HEPES使用方法有两种：(1)HEPES可按所需的浓度直接加入到配制的培养液中，再过滤除菌。每1000ml培养液中加入2.38克HEPES，待溶后用lNNaOH调pH至7.2，滤过除菌后使用。此时HEPES的使用浓度为10mmol/L。(2)亦可配成100x贮存液(lmol/L)，使用前取99ml培养液加入lml贮存液，**终应用浓度仍为10mmol/L。lmol/L(100x)HEPES贮存液配制方法：取23.8gHEPES溶于90ml双蒸水中，用lNNaOH调pH至7.5一8.0，然后用水定容至100ml，过滤除菌，分装小瓶(2ml/瓶)，4℃或-20℃保存。需要注意的是，HEPES缓冲液的使用终浓度为10-50mmol/L，对细胞无毒性作用。一般情况下，浓度为20mmol/L的HEPES即可达到缓冲能力。现在市售HEPES为约10g包装的小瓶，大家根据实际情况正确灵活配制就OK了艾伟拓稳定供应注射级海藻糖、蔗糖、TRIS/TRIS-HCl、HEPES等生物保护剂与缓冲盐。黑龙江羟乙基哌嗪乙磺酸HEPES使用注意事项
生化实验室常用的缓冲系主要有磷酸、柠檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tris（三羟甲基氨基甲烷）等系统，生化实验或研究工作中要慎重地选择缓冲体系，因为有时影响实验结果的因素并不是缓冲液的pH值，而是缓冲液中的某种离子。如硼酸盐、柠檬酸盐、磷酸盐和三羟甲基甲烷等缓冲液都可能产生不需要的化学反应。硼酸盐：硼酸盐与许多化合物形成复盐、如蔗糖。柠檬酸盐：柠檬酸盐离子容易与钙结合，所以存在有钙离子的情况下不能使用。磷酸盐：在有些实验，它是酶的抑止剂或甚至是一个代谢物，重金属易以磷酸盐的形式从溶液中沉淀出来。而且它在pH7.5以上时缓冲能力很小。三羟甲基氨基甲烷：它可以和重金属一起作用，但在有些系统中也起抑制作用。其主要缺点时温度效应。这点往往被忽视，在室温pH是7.8的Tris缓冲液，4℃时是8.4，37℃时是7.4，因此，4℃配制的缓冲液在37℃进行测量时，其氢离子浓度就增加了10倍。在pH7.5以下，其缓冲能力极为不理想。河北药用辅料HEPES批发国内艾伟拓注射用HEPES已登记！
酸碱缓冲溶液是指能够抵抗外加少量强酸、强碱以及水的稀释作用，并维持溶液pH值基本不变的溶液。常见的缓冲溶液需具备酸碱缓冲对，缓冲对可以是两种不同的物质，如HAc-NaAc缓冲溶液中的HAc和NaAc，也可以是一种物质里同时含有互为共轭酸碱的不同基团，如邻苯二甲酸氢钾中的羧基（-COOH）和羧酸根（-COO-）。当然，浓度很大的强酸、强碱溶液中即使不含有酸碱缓冲对也有一定的缓冲能力，因为外加少量的酸或碱对强酸、强碱的浓度变化影响很小，所以pH值基本不变。
（5）缓冲溶液在稳定性方面各显利弊：①Tris-HCl缓冲溶液pH值受外界影响较大，一般现用现配。同时需要注意Tris是一级脂肪胺，分子结构中的氨基易与醛类化合物发生缩合反应，是一些生化实验的抑制剂。②硼酸盐缓冲液有一定毒性，不宜用做注射液或者口服液的缓冲液。③虽然磷酸盐缓冲溶液稳定性很好，但磷酸根具有一定的络合能力会抑制一些与金属离子有关的生化反应。④HEPES缓冲溶液是较理想的生物缓冲剂，但其有多种生物学效应，如：缩短血液凝固时间、减缓平滑肌收缩频率以及阻断细胞膜上的阴离子通道等，在一定程度上会影响患者身体状态，使用时应需注意。艾伟拓注射用HEPES已登记！
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