Dharmacon,Horizon,Pfenex,Visual Prote秉承着诚信服务、产品求新的经营原则,对于员工素质有严格的把控和要求,为血小板裂解液,WB自动孵育系统,微流控器官芯片,蓝牙无线标签机行业用户提供完善的售前和售后服务。
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