购买回来的血清都是冰冻状态,使用时需要融化,融化过程在温度较低的状态下慢慢进行,待溶解完成,我们观察到的胎牛血清会表现出黄色或红色。并不是越红越好,也不是越黄越好,淡黄色到淡红色才是比较正常的颜色范围。很多培养细胞的宝宝会发现进口血清有沉淀,从而怀疑血清的质量问题。那么,血清中可能出现的沉淀物是什么?纤维蛋白,它是经常出现的较大的沉淀物,可以达到1-2mm,可以用肉眼观察到。磷酸钙,它也是常见的一种沉淀物,通常会使血清出现浑浊,并且在37℃培养的时候会增加。这种沉淀物在倒置显微镜下观察像小黑点,这些小黑点由于布朗运动看上去可以活动,因此经常被误认为是微生物污染。胆固醇、脂肪酸酯以及一些蛋白质,它们也是血清中出现沉淀物的常见原因。关于细胞生长,其实很多试验以及经验表明沉淀物不会影响细胞培养,当然血清生产商也是这样说的。血清中的沉淀物、絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成。台州OriCell血清价格
除了对血清进行检测,有何更直观的方式分辨血清质量?目测法,我们可根据血清的颜色,沉淀,澄清度等进行区分。颜色:颜色根据血清蛋白含量的不同,可表现出黄色或者红色。进口血清质量较为好的呈现出淡黄、微红色,较差质量呈现出橘红色或鲜红色。热灭清或保存不当的,由于血红蛋白的破坏氧化,会呈现出暗红色,甚至咖啡色。沉淀:血清中的沉淀主要是有纤维蛋白的凝聚产生。沉淀产生的原因很多,使用时反复冻融会增加沉淀。进口血清过滤分装前很少反复冻融,因此成品清澈。澄清度:进口血清是由于蛋白和脂类等物质含量低,表现为稀薄、清淡。国产血清绝大多数为新生牛血清,相对而言更加粘稠,颜色略深。韶关标准级胎牛血清厂家胎牛血清提供对维持细胞指数生长的,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。
胎牛顾名思义就是指还在母牛身体里的小牛,所以胎牛血清的采集工作,便是先从怀孕中的母牛身体里取出胎牛(通常5-8个月胎龄),之后对未发育完全的胎牛的心脏穿刺取血,完成的工作以后便再通过一系列的工艺处理获得胎牛血清。而新生牛血清主要是采集已出生10天内的小牛,而且它们的发育相对于胎牛而言更加完全。国产血清因为原料供应等原因,通常会选8个月以上,或足月刚出生的小牛取血,把它定义为类胎牛血清。但我们知道这时血清里的生长因子已经完全不同于胚胎发育时的生长因子。甚至于现在很多国产厂家已经把这类血清完全归类于胎牛血清,贴上胎牛血清的标签,卖着胎牛价格,却只起着新生牛的作用。市场上进口胎牛血清较多,真正好的胎牛血清并不多。
很好的胎牛血清:好的血清应是透明清亮,土黄色或棕黄色,无沉淀或极少沉淀,比较粘稠。如发现血清浑浊,不透明,含许多沉淀物,说明血清污染或血清中的蛋白质变性;若棕红色,说明血清中的血红蛋白含量太高,有溶血现象。胎牛血清一般范围是30-40mg/ml,数值偏高,说明的牛龄偏大,不是胎牛;数值偏低,表明血清可能掺水了。标准为不高于20mg/dl,颜色越红,数值越高;反之,数值越低。国产血清,大多高于ph7.5,进口胎牛血清,大多低于ph7.5,具体原因未知,可能和牛龄有关,这也能用来初步鉴别血清的来源。胎牛血清的细菌内有毒的 ≤5(EU/ml);牛腹泻病毒:阴性;大肠杆菌噬菌体:阴性。
多数细胞培养中血清的热灭活并不是必要的。很多场合下,热灭活并不会改善细胞的生长,却降低了支持细胞生长的能力。即使在少数有促进的情况下,其促进的比率也是微不足道的。另外,血清的热灭活导致的沉淀常常被认为是微生物的污染,从而给用户和供应商都带来不必要的麻烦。所以胎牛血清不推荐热灭活。热灭活一般是指在做免疫相关的试验中,通过加热灭活掉血清中的补体,以避免对免疫试验的影响。在胎牛血清中,由于胎龄原因,尚未形成完整的补体系统,因此,胎牛血清不会真正干预免疫试验。故不需灭活。并且,热灭活反而可能导致胎牛血清中部分重要的生长因子的活性衰减,进而影响细胞培养效果。血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。韶关标准级胎牛血清厂家
血清的主要作用:提供基本营养物质:氨基酸、维生素、无机物、核酸衍生物等,是细胞生长必须的物质。台州OriCell血清价格
国际上流行的【血清融化三步法】可较为大限度地保存血清中因子的活性,不会产生沉淀,同时能缩短血清融化时间。关于胎牛血清的灭活:真正的胎牛血清因为胎牛没有形成有效补体,如果针对补体灭活的话,就不需要。其他情况根据实验设计来决定。胎牛血清的浓度:胎牛血清通常是以2%~20%的比例加到基础培养基中,混合后配成完全培养基。曾有文献报道,不同胎牛血清浓度对细胞存在一定的影响,尤其是干细胞和原代细胞。具体很好浓度需要用户根据自己的实验来确定,以既保证培养的效果,又避免血清的浪费。台州OriCell血清价格
上海司鼎生物科技有限公司主要经营范围是医药健康,拥有一支专业技术团队和良好的市场口碑。公司业务分为免疫印迹(WB)技术服务,荧光定量PCR技术服务,膜片钳电生理技术服务,在体光纤成像记录技术服务等,目前不断进行创新和服务改进,为客户提供良好的产品和服务。公司注重以质量为中心,以服务为理念,秉持诚信为本的理念,打造医药健康良好品牌。司鼎生物立足于全国市场,依托强大的研发实力,融合前沿的技术理念,及时响应客户的需求。
胎牛血清存在一些问题,如批次间的变异性、潜在的病原体污染和免疫原性等。批次间的变异性是指不同批次的胎牛血清在成分和质量上存在差异。这可能会对实验结果的可重复性和可比性造成影响。为了解决这个问题,一些研究人员提出了对胎牛血清进行特殊处理的建议。例如,可以通过超速离心、过滤、冻干等方法来去除一些不需要的成分,以提高胎牛血清的一致性和稳定性。另一个问题是潜在的病原体污染。胎牛血清是从动物体内提取的,因此存在一定的病原体污染风险。这些病原体可能包括病毒、细菌、菌等。虽然现代的血清处理方法可以有效地去除或灭活大部分病原体,但仍然存在一定的风险。为了降低这个风险,一些研究人员建议使用经过特殊处理的胎牛血清...