胎牛血清和新生牛血清的区别是什么?取血年龄不同:牛血清按照牛取血时间或牛龄可进行区分。胎牛血清指的是取自未出生,母牛剖腹得来的胎牛。国产胎牛血清(并无明确定义,但通常以此称)的指的是出生4-6小时,且未进行哺乳进食的牛,有时还称作国产新生牛。 新生牛血清指的是出生14天-3个月进行取血的牛。成年牛血清指的是取血时牛龄通常超过12个月的牛。以上取血牛龄的差异主要是受当地国家畜牧业的发展及法规限制影响,因为牛血多为畜牧业副产业,并未有专门为取血而养的牛。组分与比例不同:这几种不同牛龄血清所含的促细胞生长因子、促贴附因子、及其他活性物质等组分与比例不同。常规来说,年龄越小的牛血清,细胞培养效果越好。胎牛血清培养效果好于新生牛,且因为胎牛未进食过母乳,所以IgG含量低。用途与用法不同:根据细胞所需生长条件可确定。牛血清是细胞培养中用量较为大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份。杭州优级血清销售公司
血清的保存应该注意:血清中的沉淀物、絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身的质量,可用离心3000rpm,5分钟去除,也可不用处理,显微镜下"小黑点"。经过热处理过的血清,沉淀物的形成会明显增多。有些沉淀物在显微镜下观察象"小黑点",常误认为血清受污染,一般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但如果怀疑血清质量,则应立即停止使用,更换另一批号的血清。切勿将血清在37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中的有效成分会破坏而影响血清质量。杭州优级血清销售公司胎牛血清有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到医治作用。
细胞培养中出现黑点是污染吗?如何处理?一旦您在细胞培养的过程中发现有黑点生成,首先,要肉眼观察培养基是否混浊,然后,在镜下观察培养细胞生长的状态,黑点是否游动。如果细胞被污染,微生物则会大量繁殖,培养基就会迅速变黄、变混浊。污染包括细菌污染、支原体污染等。如果在镜下观察细胞,生长状态良好,与黑点出现前相比,没有任何变化,那么,黑点的出现可能与以下几种情况有关:细胞生长过老,破碎的细胞残骸;血清质量不好,反复冻融的结果;配制培养基的pH值偏高,不宜细胞生长;配制培养基的水质、容器不合格。可应用离心、过滤的方法去除这些黑点;培养原代细胞中出现小黑点,可能是原代组织中的杂质,多次传代可以消除。
国际上流行的【血清融化三步法】可较为大限度地保存血清中因子的活性,不会产生沉淀,同时能缩短血清融化时间。关于胎牛血清的灭活:真正的胎牛血清因为胎牛没有形成有效补体,如果针对补体灭活的话,就不需要。其他情况根据实验设计来决定。胎牛血清的浓度:胎牛血清通常是以2%~20%的比例加到基础培养基中,混合后配成完全培养基。曾有文献报道,不同胎牛血清浓度对细胞存在一定的影响,尤其是干细胞和原代细胞。具体很好浓度需要用户根据自己的实验来确定,以既保证培养的效果,又避免血清的浪费。胎牛血清起酸碱度缓冲液作用。
很好的胎牛血清:好的血清应是透明清亮,土黄色或棕黄色,无沉淀或极少沉淀,比较粘稠。如发现血清浑浊,不透明,含许多沉淀物,说明血清污染或血清中的蛋白质变性;若棕红色,说明血清中的血红蛋白含量太高,有溶血现象。胎牛血清一般范围是30-40mg/ml,数值偏高,说明的牛龄偏大,不是胎牛;数值偏低,表明血清可能掺水了。标准为不高于20mg/dl,颜色越红,数值越高;反之,数值越低。国产血清,大多高于ph7.5,进口胎牛血清,大多低于ph7.5,具体原因未知,可能和牛龄有关,这也能用来初步鉴别血清的来源。将血清从冷冻箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,然后在室温下使之全溶。舟山优等胎牛血清多少钱
热灭活:一般是以56℃,30分钟来处理已解冻的血清,因为此加热步骤,可以使补体去活化。杭州优级血清销售公司
较为低血清试验的要求。内有毒的检测:内有毒的,又叫脂多糖(LPS)或脂寡糖(LOS),存在于革兰氏阴性菌的细胞外膜。临床上,内有毒的作为一些革兰氏阴性菌的诊断提示,如脑膜炎球菌。动物体内,内有毒的能够导致发热或者诱导炎症反应;细胞培养中,内有毒的能够诱导细胞反应异常。通常,采用鲎阿米巴样细胞裂解实验(LAL检测)检测内有毒的水平。LAL是从美洲鲎的血液中制备的,对内有毒的非常灵敏,在微量内有毒的存在情况下就凝结。阿米巴样细胞相当于哺乳动物的白细胞。特异性血清及其加工方式,热钝化:胎牛血清的常规处理方式是热钝化,即放在56°水浴30分钟;其目的是使血清中的补体成分及一些未知的细胞生长抑制分子失活。与胎牛血清的其它加工方式一样,热钝化处理过程必须小心谨慎,因为血清中的生长因子容易在较高温度或者较长时间加热条件下失活,甚至产生沉淀。杭州优级血清销售公司
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胎牛血清存在一些问题,如批次间的变异性、潜在的病原体污染和免疫原性等。批次间的变异性是指不同批次的胎牛血清在成分和质量上存在差异。这可能会对实验结果的可重复性和可比性造成影响。为了解决这个问题,一些研究人员提出了对胎牛血清进行特殊处理的建议。例如,可以通过超速离心、过滤、冻干等方法来去除一些不需要的成分,以提高胎牛血清的一致性和稳定性。另一个问题是潜在的病原体污染。胎牛血清是从动物体内提取的,因此存在一定的病原体污染风险。这些病原体可能包括病毒、细菌、菌等。虽然现代的血清处理方法可以有效地去除或灭活大部分病原体,但仍然存在一定的风险。为了降低这个风险,一些研究人员建议使用经过特殊处理的胎牛血清...