在细胞培养过程中，经常少不了HEPES缓冲液。那么，HEPES缓冲液的配制和使用方法怎样呢?HEPES缓冲液是一种弱势，在开放式的培养条件中，若加入HEPES，可防止培养基内pH氧化升高，从而将PH维持在7.0左右。HEPES分子量为238.31，化学名：4-羟乙基哌嗪乙磺酸，分子式:C8H18N2O4S。HEPES常用于生物缓冲剂，pH值缓冲范围：6.8-8.2，用在生化诊断试剂盒、DNA/RNA提取试剂盒及PCR诊断试剂盒里。对细胞无毒性作用。它是一种氢离子缓冲剂，能较长时间控制恒定的pH范围。使用终浓度为10-50mmol/L。关于HEPES缓冲溶液的配制，不同的文献资料有不同的说法。根据用途，一种是单纯的HEPES+NaOH，另一种是HEPES+盐。艾伟拓稳定供应注射级海藻糖、蔗糖、TRIS/TRIS-HCl、HEPES等生物保护剂与缓冲盐。江西HEPES生产厂家
粉末可于室温保存数年。不过一经静置，散装粉末可能聚集在一起，形成硬块，但是不会影响其化学性质。储存方法：MOPS粉末可以室温稳定保存数年。长时间放置可能会结块，不影响其使用和化学性质。注意事项：MOPS缓冲液可于2~8℃保存至少6个月，用0.2μm滤膜过滤除菌，不推荐高压灭菌。如需配制无核酸酶的MOPS溶液，可先对水进行高压灭菌后，再加入粉末溶解。4-羟乙基哌嗪乙磺酸HEPES，CAS是7365-45-9，是可满足于所有生物学研究的比较好缓冲液之一，是一种两性离子有机化学缓冲液，和MES、MOPS一样都属于“Good”缓冲液。PH缓冲范围为6.8-8.2。HEPES缓冲液常用于细胞培养的缓冲体系，常用工作浓度为10-25mM；与无机碳酸氢盐缓冲液相比，在组织或者***培养中表现出更好的pH控制能力。它还用于等电聚焦电泳实验。用作电镜观察蛋白沉积技术合适的缓冲体系，它不会对金属基板造成负面影响。用作定量和选择性测定抗原-抗体反应的缓冲液，不适合用在福林酚蛋白测定，但不会影响Biuret蛋白定量分析。江西药用辅料HEPES药用采购AVT注射用HEPES已登记。
生物缓冲剂在生物实验中会经常被用到，它们种类繁多，可能你需要的缓冲剂和你选的缓冲剂表面符合，实际使用时就存在一定的差异，所以选好合适的缓冲剂是很有必要的；同时，不同缓冲液差别也很大。湖北新德晟带你来聊聊Tris-HCl缓冲液与HEPES缓冲液的之间的区别。Tris-HCl缓冲液Tris缓冲液是在生物化学研究中使用较***的一种缓冲剂，其本身为弱碱，常用有效pH在“中性”范围，Tris-HCl缓冲液：pH＝7.5～8.5；Tris-磷酸盐缓冲液：pH＝5.0～9.0。Tris-HCl缓冲液优点1、Tris-HCl缓冲液稳定，与生理体液的相容性好（Tris-HCl与钙、镁离子不会形成沉淀；相反，磷酸盐与钙、镁离子会产生沉淀）；2、而且相同PH，相同浓度的Tris-HCl缓冲液的离子强度低，这对酶类测定尤为重要，因为大离子强度易致有些酶失活。因此，有时用Tris-HCl代替磷酸盐缓冲液，效果更好。
关于HEPES缓冲溶液的配制，不同的文献资料有不同的说法。根据用途，一种是单纯的HEPES+NaOH，另一种是HEPES+盐。各种配制方法总结如下：一、500ml1MHEPES,pH=7.0Stocksolution的配制119.15gHEPES溶解在400ml蒸馏水中，加0.5~1M的NaOH水溶液调节至少所需pH(HEPES的有效pH范围是6.8~8.2)，然后用蒸馏水定容至500ml，于4摄氏度保存。二、加少量盐的HEPESBuffer配方(500ml)HEPES6.5g、NaCl8.0g、Na2HPO4.7H2O0.198g、用0.5MNaOH水溶液调节pH值，***定容。三、2×HEPES缓冲盐溶液的配制将1.6gNaCl、0.074gKCl、0.027gNa2HPO4.2H2O、0.2g葡聚糖(glucanordextran)和1gHEPES溶解在90ml的蒸馏水，用0.5MNaOH调节至所需pH值，再用蒸馏水定容至100ml即可。国内AVT注射用HEPES已登记。
储存方法：HEPES缓冲液在2-8℃下可保存1年。注意事项：HEPES缓冲液运输时需要加冰袋。但储存时避免冷冻，否则会有盐类物质析出。N-三(羟甲基)甲基甘氨酸Tricine，CAS是5704-04-1，是一种两性离子缓冲液，名字由Tris和glycine衍生而来，结构类似于Tris，但是高浓度具有比Tris更弱的抑制性，也是“Good”缓冲液之一，**初开发用于提供叶绿体反应的缓冲体系。Tricine的有效pH缓冲范围为7.4-8.8，pKa=8.1（25℃），常用做电泳缓冲液，以及用来重悬细胞沉淀。Tricine具有低负电荷和高离子强度的特性，非常适用于电泳分离1~100kDa的低分子量蛋白。基于萤火虫荧光素酶的ATP分析实验中，比较10种常见的缓冲液，Tricine（25mM）表现出比较好的检测效果。另外，在自由基诱导的膜损伤实验中，Tricine还是一种有效的羟自由基清除剂。作者：泰安格林化工链接：AVT稳定供应注射级海藻糖、蔗糖、TRIS/TRIS-HCl、HEPES等生物保护剂与缓冲盐！安徽羟乙基哌嗪乙磺酸HEPES价格
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羟乙基哌嗪乙磺酸（供注射用）（HEPES）4-羟乙基哌嗪乙磺酸（简称HEPES），分子式为C8H18N2O4S。分子结构中既含有酸性的磺酸基（－SO3H），又含有两个碱性叔胺氮，所以呈现两性，可用来配制两性离子缓冲液。该缓冲溶液一般由一定量的HEPES溶于蒸馏水中，再用氢氧化钠调节pH至适当值。其pH缓冲范围一般为6.8~8.2。缓冲溶液的浓度以及外界温度对其pH值影响不大，因此能够较长时间维持稳定的pH值。因HEPES分子中的-SO3H呈现较强的酸性，易给出H+；两个叔胺氮各含有一个孤对电子，呈现碱性，可以接受H+生成季铵盐。所以磺酸基和叔胺在水溶液中互为缓冲对。而且，单个HEPES分子中的叔胺和磺酸基也可传递H+生成内盐，即两性离子。在水溶液中，HEPES分子、内盐以及磺酸基和叔胺各自产生的离子之间因H+或OH-的转移而能够相互转化建立平衡关系，凭借该平衡关系的移动来抵御外来酸碱的影响来调节溶液pH值稳定，所以具有缓冲作用，其平衡转化关系见下图。江西HEPES生产厂家
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