在细胞培养过程中,经常少不了HEPES缓冲液。那么,HEPES缓冲液的配制和使用方法怎样呢?HEPES缓冲液是一种弱势,在开放式的培养条件中,若加入HEPES,可防止培养基内pH氧化升高,从而将PH维持在7.0左右。HEPES分子量为238.31,化学名:4-羟乙基哌嗪乙磺酸,分子式:C8H18N2O4S。HEPES常用于生物缓冲剂,pH值缓冲范围:6.8-8.2,用在生化诊断试剂盒、DNA/RNA提取试剂盒及PCR诊断试剂盒里。对细胞无毒性作用。它是一种氢离子缓冲剂,能较长时间控制恒定的pH范围。使用终浓度为10-50mmol/L。国内艾伟拓注射用HEPES已登记!广东备案登记号HEPES批量
1、中文名称:HEPES(供注射用)2、中文名:羟乙基哌嗪乙磺酸3、英文名称:(2-hydroxyethyl)piperazine-1-ethanesulfonicacid4、化学名称:N-2-hydroxyethylpiperazine-N'-2-ethanesulfonicacid5、商品名:HEPES6、分子式:C8H18N2O4S7、CAS:7365-45-98、级别:化学试剂级9、备案登记号:已登记、DMF备案号:登记中11、生产商:艾伟拓(上海)医药科技有限公司12、代理商:艾伟拓(上海)医药科技有限公司
14、性状:本品为白色或类白色颗粒或白色结晶粉末。15、纯度:>99.5%(各项指标详见COA)。16、溶解性:Solubleinwater(1M)at20℃17、分子量:238.318、熔点:234-238°C19、沸点:210-215℃20、酸度系数(PKa):7.5(25℃) 上海药用HEPES生产厂家AVT注射用HEPES已登记!
(5)缓冲溶液在稳定性方面各显利弊:①Tris-HCl缓冲溶液pH值受外界影响较大,一般现用现配。同时需要注意Tris是一级脂肪胺,分子结构中的氨基易与醛类化合物发生缩合反应,是一些生化实验的抑制剂。②硼酸盐缓冲液有一定毒性,不宜用做注射液或者口服液的缓冲液。③虽然磷酸盐缓冲溶液稳定性很好,但磷酸根具有一定的络合能力会抑制一些与金属离子有关的生化反应。④HEPES缓冲溶液是较理想的生物缓冲剂,但其有多种生物学效应,如:缩短血液凝固时间、减缓平滑肌收缩频率以及阻断细胞膜上的阴离子通道等,在一定程度上会影响患者身体状态,使用时应需注意。
HEPES使用方法有两种:(1)HEPES可按所需的浓度直接加入到配制的培养液中,再过滤除菌。每1000ml培养液中加入2.38克HEPES,待溶后用lNNaOH调pH至7.2,滤过除菌后使用。此时HEPES的使用浓度为10mmol/L。(2)亦可配成100x贮存液(lmol/L),使用前取99ml培养液加入lml贮存液,**终应用浓度仍为10mmol/L。lmol/L(100x)HEPES贮存液配制方法:取23.8gHEPES溶于90ml双蒸水中,用lNNaOH调pH至7.5一8.0,然后用水定容至100ml,过滤除菌,分装小瓶(2ml/瓶),4℃或-20℃保存。需要注意的是,HEPES缓冲液的使用终浓度为10-50mmol/L,对细胞无毒性作用。一般情况下,浓度为20mmol/L的HEPES即可达到缓冲能力。现在市售HEPES为约10g包装的小瓶,大家根据实际情况正确灵活配制就OK了AVT注射用HEPES已登记?
缓冲溶液的作用原理是通过互为酸碱缓冲对之间的酸碱平衡移动来抵御外加少量酸、碱以及稀释作用的。缓冲溶液自身pH值可根据公式进行计算,缓冲溶液的缓冲能力可以用缓冲容量进行标度。但是,任何缓冲溶液的缓冲能力都是有限的,因为当大量的H+或OH-进入溶液时,缓冲溶液中的缓冲对将被大量消耗,抗碱、抗酸的作用也随之减弱直到消失。实际应用中各缓冲对组成的缓冲溶液都有比较好的缓冲范围。在实际生产过程中,如果选择的缓冲溶液缓冲范围与预期偏差较大,使用大量强酸/强碱或许可以强行将溶液pH调至预期值,但此时溶液体系的缓冲容量已消耗殆尽,无法起到应有的缓冲保护效果,对制剂产品后续的加工及长期储存稳定性造成影响。注射级,低内***、国产化稳定供应、高性价比注射级HEPES找AVT!海南备案登记号HEPES
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生物缓冲剂在生物实验中会经常被用到,它们种类繁多,可能你需要的缓冲剂和你选的缓冲剂表面符合,实际使用时就存在一定的差异,所以选好合适的缓冲剂是很有必要的;同时,不同缓冲液差别也很大。湖北新德晟带你来聊聊Tris-HCl缓冲液与HEPES缓冲液的之间的区别。Tris-HCl缓冲液Tris缓冲液是在生物化学研究中使用较***的一种缓冲剂,其本身为弱碱,常用有效pH在“中性”范围,Tris-HCl缓冲液:pH=7.5~8.5;Tris-磷酸盐缓冲液:pH=5.0~9.0。Tris-HCl缓冲液优点1、Tris-HCl缓冲液稳定,与生理体液的相容性好(Tris-HCl与钙、镁离子不会形成沉淀;相反,磷酸盐与钙、镁离子会产生沉淀);2、而且相同PH,相同浓度的Tris-HCl缓冲液的离子强度低,这对酶类测定尤为重要,因为大离子强度易致有些酶失活。因此,有时用Tris-HCl代替磷酸盐缓冲液,效果更好。广东备案登记号HEPES批量
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