细胞分盘：通过胰酶消化收集细胞，用适当的完全培养基以4×105至8×105细胞/cm2的密度平铺细胞于60mm组织培养皿上（根据实验需要选择培养皿，使细胞贴壁后所占总面积达到培养皿面积的70-90％）。根据细胞贴壁情况于含5％CO2的37℃温箱中孵育8-24h,当细胞贴壁完全后即可开始转染。转染前换入2mL预热的无血清培养基。2.制备PEI-DNA混合物：以60mm组织培养皿用420μL反应总体积为例。准备两支1.5mL离心管，一管将质粒DNA（总量2-8μg为佳）加入240μLHBS中，混匀。另一管中则用HBS将100μM的PEI储存液稀释成10μM，充分混合。然后取180μL10μMPEI溶液加入含有DNA的HBS中，充分混匀后室温静置20-30min。将这420μL的PEI-DNA混合液逐滴加入上述单层细胞的细胞培养基中，轻轻摇动平皿混匀，置于含5％～7％CO2的37℃温箱孵育。注：每次用100μM的PEI储存液前都需要先将其充分混匀，保证所取的浓度一致。3.培养6-10h后更换为37℃预热的含有血清的培养基，继续培养，16h左右可以观测到报告基因的表达。
PEI转染试剂主要成分是什么？科研级PEI转染试剂
上海曼博生物医药科技有限公司成立于2019年，依托于集团公司泉心泉意深厚的资源和超过400家国内客户群体，生命科学领域一站式供应链体系，以及高风险生物危险材料进出口平台的优势，曼博生物严格筛选国际创新且经过同行验证过的产品和技术，引入中国市场，开发、孵育和推广，致力于将全球创新产品和前沿技术带入中国，集中在为细胞/基因领域、/免疫，抗体药物研发客户提供小众创新产品，包括从Researchgrade到cGMP等级的无动物源培养基质，转染试剂、病毒转导试剂、基因编辑工具等产品和定制服务，支持ATMP（AdvanceTherapyMedicinalProducts）药物研发从R&D到Clinicaltrial以及后期商业化的无缝转化血清兼容PEI转染试剂protocolPEI转染试剂可以转染哪些细胞？
细胞转染实验是生物医学实验室中常规的研究手段，目的是把外源基因、蛋白或者小分子导入到靶细胞内。目前主要有三种主流方法：生物转染，物理转染和化学转染。其中生物转染主要是利用病毒等微生物作为基因导入载体，以慢病毒、腺病毒和腺相关病毒等常见，其侵染效率可以达到90%以上，但常因安全性等问题，很多实验室对其敬而远之。物理转染主要包括显微注射、电穿孔和基因，无论哪一种都需要特定的设备，且一分钱一分货，性能好的价格也都很性感。更多Polysciences PEI相关产品内容欢迎咨询上海曼博生物医药科技有限公司！
对于某些类型的细胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS细胞，在转染前两天铺板可显著提高转入基因的表达水平。如果选择转染前两天铺板，可适当降低铺板密度，以确保转染时细胞的汇合度仍为70~80%。2.对于接触抑制敏感的细胞，可适当降低铺板密度。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情况下，DNA-PEI复合物仍能转染细胞，但是DNA-PEI复合物必须在无蛋白存在的条件下形成。我们推荐使用Opti-MEMITM培养基以达到宜转染效率。其他的无蛋白培养基则需测试与线性PEI转染试剂的兼容性。4.对大多数细胞来而言，每1μgDNA使用3.0μLPEIMAX转染试剂都能获得较高转染效率。使用者也可尝试每1μgDNA使用1.5~4μL体积线性PEIMAX转染试剂进行优化。
PEI转染试剂主要用于大规模的蛋白表达和病毒包装。
注意事项质粒质量：请务必使用高质量转染级无内质粒（推荐使用QIAGEN或者MN公司去内质粒提取试剂盒）。通过260nm光吸收测定DNA浓度，260nm/280nm比值确定DNA纯度（比值应该在1.8~2.0的范围之内）。如有可能，请通过琼脂糖凝胶电泳检测质粒的完整性。细胞条件：使用适当保存和经常传代的健康细胞。确保培养基没有被细菌、或支原体污染。如果细胞是近期复苏的液氮冻存细胞，请在转染前至少传代两次。建议使用GIBCO或者78bio公司血清培养细胞。
PEI转染试剂保存条件是什么？科研级PEI转染试剂哪个品牌好
哪个分子量的PEI转染试剂好？科研级PEI转染试剂
线性化聚乙烯亚胺pei25,000,一种高电荷阳离子聚合物,非常容易结合于高电荷阴离子基质。工业应用上线性化pei可改善负电荷染料的物理外观以调整染料的化学特性和增强染料与固相基质的黏附能力,常用作黏附增强剂,作用同多聚赖氨酸(poly-lysine);科研应用上;线性化pei能与dna或其他负电荷生物大分子简单结合,正是这一特性,使得成为一种非常行之有效的载体运输介质(vector carrier),即转染试剂。上海曼博生物医药科技有限公司成立于2019年，依托于集团公司泉心泉意深厚的资源和超过400家国内客户群体，生命科学领域一站式供应链体系，以及高风险生物危险材料进出口平台的优势。更多关于Polysciences PEI，欢迎咨询上海曼博生物！科研级PEI转染试剂
上海曼博生物医药科技有限公司位于自由贸易试验区达尔文路16幢104室，交通便利，环境优美，是一家贸易型企业。公司是一家有限责任公司企业，以诚信务实的创业精神、专业的管理团队、踏实的职工队伍，努力为广大用户提供***的产品。公司业务涵盖血小板裂解液，WB自动孵育系统，微流控器官芯片，蓝牙无线标签机，价格合理，品质有保证，深受广大客户的欢迎。曼博生物顺应时代发展和市场需求，通过**技术，力图保证高规格高质量的血小板裂解液，WB自动孵育系统，微流控器官芯片，蓝牙无线标签机。
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